| 重组FLAG标签的融合表达纯化及亲和常数的测定 |
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| 引用本文： | 邹少林,丁先锋,郭江峰.重组FLAG标签的融合表达纯化及亲和常数的测定[J].科技通报,2010,26(3):350-357. |
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| 作者姓名： | 邹少林 丁先锋 郭江峰 |
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| 作者单位： | 浙江理工大学,生命科学学院,杭州310018 |
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| 基金项目： | 浙江省生物医学工程重中之重学科人才基金 |
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| 摘 要： | 构建了三种融合标签FLAG1(DYKDDDDK)、FLAG2(DYKDYKYK)和FLAG3(DYKGGGYK)的原核表达质粒pGEX-2t-His-NSH2-FLAG,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,表达并纯化重组蛋白GST-His-NSH2-FLAG。生物信息学分析表明FLAG1的亲水性和抗原性较强,FLAG2次之,FLAG3最弱。Western blotting分析表明单抗M2能够识别此三种FLAG融合蛋白。非竞争性酶免疫法测得FLAG1、FLAG2和FLAG3结合单抗M2的亲和常数分别为0.077μM,0.102μM和0.126μM。相关工作为在多肽芯片上应用FLAG标签进行蛋白质相互作用的检测奠定了一定的基础。
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| 关 键 词： | 融合标签 蛋白纯化 亲和常数 |
Fusion Expression, Purification of Recombinant FLAG Tags and Determination of Affinity Constants |
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| ZOU Shaolin,DING Xianfeng,GUO Jiangfeng.Fusion Expression, Purification of Recombinant FLAG Tags and Determination of Affinity Constants[J].Bulletin of Science and Technology,2010,26(3):350-357. |
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| Authors: | ZOU Shaolin DING Xianfeng GUO Jiangfeng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FLAG |
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