共查询到20条相似文献，搜索用时 15 毫秒
1.
以DEAE-52离子交换柱层析和SephadexG-25凝胶过滤柱层析纯化米糠抗氧化肽,以硅胶G薄层层析测定其纯度,氨基酸自动分析仪测定其氨基酸组成。实验结果表明:米糠抗氧化肽经DEAE-52柱层析和Sephadex G-25柱层析后基本上得到了纯化;氨基酸组成分析表明,米糠抗氧化肽由14种氨基酸组成,富含两种酸性氨基酸:Asp、Glu,并含有6种人体必需氨基酸(Val、Met、Ile、Leu、Phe、Lys),占米糠抗氧化肽氨基酸总含量的31.89%,具有较高的营养价值和保健功能。 相似文献
2.
研究用亲和融合谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)的方法纯化重组人白细胞介素 6(IL 6)的发酵和纯化工艺 ,使用含有质粒pHZl818的E .coliJMl0 9在 2XYT培养基中进行发酵表达 ,IL 6表达为与谷胱甘肽 S 转移酶 (GST)融合的融合蛋白GST IL 6.融合蛋白存在可溶的活性蛋白和不可溶的包含体两种形式 ,此包含体无活性且无法复性 ,无法用亲和层析回收 ,通过实验优化摇床发酵的诱导温度和转速 ,以增加可溶融合蛋白的表达 .菌体超声破碎液后 ,上清液用作亲和柱层析 ,可将融合蛋白提纯至 80 00 ,每升发酵液可得 10mg融合蛋白 ,用凝血酶裂解处理 6h ,亲和标志物GST被特异性切除 ,裂解得到的IL 6用离子交换柱层析可纯化至 95 00 ,MTT法测得纯化的IL 6生物学活性为 1.0 2× 10 8IU/mg . 相似文献
3.
Using degenerate primers and RT-PCR,RACE techniques,a 1491 bp cDNA segment of stearoyl-acyl carrier protein desaturase(SAD)is cloned from developing seeds of Jatropha curcas L.The segment contains a 1191 bp of complete open reading frame(ORF).Analysis in the BLAST on NCB! shows that Jatropha curcas SAD(JSAD)gene encodes a protein precursor composed of a signal peptide of 33 amino acids and a mature peptide of 363 amino acids.The homological analysis shows that JSAD has high level of homology both in nucleotide sequence and in amino acid sequence to other plants SADs.The nucleotide and peptide identity of JSAD to Ricinus communis SAD(RSAD)is up to 89% and 96.2% respectively.Molecular modeling of JSAD indicates that its three-dimensional structure strongly resembled the crystal structure of RSAD. 相似文献
4.
胰酶水解脱脂蚕蛹分离部分氨基酸的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
为了从蚕蛹胰酶水解液中分离得到氨基酸单体，本研究从脱脂蚕蛹出发，首先选择合适的酶解条件，然后对酶解得到的混合氨基酸进行了含量测定，并将混合氨基酸经732树脂粗分为酸性、中性和碱性三种氨基酸混合液，其中酸性部分通过717树脂柱处理，后二者分别加入不同的沉淀剂，再经解析后共获得7种氨基酸单体，该方法简便易行，针对性强，收率较高，为水解制备氨基酸探索了一条新途径。 相似文献
5.
王京平 《宁夏师范学院学报》2000,21(6):33-35
报告了铬天青S的硅胶干柱层析法的纯化方法,探讨了固定相、淋洗液、洗脱剂对纯化产物的影响,确定了以层析硅胶为固定相,以正丁醇：吡啶：氨水=2：1：1为淋洗剂,以蒸馏水为洗脱剂的纯化条件,经过红外光谱和液相色谱表证,使用本方法可获得纯度大于98.59%的产品,结果令人满意。 相似文献
6.
7.
Molecular cloning and nucleotides sequence analysis of G1 genome segment of hantaan virus Z10 strain
Liang Wei-feng Shen Yue-hong Ma Yi-lin Zhao Nian-feng Chen Ya-gang Zhu Zhi-yong Xu Xiao 《浙江大学学报(A卷英文版)》2000,1(2):207-211
The molecular cloning of the G1 genome segment of the Z10 strain of Hantaan virus and analysis of the first gene data on the currently widely used Hantavirus vaccine strain in China
are presented. The G1 genome segment of Z10 virus was amplified by the method of RT-PCR, and the products were cloned into the pGEM-T vector after identification and
purification. The clone was sequenced by Sanger’s dideoxy chain termination method. The 1449 bases of the Z10 G1 genome segment, and the coding for 483 amino acids were determined. The base compositions for the G1 segment RNA determined from cDNA sequence information, were 20.6% A, 21.6% G, 18.8% C and 30.0% U. These values are similar
to those of the 76/118, Lee and SR virus. As compared to the Z10 G1 segment, the sequence homology at the nucleotide level is 87% (76/118, type I), 86% (Lee, type I), 86% (Hojo, type I), 67%
(R22, type II), and 59% (K22, type III). The Z10 virus G1 protein amino acid sequence identity with other Hantaan viruses (94–95% homology) was higher than that with Seoul type viruses
(77–80%). More amino acid sequence heterogeneity between the Z10 and 76/118 was observed in the N terminal, especially the diverging cluster of ten amino acids at position 84 to 93 of the
Z10 virus G1 protein. Conclusion: (1) The Z10 strain is one of the Hantaan viruses. (2) The important region of the Z10 G1 segment was conservative. (3) Although substantial divergence of nucleotide sequences of the G1 genome segment was found between the Z10 strain and other type I Hantaviruses, relatively high amino acid sequence homology was shown among them. Thus, good immune
protection could be obtained with the inactivated Meriones unguiculatus kidney cell vaccine against other strains of Hantaviruses. 相似文献
8.
纸层析法分离氨基酸实验条件的优化 总被引：1，自引：0，他引：1
纸层析法分离氨基酸是生物专业本科实验必修课,但是实际实验过程中存在时间长、分离效果差、实验结果不稳定等现象.本研究分析了点样方式、扩展剂和展层方向等因素对氨基酸分离的影响.结果表明,用正丁醇∶甲酸∶水=15∶3∶2且溶入0.01%的茚三酮作为展层显色剂、用毛细管在环形滤纸中央环形区点样一次的水平纸层析方法可以在30~45 min将浓度0.2%混合氨基酸(赖氨酸、丝氨酸、丙氨酸、亮氨酸)明显分离开,取得最佳的分离显色效果.改进后的纸层析法比传统纸层析法具有速度更快、斑点更集中、分离效果明显、显色灵敏度高、节约药品等优点. 相似文献
9.
10.
利用反相高效液相色谱法研究了武夷橙中7种有机酸的分离测定条件。采用C18为分析柱,以2.5%磷酸二氢铵缓冲溶液（PH=2.5）为流动相,流速为1mL/min,紫外检测波长在210nm处可以很好的分离测定有机酸。结果表明峰面积与相应的质量浓度有良好的线性关系,其r大于等于0.9990,平均回收率为98%～110%,该方法具有测定结果准确可靠,重现好等特点。 相似文献
11.
郭佳莉 《泉州师范学院学报》2014,(2):36-39
用邻苯二甲醛（OPA）、N-乙酰-L-半胱氨酸为衍生试剂对天冬氨酸对映体进行柱前衍生．采用ZORBAX Eclipse AAA4．6×150mm,5μm色谱柱,以0．05mol／LpH5．08的醋酸钠溶液与甲醇按57：43体积比作为流动相,流速0．5mL／min,柱温40℃下,考察高效液相色谱柱前衍生化法分离测定天冬氨酸对映体的效果．结果显示：在3．5min内分离出天冬氨酸对映体．在20～100nmol／mL线性范围内,线性关系良好,相关系数在0．99915以上,相对标准偏差在0．65％～1．70％之间．该法快速、简便、分离度高,能够完全分离DL-天冬氨酸对映体,并对其他氨基酸对映体的分离有良好的参考价值． 相似文献
12.
杨乙强 《黎明职业大学学报》2014,(2):85-88
对鱼糜制品中硼砂/硼酸盐的前处理及分析技术进行研究,并确立离子色谱定性定量分析的检验方法。样品超声后加入乙腈,离心分离后取上清液稀释并经尼龙滤膜和OnGuardRP柱过滤。待测液以甲基磺酸与甘露醇为淋洗液,四丁基氢氧化铵与甘露醇为再生液,经Dionex Ion PacTM ICE Borate柱色谱分离。在优化后的色谱条件下,目标物在0~20.0 mg/L的浓度范围内线性关系良好,检出限为0.03 mg/L。样品中目标物的加标回收率为81.0%~98.6%,RSD为4.1%~10.4%。该方法前处理简单,重现性好,能满足鱼糜制品中硼砂/硼酸盐的测定。 相似文献
13.
14.
文章首次报道了一种含咪唑环多胺类化合物N1,N5-二(1-甲基咪唑-2-酰基)二乙基三胺的合成方法,以此化合物为基础,可以合成对称平行的发卡式多酰胺分子,以期对DNA序列进行新的特异性识别,从而开发研制新型有效的工具酶或抗癌药物。合成方法简便易行、耗时短、不需要过柱分离,每一步合成都有较高的产率。 相似文献
15.
文章首次报道了一种含咪唑环多胺类化合物N1,N5-二（1-甲基咪唑-2-酰基）二乙基三胺的合成方法,以此化合物为基础,可以合成对称平行的发卡式多酰胺分子,以期对DNA序列进行新的特异性识别,从而开发研制新型有效的工具酶或抗癌药物。合成方法简便易行、耗时短、不需要过柱分离,每一步合成都有较高的产率。 相似文献
16.
目的：改进常用薄层色谱法定性鉴定氨基酸实验中常出现展开效果差，易拖尾，重复性差等不足问题，探讨微乳氨基酸乳液展开剂的性能和效果。方法：采用十二烷基硫酸钠／正丁醇／正己烷／水配制成微乳液作为展开剂，对教学中常见的5种氨基酸进行微乳薄层色谱法分析。结果：展开效果好，色谱性能稳定，重现性良好。结论：微乳液在氨基酸薄层色谱教学中是可采用的一种方法。 相似文献
17.
叶榕村 《福建教育学院学报》2010,11(2):115-116
文章研究了黄粉虫乙酰胆碱酯酶（AChE）的体躯分布和纯化方法技术。结果表明：黄粉虫幼虫和成虫体内乙酰胆碱酯酶活性均集中在头部和胸部,腹部的乙酰胆碱酯酶活性显著低于头部和胸部。成虫体内乙酰胆碱酯酶活性明显高于幼虫。通过Sepharose4B和SephadexG-200纯化后,AChE的最高纯化倍数是3.86和18.84倍。 相似文献
18.
从假单胞菌（Pseudomonassp．）XZG36中克隆弹性蛋白酶基因,构建原核表达载体,实现其在大肠杆菌（Escherichiacoli）中的高效表达,并对表达产物进行酶学性质分析,为微生物发酵生产弹性蛋白酶奠定基础．以假单胞菌基因组DNA为模板,PCR扩增弹性蛋白酶基因,并将其开放阅读框（0RF）克隆至融合表达载体pET30a（＋）进一步IPTG诱导表达;表达产物经His·Bind亲和层析纯化后对弹性蛋白酶进行酶学性质分析．实验成功克隆了弹性蛋白酶基因,DNA基因片段为1672bp、编码497个氨基酸残基的多肽,与预计长度相符合;实现了其在E．coli中的高效表达,表达量约占菌体总蛋白的20％;经SDS-PAGE分析,相对分子质量为48000,与预期的一致;提纯后的表达蛋白SDS-PAGE分析可见单一条带,纯度可达92％以上．表达蛋白具有良好活性． 相似文献
19.
目的:在大肠杆菌(BL21)中构建可溶性表达的金黄色葡萄球菌B型肠毒素(SEB)受体拮抗剂。方法:首先确定SEB受体桔抗剂的基因序列,然后用含有SEB受体桔抗剂的基因序列重组质粒表达载体PGEX-4T-1转化大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达获得蛋白,产物经GST柱纯化后,利用ELISA检测其与SEB的结合能力并进行其体内外药效学实验。结果:该质粒成功转化为可溶性表达,ELISA结果显示表达产物可与SEB特异性结合。结论:本研究成功对SEB受体拮抗剂GST可溶性表达并对其活性进行初步分析。 相似文献
20.
以新牧1号苜蓿为研究材料,采用RT-PCR方法,设计特异引物,从新牧1号苜蓿中克隆获得MvDREB基因cDNA,测序结果该片段全长为651 bp,Genbank登录号为GU073286.生物信息学分析结果表明,该基因序列与紫花苜蓿核苷酸序列相似度达99%,编码216个氨基酸,MvDREB蛋白氨基酸序列分析比对显示该蛋白属于AP2/ERF家族的亲水性核蛋白,蛋白质分子量为24873.1,理论等电点pI为5.90,不稳定参数为45.07. 相似文献