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相似文献
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1.
拟以单核细胞增生李斯特菌的特异基因prfA为研究对象,采用二甲基亚砜(DMSO)以及Touchdown-LAMP增加环介导等温扩增的灵敏度与特异性.结果表明,在环介导等温扩增反应体系中添加7.5%的DMSO并采用Touchdown-LAMP方法,克服了假阳性扩增,灵敏度增加了100倍,在灵敏度与特异性方面优于现有的商业化试剂盒.  相似文献   

2.
应用PCR技术,从大肠杆菌中分别扩增出16S、23S核糖体RNA基因(rDNA),以[a-^32P]bATP经缺口平移法标记rDNA后作为广谱探针。选用BamhI、EcoRI、HindⅢ等不同限制酶,对肠杆菌科细菌及一起沙门氏菌食物中毒暴发分离株进行染色体DNA酶切。凝胶电泳分离各片段后,通过Southern杂交。获得各菌株rDNA指纹图。每个细菌都可以从rDNA的限制性片段长度多态性(RFLP)得到鉴定。rDNA指纹图显示出种特异性。明确地区分出引起食物中毒的可疑传染源。该法特异性强、重复性好,既可用于细菌的分类鉴定。也可作为分子流行病学调查的工具。  相似文献   

3.
采用玻璃珠法从高温堆肥样品中进行了微生物总DNA的提取,以细菌16S rRNA基因 V3区通用引物进行了PCR扩增,随后用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对其微生物多样性进行评估.结果表明,玻璃珠法能够快速、有效地获得高质量的堆肥微生物总DNA,所得的DNA分子片段在15kb以上,使用细菌16S rRNA 基因通用引物(27F和1492R)对总DNA进行PCR扩增,获得了近全长的16S rDNA序列(约1.5kb);DGGE分析结果表明,用该方法提取到的DNA种类较为丰富,多样性较好,能够进一步应用于群落结构分析.因此,玻璃珠法提取的DNA可以用于堆肥微生物的分子生态学研究及微生物群落结构分析.  相似文献   

4.
采用FTA滤膜从豆制品中直接提取模板DNA,根据蜡样芽孢杆菌的hblA基因设计一对特异性引物进行PcR,并对反应条件进行优化.结果表明该引物能特异性扩增出338bp的目的条带;不增菌的情况下,PCR检测蜡样芽孢杆菌的灵敏度是102CFU/mL,检测时间为4h.  相似文献   

5.
为了快速检测出实验动物临床样品中的金黄色葡萄球菌(SA),建立了一种普通PCR方法。同时合成3对引物,用金黄色葡萄球菌的阳性核酸DNA做模板,进行引物扩增,筛选出一对能扩增出270 bp单一目的片段的引物。逐一对该引物灵敏度、重复性和特异性进行了测试。实验结果显示,该方法具有高度的特异性,除了识别金黄色葡萄球菌基因组外,对小鼠其他常见病原菌均不发生交叉反应,具有优良的敏感性和稳定性。两个不同操作人员,在两个不同时间段,利用两台不同品牌的PCR仪器,用金黄色葡萄球菌阳性样品进行测试,结果显示此方法再现性良好。用该方法检测待测样本,效果也良好。  相似文献   

6.
利用近缘种中已发表的微卫星DNA标记引物,对虎纹蛙(Hoplobatrachus rugulosus)进行跨种PCR扩增,但是获得了较低的跨种扩增成功率。研究结果显示仅有10个(约33.3%)位点在虎纹蛙能够获得成功扩增,而其中仅有2个(约6.7%)位点的扩增结果是没有拖带和非特异性的物种特异性扩增;46.7%的位点完全没有扩增产物,而20%的位点产物为该位点的非特异性扩增。本文认为影响两栖纲无尾目物种跨种扩增成功率的因素除了与该类群物种的基因组大小有关外,还与两栖类物种间的亲缘关系远近有关。  相似文献   

7.
肠道菌群结构多样性初筛研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨研究肠道菌群结构的初筛方法,为进行有效、高质量的高通量测序奠定基础.方法:用粪便采样器采集健康儿童粪便进行粪便标本预处理后,采用酚—氯仿方法提取样本菌群基因组DNA,并进行16S rDNAV3区片段PCR扩增,扩增产物用变性梯度凝胶电泳法(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)检测分析.结果:采用该方法成功地扩增出16S rDNA V3区230bp的片段,经DGGE的方法可以比较出不同儿童粪便样本菌群结构的不同.结论:基于16S rDNA V3区的PCR-DGGE技术能够应用于研究肠道微生物多样性,对于肠道微生物的研究起到了初筛的作用.  相似文献   

8.
小麦叶绿体DNA的提取与psb基因的扩增   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用高离子强度,低pH值缓冲液匀浆细胞的方法,提取小麦叶绿体DNA,并以此为模板,通过聚合酶链反应(PCR)对小麦叶绿体psbA基因进行了特异性扩增。  相似文献   

9.
利用聚合酶链式反应(PCR)方法特异性扩增河北省饶阳县大仓鼠(Circetulvs triton)基因组DNA通过琼脂糖凝胶电泳检测以期出现特异性条带,可以进一步回收进行序列分析.  相似文献   

10.
松材线虫SCAR标记检测方法的建立与应用   总被引:3,自引:0,他引:3  
对南京林业大学开发的松材线虫SCAR.标记检测方法的操作过程进行了规范化。介绍了SCAR标记检测松材线虫所需要的主要仪器、试剂及使用方法、线虫DNA的提取方法、PCR扩增的体系与反应程序等,对检测结果的判读方法进行了规定。规范化的检测方法灵敏度高,特异性强,应用方便。  相似文献   

11.
This paper arises from my work as a teacher of courses in feminist educational theory in a New Zealand university. Students usually encounter educational theories as disembodied abstractions scattered in fragments in various, often seemingly unrelated, courses. In a crowded curriculum there is little space for them to create their own educational theories or to reflect on the processes of educational theorising. In this paper I speak with two voices as a means of modelling - for students and teachers of feminist courses - a process of doing educational theory. It is written in two columns. In the left-hand column I speak with an academic voice. I begin by reviewing some theoretical writings of post-modernist theorists who have drawn attention to the ways our educational and social theories are generated by our circumstances - biographical, historical, cultural, generational, and geographical. I then argue that post-modernists have seldom practised what they preach - their abstract, and often inaccessible, writings remain severed from the lived realities at their base. In the right-hand column I speak with a more personal voice. I introduce some everyday experiences which are usually rendered invisible in academic writing in order to demonstrate how a few moments of 'lived reality' can be generative of feminist educational theory. The paper also contains ideas about how its unorthodox form can be used to trigger multiple and idiosyncratic readings and as a trigger for students' writing.  相似文献   

12.
目的:探讨HBsAg、HBeAg阳性孕妇外周血单个核细胞(PBMC)内乙型肝炎病毒(HBV)DNA感染状况及其在宫内母婴垂直传播中的作用.方法:对HBsAg/HBeAg双阳性共67对孕妇及其新生儿静脉血分离和提纯PBMC后,经抽提、纯化后的DNA进入PCR扩增反应,引物为HBV C区基因序列.结果:67名HBsAg及HBeAg双阳性的孕妇中有35例(52.2%)PBMC中HBV DNA阳性,25例孕妇在血清及PBMC中均发现HBV DNA.67名新生儿有22例感染HBV DNA,感染率32.8%,其中血清HBV DNA阳性者10例,PBMC HBVDNA阳性者19例,二者均阳性者7例.结论:母亲PBMC内HBV DNA阳性可能导致新生儿PBMC中HBV DNA阳性,PBMC内的HBV DNA可能是HBV母婴垂直传播的一条重要途径,同时,HBsAg及HBeAg阳性母亲若血清HBV DNA为阳性就极大增加了其新生儿感染HBV的危险性.  相似文献   

13.
三种DNA片段回收纯化方法的比较   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文采用三种方法对苹果褪绿叶斑病毒RT-PCR的特异DNA片段进行了回收纯化。结果表明:用普通琼脂糖替代低融点琼脂糖,回收纯化后产物的浓度及纯度与低融点琼脂糖法基本一致,完全可以用普通琼脂糖替代低融点琼脂糖进行DNA片段的回收纯化,从而降低成本,简化操作.玻璃奶法的回收纯度明显高于低融点琼脂糖法和普通琼脂糖法,且更快速安全.  相似文献   

14.
与单宾语结构相比,双宾语结构的独特之处在于其一个动词同时与两个宾语相互作用。研究发现:理论分析无法合理解决直宾与间宾的赋格和题元角色分配等问题,从而导致对双宾语结构本身的质疑;间宾的非刚性、历史证据和类型学证据都不支持双宾语结构的合法地位;所谓的双宾语结构是与格结构中与格介词附缀化的结果。  相似文献   

15.
论觚庵诗     
觚庵(俞明震)是光宣诗坛的一位大家,在诗风、诗技、诗情上都有独到的特色。觚庵在诗风上,并不限于所谓觚庵学简斋,杜味得苍凉;在诗技上,擅长写景,尤其注意光影变化;在诗情上,结合了澹秀和深浓,有真情而无俗欲,多悲悯而少愤激,与同时代其他戮力国事的诗人颇异。觚庵因不像陈散原、郑海藏那样开宗立派,也不像樊樊山、易实甫有较多作品,所以没有显赫的世俗声名。但觚庵诗的独特和精彩,不在同时任何大诗人之下。人称不朽之作家,可谓当之无愧。  相似文献   

16.
Moderation of student assessment is a critical component of teaching and learning in contemporary universities. Yet, despite this, it tends to be marked by idiosyncratic and sporadic processes informed by liminal understanding. This paper, in the light of forthcoming radical national requirements for the declaration of moderation processes in tertiary curricula in Australia, will present four discourses of moderation we identified in a recent study in a Faculty of Education in a large metropolitan university. The discourses are equity, justification, community building and accountability. Together, they will act as a starting point for academics to review their beliefs and attitudes towards the moderation of student assessment.  相似文献   

17.
In this article I argue that the concept of personalisation is simply rhetorical unless it facilitates theory and practice which takes seriously and engages with the value of the human person. The idea of human value is a fundamental theme in social and cultural life and the motor behind many psychological and social processes. Traditionally, knowledge presented as abstract and top down, and education systems which are driven by targets and economic imperatives, can unwittingly contribute to human devaluation by marginalising the personal, the idiosyncratic and the particular. The model of inquiry-based learning discussed here offers pedagogical strategies which attend to the self who is learning, as well as facilitating learners in engaging with the moral questions of human value embedded in processes of knowledge construction.  相似文献   

18.
乙型肝炎DNA疫苗的研究进展   总被引:1,自引:0,他引:1  
乙肝DNA疫苗,它既能预防乙型肝炎,又能治疗乙型肝炎,同传统的疫苗相比具有多方面的优越性,是一种很有发展前途的疫苗.目前研究认为,乙型肝炎DNA疫苗很可能成为预防和治疗乙型肝炎的全新一代疫苗.  相似文献   

19.
药物在防治疾病的同时也会产生对机体有害的作用和不期望产生的作用,即药物不良反应。药源性疾病是由药物引起的机体功能或结构的损害并有临床过程的疾病,是药物不良反应的结果。常见的药物不良反应有副作用,毒性作用,变态反应,特异质反应等。  相似文献   

20.
在仿射变换的基础上提出了一种构造IFS吸引子的提升变换,结合实例说明了这种变换在计算机构图中的应用,实验结果表明该变换能产生具有特殊视觉效果的分形图。  相似文献   

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