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弓形虫主要表面抗原1截短型片段的克隆与表达
作者单位:湖南师范大学医学院生物化学教研室 湖南长沙410081
摘    要:为构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)的原核重组表达质粒并获得重组表达蛋白,采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株基因组DNA中扩增SAG1基因,经克隆和测序后,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,PCR和双酶切鉴定阳性菌株,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定观察其诱导的抗体应答.结果表明,PCR扩增出SAG1基因的特异片段,获得的阳性克隆序列与GenBank中的SAG1基因序列一致,SAG1基因被亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,在BL21中表达了SAG1,表达的蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.以上结果说明,已成功构建了弓形虫SAG1的重组表达质粒,在大肠杆菌中表达的SAG1具有良好的免疫学活性.

关 键 词:弓形虫  主要表面抗原1  克隆  表达

Cloning and Expression of Toxoplasma Gondii Major Surface Antigen 1 Truncated Fragment
Authors:YANG Sheng-qing  TANG Xiao-yi  YUAN Shi-shan  CHEN Hai-ming  YIN Le-tu
Abstract:
Keywords:toxoplasma gondii  major surface antigen 1  cloning  expression
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