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建立并优化虎耳草ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨虎耳草种质资源遗传多样性奠定基础.采用正交设计方法和单因子试验,研究TaqDNA聚合酶、dNTP、Mg2+、引物、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响.结果表明:虎耳草ISSR-PCR的最佳反应体系为:在25μL的反应体系中含模板DNA 35ng,Mg2+1.25mmo/lL、dNTP 380μmo/lL、引物1.2μmo/lL、Taq DNA聚合酶1.5U.反应程序为:95℃预变性5min;94℃变性1min,50℃(据不同引物的退火温度)退火70s,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃延伸10min,4℃保存.经过11份虎耳草种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于虎耳草种质资源遗传多样性分析及居群鉴别的研究. 相似文献
22.
王志平 《渭南师范学院学报》2012,(10):61-64
荧光定量PCR技术是在普通PCR技术基础上建立起来的一种利用标准曲线对未知模板进行定量分析的方法.它特异性强、灵敏度高、操作简便、快速高效,在疾病诊断、食品检测、环境监测以及生物学研究等方面具有广泛的应用前景.在阐述荧光定量PCR技术原理的基础上,系统论述了该技术在各方面的应用. 相似文献
23.
PCR技术是在体外合成特异性DNA片段的方法,其基本原理类似于生物体内的 DNA的复制,PCR技术应用于环境监测具有快速、灵敏、准确、简便、特异性强的特点,被广泛应用于水体、气体和土壤等方面环境污染的监测中,PCR技术对环境保护具有深远的意义． 相似文献
24.
Jun MA Teng-long GUO Qing-lian WANG Kun-bo WANG Run-run SUN Bao-hong ZHANG 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2015,(4)
目的：探索16个保守 microRNA在雷蒙德氏棉中的表达情况。
创新点：首次研究了microRNA在雷蒙德氏棉四个组织的表达情况。
方法：设计16个 microRNA的引物,并提取雷蒙德氏棉四个不同组织的 RNA进行实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）。
结论：在不同的组织中,这些microRNA的表达水平差异很大。包括 miR-159、miR-162、miR-164、miR-172、miR-390、miR-395、miR-397和miR-398在内的8个 microRNA 在花蕾中表达含量非常高,而另外一些 microRNA,例如 miR-166和miR-160,在四个不同组织中都有很高的表达量。 相似文献
创新点：首次研究了microRNA在雷蒙德氏棉四个组织的表达情况。
方法：设计16个 microRNA的引物,并提取雷蒙德氏棉四个不同组织的 RNA进行实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）。
结论：在不同的组织中,这些microRNA的表达水平差异很大。包括 miR-159、miR-162、miR-164、miR-172、miR-390、miR-395、miR-397和miR-398在内的8个 microRNA 在花蕾中表达含量非常高,而另外一些 microRNA,例如 miR-166和miR-160,在四个不同组织中都有很高的表达量。 相似文献
25.
不同级别宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者HPV病毒感染情况研究 总被引：1，自引：0，他引：1
目的探讨各级别宫颈上皮内瘤变及宫颈癌患者HPV病毒感染情况。方法本研究采用TCT联合荧光定量PCR法检测HPV病毒,病理学检查为金标准,TCT筛查正常者为对照组。结果HPV病毒感染率随年龄增加有下降的趋势。HPV-16、58、18三种亚型位居各级别宫颈病变HPV病毒感染的前三位。HPV病毒双重或多重感染与宫颈病变级别之间无正相关性。结论HPV-16、58、18三种亚型致病力强,易导致高级别宫颈病变,具有较高的致癌性。 相似文献
26.
Shilpa Reddy Ganasyam Talluri Bhaskar Rao Y. S. R. Murthy Akka Jyothy Madireddy Sujatha 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2012,27(1):69-73
Type 2 diabetes mellitus (DM) is a multifactorial disease where both genetic and environmental factors contribute to its pathogenesis.
Estrogen plays an important role in type 2 DM pathogenesis. A number of polymorphisms have been reported in the estrogen receptor
(ESR1), including the XbaI and PvuII restriction enzyme polymorphisms of ESR1,which may be involved in disease pathogenesis. Metallothioneins (MT) act as potent
antioxidants against various oxidative damages. Very few studies have indicated the association between Estrogen Receptor-α,
MT1 gene polymorphisms with type2 DM. A total of 100 type 2 diabetic women and 100 age, sex matched controls were recruited.
Using the PCR based RFLP method, the PvuII and XbaI polymorphisms of ESR1 and in MT1A (rs8052394 and rs11076161) gene polymorphisms were analysed. The genotype distribution and frequency of mutated allele showed no significant differences
between diabetic and non-diabetic groups in PvuII (χ2 = 2.443; P = 0.1181) or XbaI (χ2 = 1.789; P = 0.1812) and rs8052394 (χ2 = 1.154; P = 0.2840) or rs11076161 (χ2 = 0.4141; P = 0.5199), polymorphisms. This is the first Indian study to conclude that ESR1 and MT1 gene polymorphisms are not associated
with increased susceptibility to type 2 diabetes in Indian women. 相似文献
27.
李弘华 《孝感职业技术学院学报》2003,6(3):71-73
利用设计合成的特异性引物，通过PCR扩增获得乙肝病毒的S区621个bpDNA片段．该扩增产物经EcoRI与BamHI双酶切后直接克隆进入PSK载体进行表达，再通过扩增重组菌株，以获得大量的S区DNA片段，对它们进行光敏生物素标记，制成探针，对乙肝病毒进行检测灵敏度高，特异性强，其灵敏度可达到4pg水平。 相似文献
28.
白头翁水提液预防鸡球虫病作用的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
目的:观察白头翁水提液对鸡球虫病的预防作用,为临床用药提供理论依据。方法:购置1日龄雏鸡210只,适应性饲养10d,选镜检无球虫感染、体重大小相近的健康雏鸡140只,随机分为7组,即空白对照组、氨丙啉组、地克珠利组、感染不给药组(即感染对照组)和白头翁水提液高、中、低剂量组。于第11日龄开始给药,给药第4d接种球虫卵囊,再给药7d,21日龄时称重,然后剖杀全部试验用鸡,观察并计算其成活率、相对增重率、血便记分、盲肠病变记分和卵囊数,并计算出抗球虫指数。结果:白头翁水提液高剂量组能明显提高鸡的成活率和相对增重率,显著减少血便堆数和卵囊数,明显减轻盲肠病变。结论:白头翁水提液对鸡球虫病具有一定的预防作用。 相似文献
29.
对与PCR实验紧密相关的计算机软件——引物设计软件、凝胶图像处理软件、数据分析软件和文献查找软件的应用进行了概述。 相似文献
30.