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Txt5腺病毒载体构建及其在心肌细胞中的表达
引用本文:彭浩,陈宇,李佑锋,朱旋,周作琼,吴秀山,范雄伟,李永青.Txt5腺病毒载体构建及其在心肌细胞中的表达[J].怀化学院学报,2015(5).
作者姓名:彭浩  陈宇  李佑锋  朱旋  周作琼  吴秀山  范雄伟  李永青
作者单位:湖南师范大学 心脏发育研究中心 蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,湖南 长沙,410081
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81270156;81400304;81470377);湖南省社会发展支撑计划项目(2014SK3009;2015JJ3087);湖南省生物发育工程及新产品研发协同创新中心
摘    要:设计小鼠Txt5基因的特异性引物,将小鼠c DNA作为模板,用PCR扩增出m Txt5编码区,并加入HA标签序列.将这一片段插入p MD-18T载体,再亚克隆至p Adtrack-cmv穿梭载体上.线性化后,转化BJ5183感受态细胞,在BJ5183中发生同源重组获得p Ad-Txt5质粒.p Ad-Txt5线性化后转染293A细胞,包装得到含Txt5基因的病毒.将病毒溶液感染大鼠原代心肌细胞,一段时间后观察绿色荧光,然后通过RT-PCR和免疫印迹法检测HA标签蛋白的表达.结果表明成功构建小鼠Txt5腺病毒表达载体并实现在大鼠原代心肌细胞中的表达.

关 键 词:腺病毒  Txt5  心肌细胞

Construction of Txt5 Adenovirus Vector and Analysis of Its Expression in Cadiomyocytes
PENG Hao,CHEN Yu,LI You-feng,ZHU Xuan,ZHOU Zuo-qiong,WU Xiu-shan,FAN Xiong-wei,LI Yong-qing.Construction of Txt5 Adenovirus Vector and Analysis of Its Expression in Cadiomyocytes[J].Journal of Huaihua University,2015(5).
Authors:PENG Hao  CHEN Yu  LI You-feng  ZHU Xuan  ZHOU Zuo-qiong  WU Xiu-shan  FAN Xiong-wei  LI Yong-qing
Abstract:
Keywords:adenovirus  Txt5  cardiomyocyte
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