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在基因工程中,目的基因导入受体细胞后,能否稳定维持和表达其遗传特性,必须通过检测才能确定。本文从DNA、mRNA、蛋白质三个层次介绍转基因生物的检测技术。 相似文献
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生命现象遗传信息的流向都遵循分子生物学中的“中心法则” ,即从DNA到RNA再到蛋白质。由于绝大多数真核生物基因和某些原核生物基因是断裂基因 ,即在基因的DNA序列中插有一些无编码意义的片段 ,编码序列称为外显子 ,非编码序列称为内含子。由于基因中内含子的存在 ,基因在表达时 ,遗传信息在mRNA水平有一个剪接过程 ,即去掉内含子 ,将外显子连接起来 ,最终产生一个有功能的成熟mRNA分子。1990年 ,Hirata等在酵母液泡膜H+-ATPase的a亚基 (VMA1)中首次发现了蛋白质自剪接现象。蛋白质自剪接是前体蛋白中间的某些区域被切除 ,剩余部… 相似文献
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BpHi008A是一种水稻诱导性防卫基因，以单拷贝序列存在，当秧苗受到褐飞虱咬食或机械损伤后，该基因便大量表达，编码一个含82个氨基酸的蛋白质．将此基因重组到表达型载体pET28a后，转化入能产生T7RNA聚合酶的大肠杆菌菌株中，以10％SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离并鉴定未经IPTG诱导和经IPTG诱导后不同时刻的表达产物．结果表明利用T7RNA聚合酶／启动子表达系统可使蛋白质在大肠杆菌中高水平表达，并且表达产物的分子量约为9．6KDa．本实验表达的蛋白质可用为抗原刺激抗体的产生，为免疫定位和Western杂交做准备． 相似文献
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细胞分化是生物发生中的一个极为复杂的过程 ,其中基因差别表达是细胞分化过程的关键环节 ,但不能简单地归结为专一基因群的稳定开放或关闭。事实是调节细胞分化过程的环节要涉及到基因表达的各个水平和细胞生命活动的许多方面。1 细胞质在细胞分化中的决定作用胚胎正常发育是起始于卵母细胞贮存信息 (因源于母本又称母本信息 )表达 ,此信息在细胞中定位分布 ,通过各种途径调节蛋白质合成并进一步调节晚期基因表达。1.1 母本信息又称决定子 ,决定细胞分化方向 ,其本质是mRNA 卵母细胞阶段已合成大量mRNA。动物的卵母细胞中约含有 2～ … 相似文献
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张宏杰 《陕西理工学院学报(社会科学版)》2003,21(3):82-89
遗传多样性研究层次主要有细胞、蛋白质和DNA。中国昆虫遗传多样性在这3个层次均有研究，近年来主要集中于DNA层次。在DNA层次主要以基因测序为主流。 相似文献
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三、《细胞生物学》解题示例
1．要探知细胞内某一蛋白质的表达水平，可以通过哪些技术实现 A. Southern blot B. Northern blot C. Western blot D．原位分子杂交
解析 Southern blot用于DNA经限制酶酶切后分析DNA的结构，Southern blot根据其发明者Southern EM的姓名命名。Northern blot或RNA印迹分析被用于确定RNA样品中特定基因转录的mRNA的分子大小及量的情况；而将分析蛋白质的印迹技术称为Western blot。 相似文献
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《中学生数理化(高中版)》2020,(6)
<正>中学阶段同学们接触的基因知识多是简单识记和应用的内容,只要深刻理解相关基本概念,并了解一些基因技术的实际应用,就可以实现相关试题的顺利求解。一、理解基因的两个基本概念1.基因表达:基因的表达过程是先将DNA上的遗传信息传递给mRNA,然后再经过翻译将其传递给蛋白质。在翻译过程中tRNA负责与特定氨基酸结合,并将它们运送到核糖 相似文献
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高中生物"基因指导蛋白质的合成"一节中,基因通过转录和翻译过程最终将碱基序列转化成氨基酸序列使遗传信息表达。而由于其内容较为抽象,学生难于理解,如果教师能够自制教具让学生亲自体验其过程,必能将抽象的问题简单化,更好地帮助学生理解和掌握。1设计依据遗传信息的翻译过程中mRNA上的遗传密码通 相似文献
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"基因指导蛋白质的合成"这一节知识非常抽象,简单机械的板书教学很难让学生理解。笔者在课堂教学过程中,采用实物模型演示的形式,深入浅出,形象地展示了蛋白质合成过程中的关键环节,极大地提高了课堂教学效率。1实验原理遗传物质的翻译即以mRNA为模板合成多肽链的过程,mRNA链上的碱基组成三联体密码子,每个密码子对应特定的氨基酸。核糖体沿着mRNA链从起始密码子(甲硫氨酸)由5′端向3′端移动,每移动到一个密码子位置,转运RNA便将相应的氨基酸携 相似文献
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通过实验手段向细胞内导入长的双链RNA或者转基因可以产生一些短片段的双链RNA,这些短片段的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异地阻断体内特定基因的表达,使细胞出现特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi)。SiRNA(small interference RNA)就是这种短片段双链RNA分子,能够以序列同源互补的mRNA为靶目标,降解特定的mRNA。基本上所有的生物体内也都存在一种内源的小分子RNA,为单链RNA,由基因组转录生成,但是不编码蛋白质,它们的功能在于调节mRNA的翻译,称为miRNA,是由具有发夹结构的前体剪切产生的。RNAi的发现具有划时代的意义,它不仅揭示了细胞内基因沉默的机制,而且有望成为后基因组时代基因功能分析的有力工具,极大地促进了人类揭示生命奥秘的进程。 相似文献
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1 蛋白质组学的概念随着人类基因组图谱的绘制完成 ,生命科学研究进入后基因组时代。后基因组时代生命科学的中心任务就是阐明基因组所表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和生物功能 ,即生命科学的研究重心将从基因组学转移到蛋白质组学。蛋白质组这一概念是在 1 994年由澳大利亚学者Ｗｉｌｋｉｎｓ和Ｗｉｌｌｉａｎ等人提出的。蛋白质组指的是由一个细胞或一个组织的基因所表达的全部相应的蛋白质[1] 。它与基因组相对应 ,也是一个整体的概念。基因组是静态的 ,一个生物体的基因组在其一生中基本上是稳定不变的。但基因组内各… 相似文献
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以cDNA微阵列检测313个已知基因在萌发期水稻幼苗中的表达谱 总被引：1，自引：0，他引：1
使用含512个已知水稻基因3′表达序列标签的cDNA微阵列检测了萌发期水稻幼苗的基因表达谱，313个基因产生了可靠的杂交信号．其中，天冬氨酸氨基转移醇基因和4个具有核糖体功能的基因表达丰度非常高，表明萌发期幼苗中的氨基酸和蛋白质的合成代谢很活跃．β—l，3一葡聚糖酶基因是一种典型的病程相关基因，该基因的高水平表达，表明幼苗中存在着一种高度发育的抗病机制．实验也发现编码一种重要的抑制细胞凋亡的基因-Bax inhibitor-1，在幼苗中的表达丰度很高；该结果可解释为什么正常的幼苗中很少发生细胞程序性死亡现象．实验所测定的大量基因的表达丰度有助于从基因组转录水平理解萌发幼苗的生理特点． 相似文献
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目的:研究CBR1基因启动子在猪子宫内膜细胞的表达调控机制。创新点:发现CBR1基因启动子在猪子宫内膜受到炎性因子核转录因子kappa B(NF-κB)成员p65调控。p65对该启动子具有正向调节作用,但是对于CBR1基因的表达并不是必需的。方法:通过双荧光素酶报告基因载体确定CBR1基因启动子转录活性区,通过染色质免疫沉淀(Ch IP)技术确定p65能够结合CBR1基因启动子,通过超表达和干扰表达实验证实p65对CBR1基因启动子的调控作用。结论:猪CBR1基因启动子-1640/-647区对于其转录活性是必需的,在-1545/-1531区存在p65的结合位点。p65在猪子宫内膜细胞中促进了CBR1基因mRNA的表达,但是干扰p65则不会造成CBR1基因mRNA表达量下降,推断p65不是CBR1基因表达的必需因素。 相似文献
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遗传信息的转录是基因指导蛋白质的合成这一节教学内容第一课时的主题,而基因指导蛋白质的合成是人教版高中《生物》必修2遗传与进化模块中第4章基因的表达之开篇。之前的第2、3章,分别聚焦了基因在哪里 相似文献
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多聚核糖体现象是我们比较熟悉的，在蛋白质合成过程中，同一条mRNA分子能够被多个核糖体结合，同时合成若干条蛋白质多肽链，结合在同一条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体． 相似文献