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利用PCR技术从肝素黄杆菌克隆到肝素酶HepI基因，通过双酶切将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠杆菌E．coliBL21感受态细胞，获得基因工程重组菌．12℃下IPTG诱导表达12h，Glutathione Sepharose 4B纯化后获得较高纯度的HepI酶蛋白． 相似文献
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以对虾白斑病毒DNA为模板扩增出Vp28基因，经限制性内切酶（SmaI，Not I）酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上，重组质粒转化大肠杆菌，经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认，证实成功地构建了Vp28基因原核表达载体．转化菌经IPTG诱导表达，SDS-PAGE显示有与预期大小约52kD相吻合的融合蛋白带，18℃诱导24h后获得了可溶性表达的目的蛋白，采用Glutathione Sepharose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化，获得了纯度很高的目的蛋白． 相似文献
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以凡纳滨对虾为研究对象，通过RT-PCR技术扩增出铁蛋白（Ferritin）基因，经特定的酶切（Notl，Smal）后插入到表达质粒pGEX-4T-2上构建表达载体，重组质粒转化大肠杆菌．经菌落PCR和质粒双酶切鉴定确认，证实成功地构建了对虾铁蛋白基因的原核表达载体．再对重组菌用IPTG诱导表达，采用Glutathione Sepharose4B亲和层析得到目的蛋白用于制备抗体，为研究铁蛋白在对虾抗病毒免疫中的作用奠定基础． 相似文献
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为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura muhicapsid nucleopolyhedrovirus．SpltMNPV）侵染规律，根据SphMNPV中国株（G2）ORF135基因序列设计引物，经PCR扩增，从SpltMNPV日本株（B）基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明，该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus，SeMNPV）pif-2的同源物，读码框含1278bp，编码425个氨基酸的蛋白质，推定分子量为48．6kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示．SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明，SphMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a（＋），经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达，SDS-PAGE分析表明在约69kD处有特异性表达条带，经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。 相似文献
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采取比较研究法对蜡染技艺与文化的旅游资源价值进行了探讨，分析了目前贵州蜡染文化旅游产品开发现状及存在问题。在借鉴国内外比较成功的文化产品开发经验的基础上，认为贵州蜡染文化旅游产品在开发过程中应采取多方参与的模式，注重政府、企业、社区及研究组织之间的内在协作机理，强调旅游产品在游客消费与文化体验之间的多层次表达，并应结合市场环境，积极打造贵州本土蜡染文化品牌，以此推动蜡染文化的传承保护和贵州民族文化旅游的发展。 相似文献
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刘霞 《邵阳学院学报(社会科学版)》2014,(6)
美国当代作家乔纳森·萨弗兰·福尔的小说《特别响，非常近》是9·11主题小说的代表作之一。该小说以独特的方式探讨灾难、创伤、失语与言说之间关系。灾难导致创伤，创伤导致失语。由于失语，作者又不得不使用非情景化的文字、书信、数字符号、序列图片等方式“言说”主人公的创伤及创伤后艰难的存在。这些作为媒介的“言说”方式增加了小说的历史感和真实感。历史的伤痛导致现实的失语，现实的创伤隐藏着历史的原因。“后9·11”小说在寻找其独特的表达方式。 相似文献
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以pErl30a为载体构建的表达拟南芥热激因子AtHsfAla的大肠杆菌EcoliM15（pET30a／His6一AtHsfAla）为实验材料，以IPTG诱导6XHis融合蛋白的表达并经过Ni2＋柱分离纯化AtHsfAla，再通过SDS—PAGE鉴定表达蛋白和纯化蛋白．结果显示，AtHsfAla蛋白在在PET原核表达系统中能够有效表达，并能通过亲和层析获得纯化的AtHsfAla蛋白．研究结果为揭示拟南芥热激因子AtHsfAla的作用机理奠定基础． 相似文献
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标志是视觉语言符号，能够以其特殊的视觉效果传递明确信息。在经济快速发展的今天，企业的形象、文化以及经营战略都与之有着密不可分的关系，它不仅仅是一个符号、一幅组图，更是一种象征品牌内涵的艺术。如何设计出令人印象深刻且蕴含现代设计风格的标志，是本文主要探索分析的问题。 相似文献
10.
乔新国 《南阳师范学院学报》2005,4(4):113-114
歌唱的姿态包括歌唱的姿势与神态。正确的歌唱姿势要求人体外部要有优美的造型，而正确的歌唱神态则要求歌唱要有丰富的表情和良好的精神面貌。 相似文献