| 摘 要： | 目的:以竹材加工中产生的大宗副产物(竹茹)为原料,对其中的半纤维素进行分离纯化、结构解析及体外免疫活性的评价,旨在为竹茹半纤维素(BSH)作为免疫功能因子的研发和竹材加工副产物的高值转化提供理论依据和实践指导。创新点:首次采用蒸汽爆破预处理联合热水提取法从竹茹中获得有免疫调节活性的天然乙酰化半纤维素。方法:采用蒸汽爆破预处理联合热水抽提法从竹茹中提取半纤维素;通过阴离子交换柱层析法对优化条件下制得的BSH进行分离;利用化学法和波谱法对分离得到的两个半纤维素组分(BSH-1和BSH-2)进行化学结构解析;采用小鼠脾脏淋巴细胞转化增殖试验、小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红以及分泌NO试验评价BSH、BSH-1和BSH-2的体外免疫调节活性。结论:当蒸汽爆破压力为2.2 MPa和维压时间为1 min时,BSH的得率达到最大,为(2.05±0.22)%(以脱蜡样品干重计),高于未经处理对照样品5.7倍。通过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱对BSH进行分离,获得一个中性组分BSH-1(得率0.79%,纯度95.3%)和一个酸性组分BSH-2(得率1.06%,纯度92.5%)。化学结构解析结果表明BSH-1为乙酰化的阿拉伯木聚糖(分子量:12 800),而BSH-2为乙酰化的4-甲氧基-葡萄糖醛酸阿拉伯木聚糖(分子量:11 300)。体外免疫试验结果表明BSH和BSH-2能够显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖,而BSH-1无此活性;BSH、BSH-1和BSH-2三者均能显著促进巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红及分泌释放NO,且呈现明显的剂量依赖性。综上所述,采用蒸汽爆破预处理联合热水提取法从竹茹中获得的半纤维素含天然乙酰基,并具有体外免疫刺激活性。
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