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目的:研究青蒿异分支酸合酶的表达模式,评价其对青蒿素含量的影响。创新点:该研究首次克隆了青蒿异分支酸合酶基因(AaICS1),并发现AaICS1影响青蒿素的合成,为更有效地开发利用青蒿提供了新思路。方法:根据青蒿转录组数据,利用聚合酶链式反应(PCR)克隆AaICS1基因和启动子,并进行多重序列分析和启动子作用元件预测。通过实时定量PCR(q RT-PCR)对AaICS1进行表达分析,用Southern杂交分析AaICS1的拷贝数。构建AaICS1过表达载体和干扰表达载体,转化青蒿获得转基因植株,用高效液相色谱法(HPLC)分析青蒿素含量。结论:AaICS1含一个总长为1710 bp的完整阅读框,编码570个氨基酸,与其它植物的ICS基因具有较高的相似性。Southern杂交结果表明AaICS1为单拷贝(图4),q RT-PCR结果显示该基因能够响应伤害、干旱、盐胁迫和水杨酸的处理,处理后基因表达量提高(图6),和启动子作用元件预测相符。q RT-PCR结果显示过表达转基因青蒿中AaICS1表达量提高,干扰转基因青蒿中该基因表达量降低(图7)。HPLC显示过表达AaICS1转基因植株中青蒿素含量提升,最高可达对照的1.9倍(图8)。 相似文献
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植物转基因沉默的机制及消除 总被引：1，自引：0，他引：1
随着转基因技术在各个领域的深入发展 ,转基因沉默已引起越来越多的人关注 .其作用机制主要有三种 :位置效应、转录水平的基因沉默和转录后水平的基因沉默 .实验表明 ,MAR不仅能提高植物中转基因的整体表达水平 ,同时还可以降低不同转化体之间的差异 ,有效消除植物转基因沉默 相似文献
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近年来在拟南芥、水稻等物种中对赤霉素生物合成途径的研究日益完善,但苹果中的赤霉素生物合成途径尚未明确.文章通过构建苹果GA-3氧化酶基因MdGA3ox1的植物表达载体,并将该基因通过农杆菌介导法转化到烟草中来快速验证其在植物中的功能.结果发现:MdGA3ox1对烟草的表型产生了很大的影响,既有赤霉素过量的典型表型,也有非典型的表型.造成这种表型的原因可能有两个:一是在烟草赤霉素生物合成途径中,GA3ox不是最关键的基因;二是基因的表达需要特定的的转录因子,在烟草中的启动子和苹果中不同,结合的转录因子也不同,从而造成了表型的多样化. 相似文献
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以过量表达 AtHsfAla 及 AtHsfAla 基因沉默的转基因植株为材料,通过控制土壤水分进行干旱处理,结果显示,过量表达型干旱处理后的存活率最大,而基因沉默型最小,表明 AtHsfA1a 能增强植物的抗旱性。为了从生理水平研究 AtHsfA1a 提高抗旱性的机制,研究发现过量表达型的叶片相对含水量和叶绿素含量最高,而沉默型最低。不同基因型植株的 H2 O2和 MDA 的含量正好相反,说明 AtHsfA1a 通过保护细胞膜而减小细胞所受氧化伤害来提高抗旱能力。 相似文献
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耐辐射奇球菌(D.radiodurans,DR)在极端胁迫条件下能够继续生存,其耐辐射奇球菌基因组中(DRR1)拥有一个独特的极端环境抗性基因组而被广泛研究.DR1372基因就是在DR R1中克隆得到的一个基因,其蛋白序列存在一个Why功能域,此功能域可能参与了植物的抗旱过程.我们利用基因工程手段首先构建了植物DR1372-GV3103表达载体,然后利用花序浸染法成功将目的基因DR1372转入拟南芥中,最后对阳性植株进行盐胁迫,证实了DR1372基因在拟南芥中的表达明显改善了转基因植株的耐盐性.初步建立了农杆菌介导DR1372基因转化拟南芥体系,为后续DR1372基因的功能研究工作提供了理论基础. 相似文献
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采用称质量法和小液流法在果期对辣椒植株进行干旱处理,研究干旱胁迫对辣椒叶片水势和果实中Vc含量的影响.结果表明:叶片水势随着干旱胁迫程度的增加而不断降低,轻度干旱、中度干旱、重度干旱3种处理的叶片水势均显著低于CK.从花后第25天开始持续不同程度的干旱处理,轻度干旱有利于果实Vc含量的积累;在果实成熟的不同阶段进行干旱胁迫发现,花后第40天,正常供水的植株辣椒果实Vc含量较高;花后第40到45天,轻度和中度干旱均能提高果实Vc的积累,而重度干旱胁迫则明显抑制果实Vc的积累.研究结果可为干旱地区辣椒果实Vc含量的提高提供一定的参考. 相似文献
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改造后的抗虫基因 Cry IB用杆菌介导的方法转入烟草 ,转基因植株经 PCR和 DNA分子杂交检测 ,结果证实 :抗虫基因已整合到烟草基因组中。 相似文献
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脱落酸在植物干旱、高盐或低温等逆境胁迫的反应中起重要作用。介绍脱落酸在干旱胁迫反应中调节气孔关闭、诱导抗逆基因表达，调节植物的生理、代谢变化，避免或减少逆境胁迫对植物细胞与组织的伤害作用及作用机制。 相似文献
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采用纸培法对转ZmPP2C2基因烟草和野生型烟草种子进行盐胁迫试验,设置了6个浓度梯度的NaCl溶液进行处理.结果表明:种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数总体上随盐溶液浓度的升高而降低,在盐溶液浓度为50mmol/L时,转基因烟草最低,明显低于野生型烟草.而盐溶液浓度为150mmol/L时,转基因烟草发芽势明显高于野生型烟草.叶绿素含量的变化比较复杂,在盐浓度为100mmol/L、150mmol/L时,转基因烟草随盐溶液浓度的升高下降比较明显,而野生烟草是先升高后下降. 相似文献