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四种药用蕨类DNA提取的比较研究 总被引：3，自引：0，他引：3
以四种药用蕨类的叶片为材料,采用改进的CTAB法、SDS法分别对四种蕨类进行了总DNA提取效果的比较分析,结果表明,通过实验获得最佳的DNA提取方法,为PCR扩增,引物设计,为筛选四种药用蕨类中的活性成份的相关基因奠定理论和实践基础。两种方法均能有效的提取较高质量的DNA,其中CTAB法效果最好,获得的DNA纯度较高、产量较大;SDS法提取的量次之且多糖等杂质含量更多。 相似文献
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该实验通过SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNA Nanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法（常规法）、SDS高盐法（改良法）和Soil gDNA Kit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45 ng/μl、96.48 ng/μl和58.40 ng/μl,纯度（OD260/OD280）分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而Soil gDNA Kit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法（改良法）是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度. 相似文献
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采用高盐低pH法、改良SDS法、CTAB法、改良CTAB法提取发根农杆菌ATCC11325感染蓼科多年生药用植物虎杖（Polygonum cuspidatum Sieb．et Zucc．）叶片产生毛状根的基因组DNA,并进行了电泳分析、含量检测及特异PCR扩增．结果表明：改良CTAB法解决了虎杖富合多酚、多糖等类物质难以提取高质量DNA的问题,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求． 相似文献
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几种苎麻园土壤微生物总DNA提取方法比较 总被引：1，自引：0，他引：1
实验设计对比了苎麻园土壤微生物总DNA6种提取方法。方法Ⅰ采用裂解酶、蛋白酶K、SDS与CTAB处理;方法Ⅱ结合利用CTAB、SDS、LDS和BME;方法Ⅲ综合采用玻璃珠、CTAB和SDS法;方法IV结合利用SDS-GITC-PEG;方法V利用尿素、SDS、LDS和BME综合处理;方法VI则利用试剂盒处理土壤。6种方法都可以提取到23kb左右的DNA片段,经过TENP和PVPP方法预处理的土壤样品,能有效去除腐殖酸等污染物,且提取得到的土壤总DNA完整性好、纯度高,不需要纯化就可用于PCR扩增。但不同方法取得的DNA的片段长度、产量和纯度存在明显差异。通过比较,改进并建立了可用于宏基因组构建的高纯度、大片段DNA的方法。 相似文献
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珙桐干种子总DNA提取方法的比较 总被引：2，自引：0，他引：2
以珙桐干种子为材料,采用简易CTAB法、SDS法、高盐沉淀法与高盐低pH值法分别对珙桐干种子进行了总DNA提取效果的比较分析。结果表明,四种方法均能有效地提取较高质量的珙桐种子DNA,其中SDS法效果最好,获得的DNA纯度最高,产量最大,CTAB法次之,高盐沉淀与高盐低pH值法获得DNA质量相对较低,低于其它两种方法。获得最佳的DNA提取方法,可为PCR扩增,引物设计,筛选珙桐种子中的相关基因奠定基础。 相似文献
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《实验技术与管理》2017,(5):64-67
使用改良盐析法、改良酚/氯仿法、改良碘化钾法和试剂盒法,分别对在-80℃保存1~4年的维吾尔族人群血样提取DNA,分光光度仪检测DNA浓度和纯度,0.8%琼脂糖电泳检测,提取的DNA质量采用单因素方差分析比较。结果表明,改良碘化钾法提取DNA质量最好,其次是试剂盒法、酚/氯仿提取法,盐析法提取质量最差;冻存1~4年的血样提取的DNA浓度之间差异极显著(F=618.011,P=0.000),冻存1~4年的血样提取的DNA纯度之间差异极显著(F=27.090,P=0.000)。该研究基于经济实惠、方便操作,提取DNA质量的高低可以确定改良碘化钾法提取DNA质量最好;血样本冻存(-80℃)超过3年对提取的DNA质量有显著的影响。 相似文献
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经济植物DNA提取与纯化的三种方法比较 总被引：6，自引：0，他引：6
目的：优化适于普通院校实验室条件下开展经济植物DNA提取与纯化的实验方法。方法：1．标准操作，DNA浓度和纯度都较好，但耗时，设备条件要求高。2．优化简易操作，DNA浓度和纯度虽较不理想，但依然符合实验要求，而且省时，经济、易操作。3．Wizad^TM clean-up system试剂盒方法。DNA浓度纯度较理想，但价格昂贵。结果与讨论：优化简易操作省时、经济、易操作、此方法适用于教学实验和科研课题中对大量材料的处理。 相似文献
9.
小麦基因组DNA提取方法比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用4种方法对小麦基因组DNA进行提取,采用琼脂糖凝胶电泳法和核酸蛋白分析仪比较DNA的浓度和质量,结果显示,4种DNA提取方法在DNA浓度上有所差别,方法一所提取的DNA浓度最高,但消耗试剂最多;方法二所提取的DNA浓度最低,有蛋白质污染,但过程简单;方法三和方法四所提取的DNA浓度相当,方法三有蛋白质污染,过程简单,方法四纯度高,过程最复杂.采用同一对引物和反应体系对所提取的DNA进行PCR扩增,结果显示4种方法所提取的基因组DNA均能满足分子标记检测的需要. 相似文献
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介绍在教学实验中分别采用SDS法和CTAB法对辣椒基因DNA进行提取的过程,结果表明,改进的CTAB法提取的DNA含量较高且纯度较好;同时发现在电泳检测过程中,恒定电流检测图像结果中呈现的基因组DNA条带要比恒定电压检测结果平整。 相似文献
11.
目的:探讨简便快速而高效的提取大蒜总DNA的方法。方法:采用十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法、简化CTAB法、改良十二烷基硫酸钠(SDS)法分别以大蒜的根、茎、叶为材料提取细胞总DNA,并进行紫外分光检测和琼脂糖凝胶电泳分析。结果:三种方法的提取率和纯度明显不同:CTAB法>SDS法>简化CTAB法,三种材料组织中以茎的提取效果最佳。结论:采用CTAB法或SDS法从茎中提取大蒜总DNA可获得产率与纯度符合要求的DNA样品。 相似文献
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《滨州学院学报》2019,(6):60-65
分别采用试剂盒法、SDS-K法和CTAB法,提取了云斑白条天牛成虫的胸部、足部、触角和腹部四个组织部位的DNA。通过计算OD_(260)/OD_(280)和琼脂糖凝胶电泳检测法,对不同提取方法和不同组织部位提取的DNA质量进行了检测比较。结果表明,试剂盒法提取云斑白条天牛的胸部、足部、触角和腹部四个组织部位的DNA条带清晰,OD_(260)/OD_(280)均在1.80～1.86,DNA质量最高;SDS-K法提取DNA质量次之;CTAB法较差,基本无条带。不同组织部位提取的DNA,胸部质量最高,足部次之,其浓度由高到低顺序依次为,胸部>足部>触角>腹部。因此,提取云斑白条天牛成虫DNA时,建议试剂盒法从胸部提取,但样品量较少且稀缺时,从足部提取。 相似文献
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骆驼刺具有抗寒、抗旱、耐盐和抗风沙的特性,是一种非常好的生物性抗逆研究材料.通过比较CTAB法、热硼酸法和Trizol法来提取骆驼刺叶片总RNA的效果,结果表明,Trizol试剂盒法提取的RNA纯度较高,电泳条带清晰完整,OD360/OD280比值为1.91,并将其确定为骆驼刺叶片总RNA提取的方法,反转录合成cDNA第一链,利用设计的NHX1引物,PCR扩增得到一条600～800bp的DNA条带,与报道的NHX1基因的核心序列大小基本相符,验证了提取的RNA可用于RT-PCR,为骆驼刺的抗逆性研究奠定基础. 相似文献
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《淮北师范大学学报》2015,(3)
本研究以黑糯玉米幼叶、种子和盾片为材料分别采用CTAB法、SDS法和碱煮法提取黑糯玉米基因组DNA,并通过直接观察DNA形态、琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计法比较利用不同组织材料和方法提取的DNA质量.结果表明,用CTAB法提取的黑糯玉米幼苗的基因组DNA质量较好、纯度较高,能够满足后续分子生物学实验的要求. 相似文献
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几种药用植物基因组DNA提取方法研究 总被引：3，自引：0，他引：3
采用改良2×CTAB法和改良SDS法提取富含多糖和次生代谢物质的几种药用植物不同器官基因组DNA,并用紫外分光光度计分析,凝胶电泳和PCR扩增进行鉴定。结果表明:改良2×CTAB法和改良SDS法均能有效去除不同药用植物材料中的蛋白质、多糖、酚类及其他次生代谢物质,获得较高质量基因组DNA。但与改良SDS法相比,改良2×CTAB法提取的基因组DNA质量更好。 相似文献
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通过两种从大肠杆菌中提取重组质粒pRSETDNA不同方法的比较,寻找提取重组质粒pRSET DNA的切实可行的方法.将含有目的质粒的菌株分别采用SDS碱裂解法和煮沸法进行质粒DNA小量提取,采用DU800核酸蛋白分析仪测定质粒DNA的产量及纯度.结果SDS碱裂解法获得质粒DNA产量为5.61 μg/ml菌液,A260/280=1.95;煮沸法获得质粒DNA产量为4.36μg/ml菌液,A260/280=1.78.与煮沸法相比,SDS碱裂解法获得质粒产量更多,纯度更高,更适合分子生物学常规实验的要求. 相似文献
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针禾属植物羽毛针禾基因组DNA提取方法的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
传统的CTAB DNA提取法步骤多.较烦琐,DNA产率低,而且由于酚、单宁、色素、多糖很难完全去除,容易影响随机扩增多态、微卫星等标记工作的效率.采用SDS裂解法提取了针禾属植物幼嫩叶片的基因组DNA,所获得的DNA可用于PCR反应.并且在针禾属植物的研究中得到了较好的结果. 相似文献
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质粒常被用做基因的载体．纯化质粒DNA的方法可以分为3种：碱裂解法、煮沸裂解法和SDS碱裂解法．这些方法可以纯化共价闭合环结构质粒DNA,而大量获得高纯度的闭环结构质粒DNA最经典方法是氯化铯．溴化乙锭密度梯度离心法．该方法经过我们的实践与优化,减少了质粒中蛋白质和基因组DNA的污染,提高了质粒的纯度和得率,所得到的质粒用于拟南芥原生质体转化,效率高达60％～70％,明显高于普通的质粒小量抽提试剂盒所提取的质粒DNA． 相似文献
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为获取抽提水溞基因组DNA的最适方法,本研究采用酚-氯仿法,CTAB法和试剂盒法3种方法提取水溞基因组DNA,并用琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取的效果.结果表明3种DNA提取方法均获得较好的DNA,其中试剂盒方法提取的DNA最为理想,完全可满足后续分子生物学实验. 相似文献
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选择Trizol法、热酚法、酵母RNA提取试剂盒法3种方法提取热带假丝酵母总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同方法对热带假丝酵母总RNA提取的影响.结果表明:使用酵母RNA提取试剂盒法提取热带假丝酵母总RNA是较为有效且简便的方法. 相似文献