Fiber optic biosensor of immobilized firefly luciferase     

蔡谨  孟文芳  吉鑫松 《浙江大学学报(A卷英文版)》2002,3(5):563-566

Luciferase from firefly lantern extract was immobilized on CNBr-activated Sepharose 4B. The kinetic properties of immobilized luciferase were extensively studied. TheK _m′ for D-luciferin is 11.9 μmol/L, the optimum pH and temperature for Sepharose-bound enzyme were 7.8 and 25°C respectively. A luminescence fiber optic biosensor, making use of immobilized crude luciferase, was developed for assay of ATP. The peak light intensity was linear with respect to ATP concentration in range of 10⁻⁹–10⁻⁵ mol/L. A biological application was also demonstrated with the determination of serum ATP from rats bred in low versus normal oxygen environments.  相似文献   

壳聚糖固定化血红蛋白氧载体的制备和性能研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

孟文芳  蔡谨  袁中一 《科技通报》2002,18(5):355-359

以固定化血红蛋白为核心的氧载体研究，有望为航空航天、水下作业以及好氧生物发酵工业等领域提供有效的供氧体系。以猪血红蛋白（pHb）和壳聚糖微粒为氧载体制备的基本原料，采用戊二醛活化将pHb共价固定在壳聚糖微粒上，构成pHb氧载体。研究了活化条件与载体表面醛基形成量及蛋白固定量之间的相互关系，对固定化反应进行了优化。在5％戊二醛浓度下活化反应8h，获得pHb最大固定量约800mg/g，即每克截体固定800mg pHb。从pHb氧载体的氧释放曲线可知，氧释放效率可达40％左右。该氧载体的结合稳定性较好。  相似文献   

修饰猪血红蛋白用于兔心体外延时保存的形态学观察   总被引：2，自引：0，他引：2  

孟文芳  蔡谨  王梅  黄元伟  袁中一 《科技通报》2003,19(3):183-186,191

采用修饰猪血红蛋白为氧载体构建心脏保存液，并用于体外低温保存家兔心脏组织．通过电镜观察心肌细胞超微结构的变化，比较了Krebs-Henseleit保存液及其经3，5-二溴水杨酸双延胡索酸酯修饰猪血红蛋白(DBBF-pHb)及3，5-二溴水杨酸双延胡索酸酯(DBBF)和聚乙二醇双重修饰猪血红蛋白(mPEC-DBBF-pHb)改良的保存液。结果显示，mPEC-DBBF-pHb改良保存液的保存效果最佳，保存24h后心肌细胞核形态规则，肌节清晰，肌丝排列整齐，线粒体结构略有肿胀，但与对照组最为接近．  相似文献