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利用基因组DNA纯化试剂盒稳定、快捷地提取单只大型溞（Daphnia magna）基因组DNA.以提取出的DNA为模板,利用线粒体DNA细胞色素氧化酶I亚基基因（COI）特异性引物,通过降落PCR技术扩增大型溞COI部分基因的序列.序列分析表明,此基因确为大型溞COI部分基因片段,从而证明本研究所提取的线粒体DNA能够... 相似文献
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目的 :比较三种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA对DNA提取效率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法 :分别应用中山医科大学达安公司DNA提取液 ,珠海黑马医学仪器有限公司DNA提取液 ,胍盐酸法三种不同的方法提取人全血基因组DNA。结果 :三种方法提取的DNA纯度平均分别为 :1.4 8,1.5 1,1.5 6 ,各组间差异无显著性。 2 0 0 μL全血中所提取DNA总量平均分别为 1.6 μg ,2 .3μg ,4 .1μg。用 0 .8%琼脂糖凝胶电泳鉴定胍盐酸法制备的DNA效果较其它两种方法好 ,PCR扩增效果差异不明显。结论 :胍盐酸法提取的DNA总量明显高于其它两种方法 ,提取效率高 ,为三种全血基因组DNA提取方法中之首选。 相似文献
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文章初步探讨了用不同DNA提取方法,对盐土中微生物总DNA的提取效果.实验结果表明,由于盐土中微生物数量较少,溶菌酶-SDS-冻融裂解法、溶菌酶-SDS-蛋白酶K-冻融裂解法均无法提取到盐土中微生物的总DNA;变性剂-SDS-高盐法和试剂盒提取法能获得DNA,但效果不佳;只有用变性剂-SDS-高盐修改法能快速、有效地提取盐土中微生物的基因组DNA. 相似文献
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以三色堇叶片为材料,分别采用SDS方法和植物基因组DNA提取试剂盒法对三色堇叶片DNA进行提取,采用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量浓度和质量.结果表明:采用SDS方法提取的DNA质量浓度高,但纯度低,耗时长;试剂盒法获得的DNA纯度高,且该方法操作方便,耗时短,但费用较高.PCR扩增结果显示两种方法所提取的DNA均能满足基因扩增和分子标记检测的需要. 相似文献
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质粒常被用做基因的载体．纯化质粒DNA的方法可以分为3种：碱裂解法、煮沸裂解法和SDS碱裂解法．这些方法可以纯化共价闭合环结构质粒DNA,而大量获得高纯度的闭环结构质粒DNA最经典方法是氯化铯．溴化乙锭密度梯度离心法．该方法经过我们的实践与优化,减少了质粒中蛋白质和基因组DNA的污染,提高了质粒的纯度和得率,所得到的质粒用于拟南芥原生质体转化,效率高达60％～70％,明显高于普通的质粒小量抽提试剂盒所提取的质粒DNA． 相似文献
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目的:介绍一种快速简便地优化多重PCR检测DMD基因外显子缺失的方法及详细步骤.方法:采2ml外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用优化的多重PCR法直接检测DMD基因外显子的缺失.结果:用该方法检测DMD基因外显子缺失结果准确清晰.结论:用优化的多重PCR技术可以直接检测DMD基因外显子缺失,跟通常使用的9对引物一步法相比,具有经济、快速、简便等特点. 相似文献
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质粒DNA提取方法的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
以含有原核表达载体pet21a和真核表达载体EGFP的DH5α系列菌株为材料,分别采用碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA,通过凝胶电泳分析,对两种质粒提取方法的各自特点进行了比较与分析。认为碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA均可进行后续试验,但试剂盒提取法具有省时、简洁、高效的优势。同时根据在实验过程中所遇到的问题,说明了在进行质粒DNA提取过程中应当注意的问题。 相似文献
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该实验通过SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNA Nanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45 ng/μl、96.48 ng/μl和58.40 ng/μl,纯度（OD260/OD280）分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而Soil gDNA Kit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法（改良法）是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度. 相似文献
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《淮北师范大学学报》2015,(3)
本研究以黑糯玉米幼叶、种子和盾片为材料分别采用CTAB法、SDS法和碱煮法提取黑糯玉米基因组DNA,并通过直接观察DNA形态、琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计法比较利用不同组织材料和方法提取的DNA质量.结果表明,用CTAB法提取的黑糯玉米幼苗的基因组DNA质量较好、纯度较高,能够满足后续分子生物学实验的要求. 相似文献
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固定标本DNA提取方法优化的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
刘娟 《赤峰学院学报(自然科学版)》2007,23(4):18-19
本研究报道了一种在福尔马林固定标本中提取DNA的方法:使用磷酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和乙醇共同处理保存标本,蛋白酶K消化后再用改进的酚氯仿法提取标本基因组总DNA.检验结果证明该方法提取的标本组织DNA可用于PCR等后续分子生物学研究. 相似文献
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吴晓东 《赤峰学院学报(自然科学版)》2015,(12)
目前研究发现人类的花生四烯酸代谢途径中5-脂氧合酶的第254位氨基酸发生一定突变后,此人一般为过敏体质,易患哮喘.本文介绍一种快速简便检测哮喘患者5-LO E254K突变基因的方法及详细步骤.方法：采2ml 外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用等位基因特异性PCR(AS-PCR)法直接对E254K多态性进行扩增分型.结果：用该方法检测5-脂氧合酶E254K多态性结果准确清晰.结论：用我们设计的引物可以对5-脂氧合酶E254K多态性直接扩增分型,跟测序法和限制性内切酶酶切法相比,具有经济、快速、简便、易行等特点. 相似文献
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小麦基因组DNA提取方法比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用4种方法对小麦基因组DNA进行提取,采用琼脂糖凝胶电泳法和核酸蛋白分析仪比较DNA的浓度和质量,结果显示,4种DNA提取方法在DNA浓度上有所差别,方法一所提取的DNA浓度最高,但消耗试剂最多;方法二所提取的DNA浓度最低,有蛋白质污染,但过程简单;方法三和方法四所提取的DNA浓度相当,方法三有蛋白质污染,过程简单,方法四纯度高,过程最复杂.采用同一对引物和反应体系对所提取的DNA进行PCR扩增,结果显示4种方法所提取的基因组DNA均能满足分子标记检测的需要. 相似文献
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选择Trizol法、热酚法、酵母RNA提取试剂盒法3种方法提取热带假丝酵母总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同方法对热带假丝酵母总RNA提取的影响.结果表明:使用酵母RNA提取试剂盒法提取热带假丝酵母总RNA是较为有效且简便的方法. 相似文献
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比较不同方法保存培养的人胃癌SGC7901细胞,用QIAGEN DNA提取试剂盒提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取效果,找到一种简便、经济的保存方法.结果显示,0.85%NaCl和细胞保存液保存5 d的效果好,而0.85%NaCl更经济实用. 相似文献
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《滨州学院学报》2019,(6):60-65
分别采用试剂盒法、SDS-K法和CTAB法,提取了云斑白条天牛成虫的胸部、足部、触角和腹部四个组织部位的DNA。通过计算OD_(260)/OD_(280)和琼脂糖凝胶电泳检测法,对不同提取方法和不同组织部位提取的DNA质量进行了检测比较。结果表明,试剂盒法提取云斑白条天牛的胸部、足部、触角和腹部四个组织部位的DNA条带清晰,OD_(260)/OD_(280)均在1.80～1.86,DNA质量最高;SDS-K法提取DNA质量次之;CTAB法较差,基本无条带。不同组织部位提取的DNA,胸部质量最高,足部次之,其浓度由高到低顺序依次为,胸部>足部>触角>腹部。因此,提取云斑白条天牛成虫DNA时,建议试剂盒法从胸部提取,但样品量较少且稀缺时,从足部提取。 相似文献