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转基因棉花中棉41多重PCR体系的建立
引用本文:徐方娇,冯俊丽,梁颖,陈集双.转基因棉花中棉41多重PCR体系的建立[J].科技通报,2013,29(3).
作者姓名:徐方娇  冯俊丽  梁颖  陈集双
作者单位:1. 浙江理工大学生物工程研究所,杭州310018;南京工业大学大丰海洋产业研究院,江苏大丰224145
2. 浙江理工大学生物工程研究所,杭州,310018
3. 南京工业大学大丰海洋产业研究院,江苏大丰224145;南京工业大学生物与制药工程学院,南京,210009
基金项目:农业部转基因生物新品种培育科技重大专项
摘    要:利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系.多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50 μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400 μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度.利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因CrylAc.

关 键 词:中棉41  多重PCR  检测体系

Establishment of An Exogenous Detecting System of Genetically Modified Cotton CCRI 41
Xu Fangjiao , Feng Junli , Liang Ying , Chen Jishuang.Establishment of An Exogenous Detecting System of Genetically Modified Cotton CCRI 41[J].Bulletin of Science and Technology,2013,29(3).
Authors:Xu Fangjiao  Feng Junli  Liang Ying  Chen Jishuang
Abstract:
Keywords:
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