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《科技通报》2017,(7)
2,4,6-三氯苯甲醚(TCA)是给水处理中常见的一种土霉味物质,普通的氧化剂较难将其去除。本研究采用Fe~(2+)激活过硫酸盐(PS)生成强氧化性的硫酸根自由基(SO4-·)降解TCA。研究了不同PS/Fe~(2+)比例、PS投加量、pH、腐殖酸浓度对TCA去除率的影响,并对Fe~(2+)激活PS降解TCA的机理进行分析。实验结果表明PS/Fe~(2+)的最佳比例为1∶1.5,反应的前10 min TCA的降解较好地符合伪一级动力学模型,伪一级动力学速率常数随着PS投加量的增加而增大;pH=7时,TCA去除率最高;1 mg/L的腐殖酸对反应起促进作用,增加腐殖酸投加量对反应促进作用不明显。 相似文献
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厌氧真菌能够产生高比活力的纤维素酶,但由于对厌氧环境的生产条件要求严格,生长速度缓慢,并不适合规模生产。本研究将厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1与大肠杆菌表达载体pET-28a(+)连接,得到重组质粒pET-28a(+)-af1。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,重组质粒转化后获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-af1。采用SDS-PAGE蛋白电泳对重组大肠杆菌的表达产物进行分析,在40 kDa附近得到与目的基因af1表达蛋白理论值相当的明显条带。AF1酶蛋白的最适pH为6.0,最适温度为45°C。重组大肠杆菌的摇瓶产酶试验结果显示:诱导培养18 h时,内切型-β-葡聚糖酶(CMC酶)活力可达410 U/mL。该项研究工作为进一步构建内切型-β-葡聚糖酶高产菌株奠定了良好的基础。 相似文献
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黑曲霉Aspergillus nigerS菌株所产β-葡糖苷酶 的纯化和酶学性质 总被引:1,自引:0,他引:1
利用黑曲霉Aspergillus niger S菌株, 通过液体发酵的方法, 得到了一种可同时高效水解大豆异黄酮糖苷成大豆异黄酮,水解白藜芦醇苷成白藜芦醇的糖基水解酶.该酶经硫酸铵分级沉淀、离子交换层析及分子排阻色谱纯化得单一条带, 经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的表观分子量约为165ku 1u=1.660540×10-27kg。 ,比通常所报道的传统β-葡糖苷酶都大,该酶的最适反应温度为50℃; 最适pH值为5~10. 相似文献
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目的改造氧化硫硫杆菌的质粒pTt12,建立一个既能在氧化硫硫杆菌中复制又能在大肠杆菌中复制的穿梭质粒,为用基因工程改造在细菌浸矿、环境保护中使用的.T-业菌株提供实验根据。方法首先进行氧化硫硫杆菌(Thiobacillusthiooxidans-1)的pTt12质粒的限制性内切酶XhoⅠ、PvuⅡ、Bgl Ⅱ、HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、BamHⅠ和SalⅠ酶切分析,构建质粒pTt12的物理图谱。通过pBR325质粒(E.cold的SalⅠ切点和pTt12质粒的XhoI切点进行了体外重塑,构成了一个分子量为12.71Md的杂合质粒pSD125,并成功地转入了大肠杆菌HB101菌种。结论经分子量测定、酶切分析、转化试验证明,pSD125质粒确系pBR325和pTt12重组而成,且能在大肠杆菌HB101和Thiobacillusthlooxidans--1中转化克隆。 相似文献
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《科学学研究》2021,39(4):652-661
以往研究大多关注新进入企业如何模仿在位企业的新技术与产品从而实现发展,而对在位企业反过来向新进入者进行模仿和学习的问题关注不够。通过多案例对比研究,阐释了在位企业在遇到新进入者的新产品、新技术、新模式冲击时如何利用反应型知识搜寻策略(即"创新者的模仿")来继续保持市场领先,揭示了在位企业反应型知识搜寻的动机、过程与内在机理。将在位企业反应型知识搜寻的过程归纳成感知识别、转化应用和深化提升三个阶段,指出在位企业知识搜寻经历了本地模仿到本地重构、远程模仿再到远程重构的动态学习过程。对当前变革时代,在位企业如何避免"创新者的窘境",取得持续竞争优势有实践启示。 相似文献
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目的:扩增弓形虫SAG2基因,构建pGEX-4T-1-SAG2重组质粒,在大肠杆菌中表达。方法:设计并合成引物,经PCR法扩增SAG2基因序列,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-SAG2质粒,经酶切鉴定、测序,与pGEX-4T-1载体连接,构建pGEX-4T-1-SAG2质粒。将重组质粒转入大肠杆菌诱导表达,进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果:扩增出约561bp的SAG2基因序列,成功构建pGEX-4T-1-SAG2质粒,并在大肠杆菌中得到高效表达,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%。SDS-PAGE电泳显示pGEX-4T-1-SAG2的融合蛋白的分子量约为45kd。Western-blot显示融合蛋白有良好的抗原性。结论表达质粒在大肠杆菌中得到高效表达,为进一步研究弓形虫病的诊断做好准备。 相似文献
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氨基酰tRNA合成酶是生物体蛋白质合成过程中的一类关键酶 ,对它的研究具有重要的生物学意义和应用前景。该项目系统研究了大肠杆菌亮氨酰 和精氨酰 tRNA合成酶及其与相关tR NA的相互作用。用酶和tRNA的基因克隆和高表达 ,tRNA体外转录 ,基因定点突变 ,酶片段的体外重组等手段研究了酶与tRNA的相互作用的结构基础 ,得到一系列重要结果。 相似文献
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第一部分为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1和tRNALeu2,研究tRNA与亮氨酰-tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高10倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入40个氨基酸残基的变种LeuRS-A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA
Leu1和tRNALeu2接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS-A识别的关键.第二部分在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因10倍以上.研究了它的α-亚基的N-端变化(LAEP…→MGIP…)对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N-端亲和水解的酰化酶. 相似文献
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第一部分:为得到大量的大肠杆菌tRNALeu1 和tRNALeu2 ,研究tRNA与亮氨酰 tRNA合成酶(LeuRS)的相互作用,用基因克隆的方法高表达并纯化了它们;测定了接受活力和被LeuRS催化的动力学常数;改进了RNA体外转录必需的T7RNA聚合酶的纯化方法,优化了转录条件,转录序列比文献值高 1 0倍.用体外转录方法得到了各种在接受茎突变的tRNALeu变种,研究了一个在CP1结构域插入 40个氨基酸残基的变种LeuRS A对tRNALeu2种等受体的识别,证明了tRNA Leu1 和tRNA Leu2 接受茎上的第一对硷基对是否摆动是LeuRS A识别的关键. 第二部分:在大肠杆菌中高表达头孢菌素酰化酶基因 1 0倍以上.研究了它的α 亚基的N 端变化(LAEP →MGIP )对酶学动力学常数的影响.构建了带有不同抗菌素抗性和启动子的高表达质粒,研究了它们表达的特点,分析了这些质粒的不同用途.用含有编码该酶两个亚基的基因的相容质粒共转化的方法.研究了它们在体内的重组和前体的加工.研究结果表明,该酶可能属于一类新的N 端亲和水解的酰化酶 相似文献
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浅谈青霉素类药物皮试研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
临床上青霉素类药物的应用较为广泛,它具有高效、低毒的特点,但同时它在各类药物之中过敏反应的发生率也最高。通过对皮肤试验的方法、皮试液的配制、皮试方法的改进、皮试结果判定的影响因素、目前尚未明确规定的问题五个方面的具体分析,阐述了青霉素类药物皮试研究的进展。 相似文献