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安全环保的烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建
引用本文:陆云华,张新,马立新.安全环保的烟草质体多顺反子定点整合表达载体的构建[J].宜春学院学报,2005,27(6):4-8.
作者姓名:陆云华  张新  马立新
作者单位:1. 湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室,湖北,武汉,430062;宜春学院生物工程系,江西,宜春,336000
2. 宜春学院生物工程系,江西,宜春,336000
3. 湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室,湖北,武汉,430062
基金项目:国家“863”项目(2(D2AA227011)、国家“十五”科技攻关(2001BA70BB)资助项目.
摘    要:根据已发表的序列,通过PCR技术克隆了一系列构建烟草叶绿体多顺反子表达载体所需的元件:质体核搪体(16S)RNA操纵元启动子(Prrn)、质体面A基因3’端(psbA3’)、山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、烟草叶绿体高频同源重组片段(psaA/psbC,大小3463bp)、甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp)。构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM7(-psaA-Prrn-SD-man-SD-gfp-SD-BADH-PSBA3’-PSBC-)。并在大肠杆菌中通过平板定性分析等方法对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定。

关 键 词:多顺反子  载体构建  叶绿体  功能鉴定
文章编号:1671-380X(2005)06-0004-05
收稿时间:2005-06-15
修稿时间:2005年6月15日

Construction of The Safely and Friendly Environmental Tobacco Chloroplast Mulficistron Site Integration Expression Vector
LU Yun-hua,ZHANG Xin,MA Li-Xin.Construction of The Safely and Friendly Environmental Tobacco Chloroplast Mulficistron Site Integration Expression Vector[J].Journal of Yichun University,2005,27(6):4-8.
Authors:LU Yun-hua  ZHANG Xin  MA Li-Xin
Abstract:According to the published DNA sequences,A serial of elements for constructing the tobacco chloroplast multicistron expression vectors have been cloned by PCR technique,including Prrn(a modified plastid ribosomal RNA operon promoter),psbA3'(the 3' region of the plastid psbA gene),BADH gene(encoding betaine aldehyde dehydrogenase,derived from mountain spinach),man gene(encoding mannase),gfp gene(encoding green flurescence protein)and tobacco chloroplast high-frequency homologous recombination ctDNA fragment(psaA/psbC,3463bp).A tobacco chloroplast multicistron expression vector pLM7(-psaA-Prrn-SD-man-SD-gfp-SD-BADH-psbA3'-psbC-) was constructed with these elements.And the function of expression cassette was identified.
Keywords:Multicistron  Construction of chloroplast expression vector  Tobacco  Function identification
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