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相似文献
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1.
在哺乳动物中,位于Y染色体上,并指导雄性性别分化的基因,被称之为睾丸决定因子(TDF)。最近的研究结束表明,SRY是名符其实的性别决定基因。此基因只有不足250个碱基对,位于Y染色体的1A1片段上,为单拷贝,编码80个氨基酸。SRY是TDF的论据是:①当Y染色体上的SRY基因出现缺失和突变时,个体XY为女性;②男性个体XX中有一条X染色体上有SRY  相似文献   

2.
综述了性别决定的生物学机制和性别决定基因(SRY)的定位、结构、功能、表达特异性及其作用的分子机制,在此基础上阐述了SRY在奶牛精子性别控制与胚胎性别鉴定中的应用,着重介绍了用于胚胎鉴定的PCR扩增法和DNA探针法。  相似文献   

3.
男女性的存在取决于两个过程:性别决定和性别分化。研究性别决定不仅对认识人类自身具有重要的理论意义,而且对人类性分化异常、性反转等疾病的诊断和治疗都具有很大的实用价值。1990年Sincfair等发现并定位了Y染色体性别决定基因(Sex-determiningrreionofYchrome,SRY),使得对人类性别决定和性反转有了崭新的认识。本文简要回顾这些研究。1假想的睾丸决定因子基因1922年,Painter发现了男女性别的染色体差异:男性的性染色体为XY;女性的性染色体为XXo但是,当时人们对Y染色体决定性别尚不知晓。30年代有人提出,X染色体的数目…  相似文献   

4.
SOX基因家族是一类与SRY基因高度相关的转录调控因子,具有一个保守基序HMG—box,可以与DNA序列特异性结合,促进基因的特异转录,从而在胚胎发育及性别分化中起着重要作用。本文采用PCR方法,扩增了凹耳蛙的SOX基因保守区,获得长约220bp的片段;SSCP分析结果显示凹耳蛙SOX基因雌雄个体片段无差异,与人的有较大差异,本文为探讨凹耳蛙的性别决定机制及SOX基因的进行提供了分子资料。  相似文献   

5.
PCR技术在《生物学·选择性必修3·生物技术与工程》模块中有多方面应用,如基因工程中目的基因的扩增,胚胎工程中的性别鉴定等。PCR技术也是必修模块DNA复制相关内容在体外应用的良好实例,是分子生物学中广泛应用的重要技术。借助真实情境引入实验设计,并通过PCR模拟加样和电泳过程加深学生对PCR技术的认识和理解。  相似文献   

6.
人类的性别是在性型结构和性基因数量的双重作用下由 ,有效数量大的X基因或Y基因决定性别 .各种性型的X基因与Y基因的有效数量的比率———性指数X/Y和Y/X :为 1.0时 ,发育为中性人 ;为 2 .0时 ,发良为正常女性和正常男性 ;为 3.0时 ,发育为超雌女性和超雄男性 .  相似文献   

7.
目的是建立一种简便、快捷的脆性X染色体综合征的临床检测方法.在常规PCR的基础上,采用热启动法,同时加入PCR增强剂Btaine、DMSO,对20例表型正常人群外周血样本进行FMR1基因(CGG)n重复序列检测.结果表明,改良后的FMR1基因PCR扩增技术能够高效扩增CG富集区,采用该方法我们检测了20例外周血样本均获得目标片段,PCR扩增产物片段长度400~500bp(相当于n=20~53).因此,该方法简便、快速、经济而且重复性好,可用于群体普查和门诊快速筛查脆性X染色体综合征.  相似文献   

8.
正PCR技术是生物学研究上一项非常重要的技术,它是体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,只需在eppendorf离心管中建立反应,经数小时后,就能将极其微量的目的基因或某一特定DNA片段扩增数十万倍,甚至千百万倍.这项技术不仅可以用于获取和扩增目的基因,而且在癌症治疗的监控、临床医疗诊断以及法医学等众多领域都有着重要的用途,如此一项有重要作用的技术,笔者认为高中生必要理解和掌握这项技术.但是实际情况是学生对于PCR技术的掌握情况并不是很理想,对PCR技术原理和过程的掌握不够到位.究其原因,一方面由于PCR扩增DNA技术所需设备昂贵,一般中学很少具备动手操作的条件,另一方面PCR技术在高中教材中仅有少  相似文献   

9.
在一个PCR反应体系内,同步扩增大豆内参照基因lec和抗草甘膦大豆外源基因盒中的CaMV35s启动子、nos终止子或cp4 epsps基因,建立转基因大豆双引物PCR检测方法.PCR产物用限制性内切酶酶切进一步鉴定.结果表明,用双引物PCR扩增出标准转基因大豆阳性对照、阿根廷大豆、美国RR大豆及豆粕中的lec基因和相应的特异性外源基因;酶切反应确证PCR产物为特定片段大小的目的序列.建立的双引物PCR法适用于抗草甘膦大豆原料和豆粕饲料中转基因成分的简单化、高精度和高灵敏检测.  相似文献   

10.
实时荧光定量PCR技术的操作实践   总被引:5,自引:0,他引:5  
采用Mx3000P型实时荧光定量PCR仪,以SYBR(R) Green I法相对定量技术为例,设计1例检测针对HIV-1 vpr基因的特异性siRNA基因沉默效果的实验.介绍了实时荧光定量PCR技术上机前样本的制备过程、检测程序及相关参数的设置方法等操作流程;结合熔解曲线、扩增曲线进行结果分析;强调了实验整体设计、引物设计与PCR反应体系的优化和内参的恰当选择在实时荧光定量PCR技术中的重要性.  相似文献   

11.
重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得目的DNA基因片段的方法.该技术高效、快捷、经济,在基因功能研究方面显示良好的应用前景.  相似文献   

12.
在减数分裂过程中,能相互配对的两条染色体,形状和大小一般(X、Y例外)都相同,一条来自父方,一条来自母方,叫同源染色体。同源染色体包括常染色体和决定性别的性染色体,同源染色体上有控制相对性状的等位基因。性染色体有与常染色体独特的地方。如X、Y的同源区段控制着相对性状,而非同源区段控制着特有的性状,人类中决定发育为男性的SRY基因就只存在于Y染色体上。  相似文献   

13.
介绍了有关在真核生物中分离所要研究的目的基因的主要策略和进展,这些方法包括:物理方法、化学合成法、构建基因cDNA文库、基因扩增技术(PCR、NASBA)和计算机辅助技术等。  相似文献   

14.
根据禽源隐孢子虫GP20基因,设计1对保守引物和1对特异性引物,建立巢氏PCR检测方法,并进行验证.该巢氏PCR能特异性地扩增出496bp的禽源隐孢子虫基因组DNA中相应片段,最低能检测到0.52fg的阳性参照DNA.建立的巢氏PCR方法具有高度的特异性和敏感性,可以用于样品的检测.通过该方法鉴定山东省德州地区养鸡场中感染鸡的隐孢子虫种类为C.baileyi,感染率为31.5%.  相似文献   

15.
采用玻璃珠法从高温堆肥样品中进行了微生物总DNA的提取,以细菌16S rRNA基因 V3区通用引物进行了PCR扩增,随后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对其微生物多样性进行评估.结果表明,玻璃珠法能够快速、有效地获得高质量的堆肥微生物总DNA,所得的DNA分子片段在15kb以上,使用细菌16S rRNA 基因通用引物(27F和1492R)对总DNA进行PCR扩增,获得了近全长的16S rDNA序列(约1.5kb);DGGE分析结果表明,用该方法提取到的DNA种类较为丰富,多样性较好,能够进一步应用于群落结构分析.因此,玻璃珠法提取的DNA可以用于堆肥微生物的分子生态学研究及微生物群落结构分析.  相似文献   

16.
饱和苯酚氯仿法提取Tg2576转基因鼠基因组DNA,PCR法扩增编码β-淀粉样蛋白的目的基因,利用基因克隆技术构建以β-淀粉样蛋白为靶的表达载体pcDNA3.1-Aβ42×2,应用酶切及测序鉴定表达载体.相应的双酶酶切能够获得插入的目的基因片段(为269bp),测序未发现突变,表达载体构建成功.  相似文献   

17.
以新疆哈密瓜为试验材料,利用正交试验设计研究了4个主要因子(Mg2+、DNA聚合酶、SSR引物和dNTP)对SSR扩增结果的影响,并对该哈密瓜SSR反应体系进行了优化,同时尝试用降落(Touchdown,TD)PCR方法扩增目的片段.最终筛选出如下最佳反应体系:总反应体积为25 μL,其中dNTP 200 μmol/L,SSR引物0.75μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+ 1.5 mmol/L;降落PCR省却了常规PCR中摸索最适退火温度的过程,对一些Tm值相近的PCR反应可应用一套温度程序扩增,是一种行之有效的方法.  相似文献   

18.
采用PCR扩增皖南花猪ESR基因140bp的特异片段,对ESR基因PCR扩增的相关因素进行研究,以提高扩增的效率,通过多次实验确定皖南花猪ESR基因的PCR反应条件.  相似文献   

19.
扼要回顾对性别决定基因的探索历程,介绍了SRY基因成为性别决定基因的发现及其决定性别的分子生物学,并探讨了它在基础研究和临床应用、畜牧生产上的应用。  相似文献   

20.
为构建弓形虫主要表面抗原1(SAG1)的原核重组表达质粒并获得重组表达蛋白,采用聚合酶链反应(PCR) 从弓形虫RH 株基因组DNA中扩增SAG1基因,经克隆和测序后,亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21,PCR和双酶切鉴定阳性菌株,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定观察其诱导的抗体应答.结果表明,PCR扩增出SAG1基因的特异片段,获得的阳性克隆序列与Gen Bank中的SAG1基因序列一致,SAG1基因被亚克隆到表达载体pGEX-4T-1,在BL21中表达了SAG1,表达的蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.以上结果说明,已成功构建了弓形虫SAG1的重组表达质粒,在大肠杆菌中表达的SAG1具有良好的免疫学活性.  相似文献   

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