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目的载体加dT尾是基于非模板扩增特性而发展起来的,是TA克隆技术的关键步骤之一,但实际应用中加尾率不高,为此对不同二价阳离子对载体加dT尾的影响效果进行比较,以摸索高效加尾条件。方法用限制性内切酶SmaI将质粒pGEM7Zf( )消化成平末端的线性片段,借助二价阳离子和Taq DNA聚合酶的作用在线性片段3-′末端上添加dTTP,随后与Control Insert DNA连接成环状DNA,再转化进E.coli DH5α-FT。根据白色菌落所占比例来评价不同种类和浓度的二价阳离子对T-载体生成的影响。结果不同种类和浓度的二价阳离子加尾效果比较显示,含1 mmol/L Cd2 缓冲体系的加尾效果最佳;Co2 及高浓度的Cd2 容易导致DNA反应体系变得浑浊,甚至出现白色沉淀析出的现象。结论Cd2 最有助于加尾,Mn2 次之,Mg2 最差。 相似文献
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陈德富 《武汉职业技术学院学报》2006,5(3):14-16
新兴技术具有高度的不确定性与创造性毁灭的特征。在高度不确定的环境下为新兴技术制定投资战略,是新兴技术成功的关键环节。在新兴技术研究开发(R&D)、中试、商业化和生产经营规模化四个阶段要分别控制不同风险,保证投资的高收益。 相似文献
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为解决轴承产品开发过程中生产工序多、工艺流程复杂,信息交换量大的问题,开发了圆锥滚动轴承CAD/CAM集成系统.重点对系统体系结构和产品开发流程,以及系统开发的软件实现等关键技术进行了研究.经实际生产应用,所开发系统极大地提升了企业生产技术与管理水平,缩短了产品开发周期. 相似文献
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中学阶段是体育锻炼培养的黄金时期,在这一阶段对学生体育兴趣、体育习惯的形成与培养是十分重要的。通过问卷调查、文献资料与数理统计法,对在中学开设健美操课的必要性、健美操对中学生身体与心理素质的影响进行研究,对中学健美操课的内容与教学重点进行分析。指出健美操作为一项正在我国蓬勃开展的体育运动项目,以其丰富的内涵及娱乐性与表演性的有机结合,加上明快的节奏、多变的动作,不仅使中学生的身体素质得到加强,更满足了当今中学生求新求异的心理特点及精神需求,在培养中学生的体育兴趣、体育习惯中起着重要作用。 相似文献
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本文拟就四川省高中试用课本数学第三册《数列和极限》一章,谈谈学习后的点滴体会,仅供同志们参考。错漏之处敬请指教。 (一) 人们在研究这一或那一变量时,常常只注意它的值的某一个序列就行了。例如,在观察冶炼过程时,没有必要知道每一瞬时的温度,而只需过一定时间间隔量一下温度就够了。 相似文献