| 果蝇EF-1α蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 戴悦,任恋,彭佩莹,王盼盼,袁婺洲,吴秀山.果蝇EF-1α蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].怀化师专学报,2013(5):33-36. |
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| 作者姓名： | 戴悦 任恋 彭佩莹 王盼盼 袁婺洲 吴秀山 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室,心脏发育研究中心,湖南长沙410081 |
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| 基金项目： | 基金项目：国家自然科学基金资助项目（30930054;81170229）. |
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| 摘 要： | 为进一步研究延长因子-1（elongationfactor-1α，E-1α）在调控心脏发育和果蝇心脏功能中发挥的作用，制备延长因子-1的抗体．利用生物信息学选择果蝇EF-1α基因抗原亲水区，并设计出特异性引物，PCR扩增出的片段克隆到原核表达pET-28a载体中，转入E．coli中后通过IPTG诱导融合蛋白表达，将His—EF-1α融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，再用WesternBlot检测抗体的效价和特异性．研究结果表明，获得了EF-1α原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗EF-1α多克隆抗体．EF-1α多克隆抗体的效价可以达到1比1500，并且有很强的特异性，为后续研究EF-1α基因在心脏发育和心脏功能中的作用奠定了基础．
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| 关 键 词： | EF-1α 果蝇 原核表达 多克隆抗体 |
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