| 胰蛋白酶抑制剂基因siRNA表达体系的构建 |
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| 引用本文： | 柴晓杰,吕品,张宇,王丕武.胰蛋白酶抑制剂基因siRNA表达体系的构建[J].中国科技资源导刊,2012(4). |
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| 作者姓名： | 柴晓杰 吕品 张宇 王丕武 |
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| 作者单位： | 1. 大连水产学院生命科学与技术学院,大连,116023
2. 吉林农业大学生物技术学院,长春,130118 |
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| 摘 要： | 以大豆基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了大豆胰蛋白酶抑制剂基因KSTI3的全长DNA片段,并将其构建到pMD18-T vector上.核苷酸序列测定结果表明:该基因片段全长654bp,与已发表的KSTI3基因序列同源性达99%.将反义+正义基因片段插入到pBI121 35S启动子下,构建重组质粒pBIKSTI3.通过冻融法将该重组质粒转入农杆菌EHA105中,获得了siRNA表达体系.利用农杆菌介导法将带有pBIKSTI3的菌株转化大豆,从2棵再生植株中得到2100bp的特异性扩增条带,而未转化的植株中无该片段的产生.
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| 关 键 词： | 胰蛋白酶抑制剂 PCR 克隆 siRNA表达体系 大豆 |
Construction of siRNA Expression System on KSTI3 Gene of Soybean Kunitz-type Trypsin Inhibitor |
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