| 大鼠睾丸支持细胞的分离培养及鉴定 |
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| 引用本文： | 张倩,周可柔,胡倩倩,任曼,靳二辉,顾有方,李升和.大鼠睾丸支持细胞的分离培养及鉴定[J].安徽科技学院学报,2018,32(2):1-6. |
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| 作者姓名： | 张倩 周可柔 胡倩倩 任曼 靳二辉 顾有方 李升和 |
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| 作者单位： | 安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100;安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳,233100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31672502;31501968),中国博士后基金特别资助项目(2014T70151),安徽省科技重大专项计划(16030701066),安徽省第七批"115"产业创新团队项目,安徽科技学院稳定人才基金项目(ZRC2013354),安徽科技学院兽医学重点学科项目(AKZDXK2015A04) |
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| 摘 要： | 目的:通过改进大鼠睾丸支持细胞的分离方法,获得高纯度支持细胞。方法:选用18~22日龄雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,去除睾丸被膜、剪碎组织块,采用0.25%胰酶和0.1%Ⅳ型胶原酶单次消化,分别在37℃水浴震荡消化15min、10min,经100目细胞筛过滤收集细胞,置于37℃、5%CO2培养箱中进行培养,24h后大多数细胞完全贴壁,观察细胞生长,待长满培养瓶80%进行传代培养。显微观察不同时间段、不同代睾丸支持细胞的形态,采用免疫荧光方法对睾丸支持细胞进行鉴定。结果:显微观察可见分离培养的支持细胞胞质呈不规则的多处突起,细胞核呈圆形或椭圆形,细胞之间交织成网状;免疫荧光Vimentin特异性表达鉴定显示,所分离培养的细胞为睾丸支持细胞,经显微镜下计数其纯度达95%以上。结论:缩短两步酶消化时间,培养24h后用预冷磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗换培养液,连续传代培养至第三代,此方法简化了分离培养支持细胞步骤,同时提高了支持细胞的纯度和细胞数量。
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| 关 键 词： | 大鼠 支持细胞 分离培养 鉴定 |
Isolation and Identification of Sertoli Cells in Rats |
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| ZHANG Qian,ZHOU Kerou,HU Qianqian,REN Man,JIN Erhui,GU Youfang,LI Shenghe.Isolation and Identification of Sertoli Cells in Rats[J].Journal of Anhui Science and Technology University,2018,32(2):1-6. |
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| Authors: | ZHANG Qian ZHOU Kerou HU Qianqian REN Man JIN Erhui GU Youfang LI Shenghe |
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