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根据自己抽提高寒植物基因组DNA的实际经验,改进了Clark利用CTAB提取植物基因组DNA的方法,在试验过程中发现,通过在研磨材料时加入液氮、剪去端部的吸头转移含有DNA的溶液,并且将加入RNaseA消化RNA的步骤,结果证明改良的CTAB法得到的长鞭红景天基因组DNA浓度和纯度较高,且无无蛋白质和RNA等杂质影响。 相似文献
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本文经过反复实验摸索,在没有液氮的情况下,改良了常用的总DNA的提取方法~SDS法和CTAB法,用这两种方法成功的提取了大花黄牡丹(Paeonia ludlowii)的总DNA。并通过琼脂糖凝胶电泳、分光光度计进行紫外检测发现,提取到的DNA纯度及含量均适合分子生物学操作的要求,为进一步遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究奠定基础: 相似文献
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SDS法和CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析 总被引:1,自引:0,他引:1
选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量法提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方法均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDS法CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB法提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。 相似文献
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以华南远志干叶为材料,采用琼脂糖凝胶电泳的方法,比较研究CTAB法、高盐低pH法和SDS法3种方法对样品DNA提取。结果表明:改良的CTAB法所提取的DNA条带清晰,无明显降解,可供进一步的分子生物学研究使用。 相似文献
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本试验通过培养转大豆WRKY基因烟草的T1代种子,获得T1代植株.经过卡那霉素的筛选,获得具有抗性的植株,利用CTAB法提取叶片DNA,然后通过聚合酶链式反应(PCR)技术检测外源基因在T1代中的遗传稳定性. 相似文献
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过表达热激蛋白基因或间接地改变热激转录因子的含量获得耐热转基因植物,除了热激蛋白,也可提高渗透调节物的含量,增加去细胞毒害的酶和改变细胞膜流动性来提高植物的耐热性。有研究表明Hsps与植物耐热性的直接联系可能是最大限度减少损害细胞的蛋白质。尽管上述提到的其他三种获得耐热转基因植物的方法具体的操作不一样,但都是间接地更有利于营造强还原和高能量的细胞内环境,从而最大限度地减少有害蛋白质的积聚。因此阻断蛋白质代谢。 相似文献
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研究了阴/非离子表面活性剂的复配液体洗涤剂的规律,通过考察表面活剂的种类、加入量、合成温度及助剂对液体洗涤剂外观性能和去污效果的影响,确定了一种以常用表面活性剂复配而得的去污效果较好的衣料用液体洗剂配方。对衣料液体洗剂的生产有较好的参考价值。 相似文献
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幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法 采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果 PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论 成功构建CTB和cagA融合基因的植物表达载体,为幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础. 相似文献
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杭琦 《内蒙古科技与经济》2000,(Z1)
基因治疗中基因导入法的研究起初侧重于病毒感染途径 ,但确证其安全性极其费时费力。现在很多研究正在发展将基因导入哺乳类的非病毒感染方法 ,非病毒感染途径的主要优点在于不想要的病毒物质不会进入细胞 ,此类方法共同的缺点则在于所转入的 DNA易随宿主细胞分裂而丢失。这里介绍三种非病毒感染方法。1 脂质体包埋一膜融合法首先 ,以一些带正电荷的脂、中性脂和 DNA形成带净正电荷的复合体 ,带正电荷的分子从其带 1~ 4个正电荷的头端与 DNA相接近 ,并且使 DNA结构紧密化 ,绕在脂类形成的内核上。其次 ,它还使细胞膜或内吞体膜不稳定… 相似文献
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本文对原种猪场3头无血缘关系的台系杜洛克种公猪前腔静脉采血,以ACD抗凝,采用4种不同方法(苯酚-氯仿法、改良CTAB法、试剂盒法、Chelex-100法)对采取的猪血基因组DNA进行提取,并以所提取的基因组DNA为模板,采用紫外分光光度计对其进行浓度和纯度的定量检测;采用琼脂糖凝胶电泳法对其进行定性检测;并对RAPD反应体系进行优化设计,用优化后的RAPD体系进行PCR扩增。 相似文献
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本研究采用自制的分段氧化还原反应型引发体系,通过AM的均聚,合成满足油田三次采油用的聚合物,同时根据实验结果,通过加入尿素,链转移剂以及表面活性剂,改善了聚合物的水溶性,具有很强的经济实用性。 相似文献
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目的:建立简便、快捷、稳定可靠的鉴定小鼠基因型方法,维护动物伦理福利。方法:基因敲除小鼠后代鉴定时,分别从鼠尾,鼠耳,趾甲三个部位提取DNA,通过优化DNA提取技术,经分光光度计检测,PCR扩增等技术,比较分析DNA纯度、提取时间,及基因型鉴定结果。结果:取组织提取DNA,经分光光度计检测,发现DNA浓度尾尖最高,耳尖次之,趾甲浓度最低,但是纯度最好。经PCR扩增技术发现不同基因型的不同部位提取DNA鉴定结果一致。结论:剪趾甲提取DNA操作方法相对于其他常规方法,操作简单,耗时最短,基因型鉴定结果可靠,对小鼠本身伤害更小,可用于规模化的小鼠基因型鉴定实验中。 相似文献
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赵凡 《科技成果管理与研究》2010,(9):100-100
林忠平,北京大学教授、博士生导师,1963年毕业于北京大学生物系并考取中国科学院植物研究所的研究生,研究生毕业后留植物所工作,曾任该所基因工程中心主任。1995年调入北京大学,在蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室从事分子生物学和植物基因工程研究。 相似文献