胡桃楸ISSR-PCR反应体系的建立及优化   总被引：3，自引：0，他引：3  

王东娜  牟长城  冯富娟 《实验室研究与探索》2010,29(11)

在研究胡桃楸遗传多样性的过程中,为了获得清晰、重复性好的ISSR扩增结果,采用改良的CTAB法提取胡桃楸基因组DNA,利用正交设计与单因子试验相结合的方法对影响胡桃楸ISSR-PCR反应体系的5个主要因素(Taq酶、Mg~(2+)、dNTP、引物、模板DNA)在4个水平上进行优化设计。通过综合比较分析,筛选出各反应因素的最佳水平,建立胡桃楸ISSR-PCR最佳反应体系:20μL的反应体系中,Taq酶1.0 U,Mg~(2+)2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,模板DNA 50～250 ng,引物0.4μmol/L。在此基础上筛选出13条多态性好、扩增稳定的ISSR引物,并确立了最佳退火温度和循环次数。这一优化系统的建立为今后利用ISSR技术进行胡桃楸遗传多样性、亲缘关系以及物种保护等的研究奠定了基础。  相似文献   

“裸官”现象的原因解析及其治理对策     

牟长城 《宁波广播电视大学学报》2010,8(3):97-100

当前网络上一度火热的＂裸官＂现象,反映出新时期腐败形式发生了变异,同时曝露出当前我国治理腐败的相关制度与现实问题的衔接上出现了漏洞。本文正是从＂裸官＂现象的近况描述入手,来分析这一社会腐败畸形现象产生的现实原因,相应从完善国家形态的民主监督机制和培育社会形态的民主监督机制两个层面提出一些预防治理的见解。  相似文献