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相似文献
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1.
真核生物表达系统研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
从毕赤酵母表达宿主菌,表达载体,外源蛋白在毕赤酵母中的表达,毕赤酵母表达系统的优化和丝状真菌的转化,CBH表达系统及rDNA整合序列等方面综述了近年来关于毕赤酵母和丝状真菌表达系统的研究进展.  相似文献   

2.
巴斯德毕赤酵母表达系统是应用较为成功的外源蛋白表达系统之一,它具有真核生物表达系统的特点,能够对目的蛋白进行类似高等真核生物的信号肽剪切、二硫键形成、糖基化等过程的翻译后蛋白加工,至今已有多种外源蛋白在该表达系统中成功表达.本文综述了毕赤酵母表达系统的一些特点和优势、毕赤酵母表达载体组成和外源蛋白在毕赤酵母中表达的过程.  相似文献   

3.
采用PCR方法克隆获得拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因成熟肽片段,将其连接到Pichia pastoris酵母表达载体pPIC9K中,构建了分泌表达载体pPICgk-Scy.电击转化毕赤酵母GS115,经表型筛选和PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合人酵母基因组中.以甲醇诱导表达阳性克隆,上清中表达产物经过Tricine-SDS-PAGE鉴定与预期的目的蛋白大小(约10ku)相符.并利用琼脂孔穴扩散法证明了表达产物能抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长.  相似文献   

4.
甲醇营养型巴斯德毕赤酵母已被广泛应用于外源蛋白的表达,但是作为一个外源蛋白表达系统,其还有待进一步完善。进一步提高外源蛋白的表达量以及形成折叠正确的目的蛋白,成为了改造毕赤酵母菌株的一个热点。基因缺失,是一个常用的改造和构建新的毕赤酵母重组菌株常用的方法。巴斯德毕赤酵母直接基因缺失方法主要分为两类:有标记的插入替换和无标记的Pop-In/Pop-Out。本文系统地介绍了这两种方法,分别比较了各自的优缺点,为它们在巴斯德毕赤酵母中进行基因敲除提供了一定参考意义。  相似文献   

5.
毕赤酵母是真核细胞常用表达系统之一,具有细胞密度高、纯化方法简单、转录后修饰功能完善等优点.作为重要的调控元件,表达系统中启动元件的功能强弱与表达效率的高低密切相关.目前,毕赤酵母表达系统中常用的启动元件分为三类,分别是以p A OX为代表的甲醇诱导型、以pGAP为代表的非甲醇诱导型,还有一些新型工业酵母启动子也是理想的表达系统启动元件.充分了解这些酵母启动子的最新研究进展,可以为工业酵母表达系统的优化提供重要的发展思路.  相似文献   

6.
该文利用RT-PCR方法从里氏木霉mRNA获得EGII cDNA,插入酵母表达载体pPIC9K,整合到毕赤酵母染色体上,获得重组酵母菌株GS115-EGII,通过高密度发酵条件下甲醇诱导,使EGII基因在毕赤酵母中得到了高效表达。  相似文献   

7.
目的:对毕赤酵母重组菌GS115-Ch—Glu菌种进行发酵脱毒条件的优化,为大规模发酵重组毕赤酵母获得高表达目的蛋白奠定基础。方法:以毕赤酵母重组菌为实验菌株,分别以葡萄糖、乳糖、玉米淀粉、蛋白胨、甘油、玉米淀粉+甘油为碳源,研究不同碳源对菌株细胞生长的影响。结果:毕赤酵母重组菌的最适碳源为玉米淀粉,最适浓度为2.5%。  相似文献   

8.
为了优化24孔板培养毕赤酵母GYW-1合成谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的发酵条件,本文采用单因素实验和正交试验对24孔板的发酵条件进行优化.结果表明,毕赤酵母GYW-1 24孔板发酵产GSH的最优发酵条件为:酵母粉44 g/L、柠檬酸铵15 g/L、接种量12%.通过对发酵条件的优化,可以明显提高毕赤酵母GYW-124孔板发酵产GSH的产量(43.815 mg/L),较初始条件的产量增加了55%.  相似文献   

9.
为分析碳源对嗜热β-半乳糖苷酶在组成型重组毕赤酵母中的表达水平,葡萄糖、果糖、丙三醇、乳糖、蔗糖和麦芽糖分别用于配制培养基的碳源.当以单糖和甘油为碳源时,酵母的生长和重组嗜热β-半乳糖苷酶的分泌水平要优于双糖;以果糖为碳源时,重组酵母分泌嗜热β-半乳糖苷酶的水平最高,其次为葡萄糖和丙三醇,蔗糖要高于麦芽糖,乳糖最低.  相似文献   

10.
法夫酵母转化类胡萝卜素生产虾青素的初步研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
对法夫酵母细胞及液氮破壁的菌体碎片转化类胡萝卜素为虾青素进行了研究.试验结果表明,法夫酵母细胞可以吸收类胡萝卜素并将其转化为虾青素;液氮破壁的法夫酵母菌体碎片具有类胡萝卜素转化酶活性,可转化类胡萝卜素为虾青素.单因子试验结果显示,选择乙醇为反应溶剂,控制反应温度为4℃,乙醇与水的比例为6至8,反应pH值为2等反应参数较适于液氮破壁的法夫酵母菌体碎片转化类胡萝卜素为虾青素.该试验结果为用法夫酵母细胞或破壁的菌体碎片转化类胡萝卜素为虾青素的商业生产提供理论依据和有价值的技术参数.yh  相似文献   

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