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对纯化的家蚕微孢子的DNA抽提及PCR检测灵敏度进行了研究。结果显示:以0.1mol/L K2CO3 0.1mol/L KHCO3作为诱导剂诱导人工纯化的微孢子发芽是最佳选择,配合proteaseK法,能较好地抽提微孢子的DNA;PCR检测灵敏度研究发现,最低检测微孢子核酸浓度是3.25×10-2pg(25μl反应体系),溶液中只要有4粒微孢子即可检出。 相似文献
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为研究家蚕质型多角体病毒(BmCPV1)的遗传与变异、探讨S8片段的功能,通过RT-PCR克隆BmCPV1苏州株(BmCPV1-SZ)S8的cDNA,并对其核苷酸序列(GenBank登录号:GQ150539)和编码的氨基酸序列进行生物信息学分析.结果显示:S8由1328 bp构成,具有一个编码390个氨基酸残基的开放阅读框;在BmCPV1-SZ S8的编码氨基酸序列与BmCPV1-I和BmCPV1-H的一致性达93%,但与其他非CPV1型的相似程度较低;在推导的蛋白的氨基酸序列中间区域;具有E-丰富和P-丰富的区,域,其局部区域的氨基酸序列与某些蛋白的功能(细胞周期控制、蛋白降解和RNA降解)区域的序列具有一定的相似性;结构域家族分析显示,BmCPV1-SZ S8编码蛋白属GcrA家族,具有与DNA结合的HTH结构域.Blocks分析显示,S8编码蛋白同时具有DNA聚合酶家族、RNA聚合酶2的结构功能域;高级结构分类显示,S8编码蛋白具有与TIM桶酶、肽酶、核苷三磷酸水解酶相似的同源结构.推测该蛋白具有转录调控因子和多功能酶的功能.基于S8编码的氨基酸序列的进化分析显示,相同类型的CPV聚为一类,同一宿主不同类型的CPV相距较远,推测CPV主要根据其类型聚类,而宿主昆虫对聚类的影响相对较小. 相似文献
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家蚕核型多角体病毒p35基因的核苷酸序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
对家蚕核型多角体病毒苏州株（ＢｍＮＰＶｓｕ）ｐ３５基因的序列分析表明：ＢｍＮＰＶｓｕ ｐ３５编码序列为８９７ｍｔ,编码２９８ａａ。同源性分析表明：ＢｍＮＰＶｓｕ ｐ３５与ＢｍＮＰＶＴ３、ＡｃＮＰＶ 、ＳＩＮＰＶ在核苷酸水平上同源性分别为９９．５％、９５．１％、８９．３％,在氨基酸水平上的 性分别为９８．７％、８９．４％、７６．４％,显示了杆状病毒ｐ３５基因在进化上的保守性。ＢｍＮＰＶＴ３中位的Ｎ１ 相似文献
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家蚕丝胶蛋白基因1(ser-1)启动子的克隆及其活性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
家蚕ser-1基因是中部丝腺中特异表达组织特异性基因。为研究家蚕ser-1基因在时空上的调控机制,用PCR的方法克隆了家蚕ser-1基因启动子并进行序列分析,进一步构建了由ser-1基因启动子驱动报告基因DsRed的新型表达质粒pSK-ser-DsRed-PolyA,并通过蚕体和家蚕BmN细胞进行了瞬时表达。结果显示,家蚕ser-1基因启动子的TATA框的保守序列为TATAAAA,位于-24～-30处,CAAT框位于-112～-115处;ser-1基因启动子可以驱动红色荧光基因DsRed在家蚕幼虫的中部丝腺组织和培养的BmN细胞中瞬时表达。 相似文献
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His-猪生长激素融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化 总被引：1，自引：1，他引：1
将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA克隆入大肠杆菌表达载体pET-28a( ),构建出能利用Ni-NTAAgarose柱一步纯化表达产物的重组质粒pPGH020。探讨了大肠杆菌中重组猪生长激素的最佳表达条件和纯化方法,制备并纯化了兔抗pGH抗体。SDS鄄PAGE和Westernblot的分析结果表明,26.5kD处有包括His·Taq、thrombin位点序列和pGH序列的融合蛋白特异条带。凝胶扫描估测猪生长激素的表达量占大肠杆菌胞浆蛋白的17.3%左右。 相似文献
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关于冬虫夏草对乙型肝炎疗效及对免疫性肝损伤保护作用的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
根据近10多年的研究报导及课题组的研究结果，综述了冬虫夏草（CS）对乙型肝炎的治疗效果及对免疫性肝损伤的保护作用。试验证明，乙型肝炎患者经CS治疗后，HbeAg有较高的阴转率，ALT、AST等肝功能指标明显改善，乏力、纳差等症状也大为好转，患者外周血中的CD3、CD4、CD4/CD8均明显提高。即便发生肝硬化者，经一定疗程CS治疗后，硬化症状减轻，肝纤维化得到有效控制和减轻。对免疫性肝损伤有很好的保护作用。 相似文献
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人胰岛素样生长因子Ⅰ型在E.coli和家蚕中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
将hIGF-I基因克隆进原核表达载体pET-28a( ),在E.coli中进行了融合表达,West-ern blotting显示在26 kD附近有一条特异条带。将hIGF-I基因克隆进pBacPAK-8,获得了杆状病毒转移载体pBacPAK-8-IGF-I,在脂质体的介导下,与线性化的家蚕杆状病毒共转染家蚕培养细胞Bm-N,经空斑筛选,PCR检测,获得了重组病毒Bm-Bac-hIGF-Ⅰ。SDS-PAGE检测表明,在感染重组病毒后,家蚕幼虫血淋巴中可以检测到一条分子量约为7.5 kD的特异性条带,ELISA检测表达量达4.51μg/mL蚕血淋巴。 相似文献
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结合该校农科类专业硕士生高级生化与分子生物学实验教学的课程实践,就改革教学模式、更新教学内容、改进教学方法、改善教学条件等方面进行了探索,提出了改革实验教学、培养学生的创新意识的基本构想。 相似文献
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关于虫草的药用成分和药理作用的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
根据研究报导，结合作者主持课题组的研究结果，综述了虫草中所含有的各种有效成分。药效研究表明，虫草具有增强免疫功能，抗肿瘤，抗菌消炎，镇静，保肺肾，抗缺氧和抗衰老等功能。 相似文献
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将斑节对虾酚氧化酶原（prophenoloxidase，proPO）基因克隆进pET28a（＋），在大肠杆菌BL21菌株中诱导表达，SDS-PAGE和Western-blotting分析均能检测到一条分子量为79．4kDa的特异性条带，与推导的融合蛋白理论分子量82．4kDa基本相符；包涵体变性后对经Ni—NTAagarose纯化的变性液进行复性，表现出0．3851U／mg．min的PO活性；不同条件下的诱导表达结果显示，18℃时诱导培养能检测到目的蛋白的可溶性表达，经诱导9h后可溶性表达比例达到最高，约占菌体可溶性蛋白总量的s．56％；可溶性表达的目的蛋白纯化后经胰酶消化，可检测到分子量为60kDa、42．7kDa的特异性条带，并表现出0．4249U／mg．min的PO活性． 相似文献