用密度梯度离心法富集源于小鼠胚胎干细胞的运动神经元样细胞前体     

StephanieRichardsonMilazi  BenjaminRixBrooks  Jean-LucMougeot 《河北北方学院学报(医学版)》2011,(1)

目的:我们的目标是从源于胚胎体(EBs)的小鼠胚胎干细胞(mESCs)中分离运动神经元样细胞前体(MNLCPs),以用于发展针对运动神经元疾病的药物筛选试验和移植疗法.天然Shh蛋白(或Shh通路激动剂)和维甲酸诱导的胚胎体中,MNLCPs和未分化细胞的含量是不确定的.如果不把未分化的细胞从细胞培养中充分去除,其可能会干涉药物筛选试验或在移植后增生.我们开发了一种以密度梯度离心法为基础的富集MNLCPs的方法.方法:我们用Wichterle等人2008年改进的方法,将mESCs( HBG3:eGFP:HB9)扩大和分化.通过化学和酶学的无研磨处理,含有绿色荧光蛋白的MNLCPs和未分化细胞的胚胎体被小心轻轻地离解成单细胞.利用OptiprepTM8％～20％逐步梯度离心技术将MNLCPs回收.拥有绿色荧光蛋白的MNLCPs的含量由流式细胞仪检测.结果:我们的结果表明,在胚胎体形成前,mESCs在明胶包被的培养板上生长,其分化为MNLCPs的能力减少.比较mESCs在明胶,明胶与PMEFs,及PMEFs包被的培养板上的生长发现,mESCs在PMEFs包被的培养板上产生含绿色荧光蛋白的MNLCPs的得率为(54.1±11.0)％(x-±s;n=12),在明胶包被的培养板上的得率为(2.8±1.1)％(x-±s;n=9).用密度梯度离心法获得的含绿色荧光蛋白的MNLCPs的平均含量为(87.7±5.5)％(x-±s;n=3).结论:我们的数据表明,不使用细胞分选器,无研磨解离和密度梯度离心法也能用于富集具有高存活率的MNLCPs.有必要对MNLCPs在体外、体内和表型上进行进一步的生理学意义(如神经轴突的生长及形成神经肌肉接头的能力)上的鉴定.  相似文献   

胎盘源细胞治疗急性辐射骨髓衰竭研究     

李军  崔正江  吴天喜  阮小花  薛玮  魏云芳  齐瑞  杨立立  马艳青  和志梅 《昆明师范高等专科学校学报》2015,(3)

核辐射易造成人体造血系统损伤,为此建立急性辐射骨髓衰竭小鼠模型,通过单次腹腔注射异基因小鼠多份不同胎盘源细胞／细胞因子,明确其治疗急性辐射骨髓衰竭的疗效．实验将造模后小鼠随机分为胎盘源细胞治疗组、胎盘源细胞因子治疗组、胎盘源细胞联合细胞因子治疗组以及模型小鼠对照组4组,治疗后统计分析各组小鼠存活时间．结果表明,胎盘源细胞联合细胞因子可有效延缓急性辐射骨髓衰竭小鼠的寿命（P ＜0．05）．  相似文献   

补充锌元素对高强度运动肾促红细胞生成影响     

郭官在 《科技通报》2014,(12)

目的:分析锌元素对高强度运动肾促红细胞生成的影响。方法:选取某体育学院60名男性运动员,将运动员随机分为对照组20人,运动组40人,进行长跑运动训练1周后,根据肾促红细胞血象参数、体重以及运动能力将运动组运动员,划分为运动组20人和补锌运动组20人,持续进行长跑运动和锌元素的补充,观察补充锌元素对高强度运动肾促红细胞血象以及血清肾促红细胞EPO水平的影响。结果:5周长跑运动训练后的运动组运动员与对照组肾促血细胞指标比较,运动组的Hb、RBC和Hct均显著低于对照组(P0.01)。对比补锌运动组和对照组可以看出,补锌运动组的肾促红细胞平均体积(MCV)明显高于对照组(P0.05),其肾促红细胞平均血红蛋白量(MCH)以及红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)明显低于对照组(P0.05),尤其两组的MCHC指标,具有非常显著性差异(P0.01),但两组间剩余肾促红细胞相关参数并无显著性差异(P0.05),补锌运动组的Hb、RBC、Hct水平明显高于运动组(P0.01或P0.05)。补锌运动组运动员的血清肾促EPO水平明显高于对照组和运动组,存在显著性差异(P0.05)。结论:补充锌元素能够促进运动员肾促红细胞的生成,锌元素在一定程度上能够提高机体的运动能力。  相似文献   

有氧运动对中老年大鼠骨髓内皮祖细胞增殖能力的影响     

龚晓明  郑澜  瞿树林  雷志军  凡婷  陈伊琳 《成都体育学院学报》2014,(10)

目的：探讨有氧运动对中老年大鼠骨髓来源内皮祖细胞增殖能力的影响。方法：健康中年雄性 SD 大鼠12只,按体重随机分为两组,即空白对照组和有氧运动组。采用乳酸阈测定法和递增负荷跑台训练建立有氧运动模型,每周训练6天,为期16周。方案结束后12h 提取大鼠骨髓,运用密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以 EGM -2培养诱导其分化获取内皮祖细胞,通过双荧光染色法观察细胞对乙酰化低密度脂蛋白的摄取和与荆豆凝集素1的结合,并结合形态学特征鉴定内皮祖细胞。倒置显微镜下计数贴壁细胞数量和计算集落形成率以反映细胞增殖情况。结果：各组贴壁细胞数量第7d 多于第48h(P <0.01);与对照组相比,有氧运动组贴壁细胞数量明显增加(P <0.01),且集落形成率大(P <0.01)。结论：有氧运动能促进中老年大鼠骨髓来源的内皮祖细胞增殖。  相似文献   

对运动中机体免疫平衡评价方法的思考     

赵广高  苏全生  周石  何建伟  苏利强  张玮 《成都体育学院学报》2014,(12)

在运动科学领域中,研究者通过测定分别产生IFN-y(或IL-2)与IL-4的外周血、脾脏细胞计数(或百分比),脾脏与外周血细胞在培养与刺激条件下分泌Th1、Th2类细胞因子的水平,以及血液中相关细胞因子含量的方法,从细胞数量与功能上来评价运动中机体的免疫平衡状态。分析认为：(1)Th1、Th2细胞在运动中的变化趋势分别与Tc1、Tc2细胞保持一致,Th1/Th2平衡能间接反映T1/T2平衡的变化。(2)相比细胞数量,细胞因子可能更能有效评价运动中的Th1/Th2平衡。(3)通过淋巴细胞分泌的相关细胞因子水平来评价运动中Th1/Th2平衡时,刺激物等实验条件可影响实验结果。(4)循环血中IFN-y、IL-4的含量可用于间接评定运动中的Th1/Th2平衡。通过对运动中Th1/Th2平衡评价方法的分析与评述,以期为未来相关研究的设计提供依据,为其成果内容的表述提供参考。  相似文献   

1995～2003赛季中国足协杯竞赛制度的演变研究     

胡洪泉  聂志强  张保营 《体育成人教育学刊》2005,21(2):9-11

运用文献资料法、比较分析法对1995-2003年我国足协杯竞赛制度中的竞赛期、参赛队伍、比赛场次以及竞赛方式等方面进行了纵向对比研究，阐述了我国足协杯竞赛制度在近十年间的变化。  相似文献   

运动与特异性免疫细胞     

秦莉  陆耀飞 《山西师大体育学院学报》2005,20(Z1):144-146

采用文献综述的研究方法,论述了特异性免疫细胞的特点及适度运动和过度训练对它的影响,从而更好地指导运动训练。  相似文献   

间歇性低氧刺激对提高运动能力影响的研究     

任建华  敖祖辉  赵德龙  江清林 《军事体育进修学院学报》2011,30(2):123-125

间歇性低氧训练是由英、美、俄等国逐步发展起来的一种新的、有效的训练方法.选取了具有一定专业运动能力的24名中长跑运动员(15～22岁,男女各半)作为测试对象,观察常压间歇低氧刺激对人体运动能力的影响并探讨可能的适应机制,为进一步深入研究间歇性低氧训练对人体运动能力的影响提供科学依据.实验结果显示,常压间歇低氧训练可以刺...  相似文献   

Role of Plasma MMP 9 levels in the Pathogenesis of Chronic Pancreatitis     

Venkateshwari A  Sri Manjari K  Krishnaveni D  Nallari P  Vidyasagar A  Jyothy A 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2011,26(2):136-139

Pancreatic fibrosis is a key pathological feature in the etiology of chronic pancreatitis that leads to obliteration of exocrine and endocrine pancreatic tissues and its replacement by fibrous tissue resulting in clinical manifestations. Matrix metalloproteinase 9 is a member of the MMP family that is also known as gelatinase B, degrades type IV collagen of extracellular matrix and basal membrane. The present study is aimed at evaluating the clinical significance of plasma concentration of MMP-9 in chronic pancreatitis. The samples were obtained from 112 chronic pancreatitis patients and an equal number of age and sex matched healthy controls. MMP-9 levels were quantitatively measured by ELISA assay. Statistical analysis was applied to test the significance of results. The present study revealed a significant increase of plasma MMP 9 levels in chronic pancreatitis patients compared to control subjects. Elevated levels were also observed in all the patient groups compared to control subjects with regard to sex, age, addictions etc. MMP-9 degrades the type IV collagens in normal basement membrane, which in turn activates the pancreatic stellate cells which promote the development of pancreatitic fibrosis. Thus, elevated plasma levels of MMP-9 may act as a susceptibility factor for the development of chronic pancreatitis.  相似文献   

棉花胚珠中生长素水平的时空调控提高了棉花纤维的产量和品质     

杨新泉  罗晶  胡琼波  江正强  裴炎 《中国科学基金》2011,(4)

棉花是我国最重要的经济作物之一,同时,中国又是世界上最大的纺织品生产国和消费国。棉花生产涉及2亿棉农的生计和近2千万纺织工人的就业,因此,棉花在我国国民经济中具有举足轻重的地位。但是,随着棉纺织业的发展,目前我国棉花生产面临总量严重不足和纤维品质偏低等问题。提高棉花的产量、改进其品质,对增加棉农收入、促进我国纺织业持续健康的发展,具有十分重要的意义。  相似文献