| 实时荧光定量PCR技术的操作实践 |
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| 引用本文： | 杨怡姝,孙晓娜,王小利,沈思嗣,李泽琳,曾毅.实时荧光定量PCR技术的操作实践[J].实验室研究与探索,2011,30(7). |
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| 作者姓名： | 杨怡姝 孙晓娜 王小利 沈思嗣 李泽琳 曾毅 |
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| 作者单位： | 北京工业大学生命科学与生物工程学院,北京,100124 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展(973)计划项目(2009CB930202); 北京市教委科研项目(KM200810005015); 北京市自然科学基金项目(5072003); 北京工业大学校青年基金项目(X1015001201001) |
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| 摘 要： | 采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBR(R) Green I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验.介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程；结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析；强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性.
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| 关 键 词： | 荧光定量PCR SYBR(R) Green I 扩增曲线 熔解曲线 |
Experimental Teaching of Real-time Fluorescent Quantitative PCR |
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| YANG Yi-shu,SUN Xiao-na,WANG Xiao-li,SHEN Si-si,LI Ze-lin,ZENG Yi.Experimental Teaching of Real-time Fluorescent Quantitative PCR[J].Laboratory Research and Exploration,2011,30(7). |
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| Authors: | YANG Yi-shu SUN Xiao-na WANG Xiao-li SHEN Si-si LI Ze-lin ZENG Yi |
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| Institution: | YANG Yi-shu,SUN Xiao-na,WANG Xiao-li,SHEN Si-si,LI Ze-lin,ZENG Yi(Department of Life Science and Bioengineering,Beijing University of Technology,Beijing 100124,China) |
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| Abstract: | |
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