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目的载体加dT尾是基于非模板扩增特性而发展起来的,是TA克隆技术的关键步骤之一,但实际应用中加尾率不高,为此对不同二价阳离子对载体加dT尾的影响效果进行比较,以摸索高效加尾条件。方法用限制性内切酶SmaI将质粒pGEM7Zf( )消化成平末端的线性片段,借助二价阳离子和Taq DNA聚合酶的作用在线性片段3-′末端上添加dTTP,随后与Control Insert DNA连接成环状DNA,再转化进E.coli DH5α-FT。根据白色菌落所占比例来评价不同种类和浓度的二价阳离子对T-载体生成的影响。结果不同种类和浓度的二价阳离子加尾效果比较显示,含1 mmol/L Cd2 缓冲体系的加尾效果最佳;Co2 及高浓度的Cd2 容易导致DNA反应体系变得浑浊,甚至出现白色沉淀析出的现象。结论Cd2 最有助于加尾,Mn2 次之,Mg2 最差。 相似文献
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陈旧的课堂教学模式是大学生厌学的重要因素,原因在于没有正视"为什么教?教什么?怎样教?"这个教学的基本理论问题,没有从根源上调动起大学生求学的积极性和主动性。学术、趣味、实用"三位一体"的教学模式从教学的基本理论问题入手,以学术为导向、以趣味为助手、以实用为动力进行教学模式创新,从而提高课堂的教学效率,改善大学生的厌学状态。 相似文献
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前些日子,我很想翻翻辛亥革命领袖黄兴的历史资料。一打听,中外史学界以往很少人研究黄兴,有关黃兴的书籍很难看得到。还好,省政协毛注青同志编著的《黄兴年谱》,由湖南人民出版社出版以后,在新华书店发行了。《黃兴年谱》,有平装和精装两种,精装本由北京中国国际书店及香港三联书店向国外发行。平装本的封面是肖大毅设计的一幅梅花图。据说,黃兴生前喜爱观赏梅花,也会画梅。立秋时节,我怀着学习的心情,来到湖南政协黄花绿叶的院子里,拜访了《黄兴年谱》一书的作者毛注青同志。他先给我看了一个材料,上面写道: 相似文献
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陈喜文 《读与写:教育教学刊》2021,(1)
2020年初春,一场“停课不停学”的线上教学随之全面铺开,教师们利用各种平台进行线上教学。然而发现学生在家学习期间的线上教学也存在许多问题。因此,做好复学后线上线下教学的有效衔接尤为重要。尤其在“调整学生状态,做好学生生命教育和心理疏导”,“制定教学计划”,“优化校本教研”,“优化作业设计”,“线上线下学习共同体构建”等方面都是学校做好复学后线下线上教学衔接的有效策略。 相似文献
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水泥混凝土路面施工中普遍存在混凝土早期开裂的问题,文章主要分析了冷缩产生的温度应力对混凝土早期开裂的重要影响以及确定锯缝时机方法的必要性,并提出了减少混凝土路面早期收缩的预防措施及施工中的质量控制. 相似文献
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