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固定标本DNA提取方法优化的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
刘娟 《赤峰学院学报(自然科学版)》2007,23(4):18-19
本研究报道了一种在福尔马林固定标本中提取DNA的方法:使用磷酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液和乙醇共同处理保存标本,蛋白酶K消化后再用改进的酚氯仿法提取标本基因组总DNA.检验结果证明该方法提取的标本组织DNA可用于PCR等后续分子生物学研究. 相似文献
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为获取抽提水溞基因组DNA的最适方法,本研究采用酚-氯仿法,CTAB法和试剂盒法3种方法提取水溞基因组DNA,并用琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取的效果.结果表明3种DNA提取方法均获得较好的DNA,其中试剂盒方法提取的DNA最为理想,完全可满足后续分子生物学实验. 相似文献
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目的 :比较三种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA对DNA提取效率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法 :分别应用中山医科大学达安公司DNA提取液 ,珠海黑马医学仪器有限公司DNA提取液 ,胍盐酸法三种不同的方法提取人全血基因组DNA。结果 :三种方法提取的DNA纯度平均分别为 :1.4 8,1.5 1,1.5 6 ,各组间差异无显著性。 2 0 0 μL全血中所提取DNA总量平均分别为 1.6 μg ,2 .3μg ,4 .1μg。用 0 .8%琼脂糖凝胶电泳鉴定胍盐酸法制备的DNA效果较其它两种方法好 ,PCR扩增效果差异不明显。结论 :胍盐酸法提取的DNA总量明显高于其它两种方法 ,提取效率高 ,为三种全血基因组DNA提取方法中之首选。 相似文献
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在已有的三种提取丝状真菌DNA的改良方法基础上加以改动,并对改动后的三种方法提取青霉DNA的效果进行了比较。结果表明：改动后方法使青霉基因组DNA提取的效果更好,且提取时间更短。 相似文献
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利用CTAB法提取蝴蝶兰的基因组DNA 总被引：1，自引：0，他引：1
利用CTAB法对蝴蝶兰的根、叶、花等不同部位进行基因组DNA的提取，然后分别用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的质量，结果表明，3个部位都可以获得较完整的基因组DNA，电泳条带清晰，无拖尾现象．其中根部提取的DNA纯度最高，OD260／OD280为1．6545；其次为叶，OD260／OD280为1．5351；花的DNA纯度最低，仅为1．3820． 相似文献
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一种高质量蜜蜂核酸的快速提取方法 总被引：7，自引：0，他引：7
基因组DNA的提取是蜜蜂分子生物学研究的一项基本而重要的技术，但由于蜜蜂样品具有脂肪、蛋白、几丁质含量很高的特点，所以用常规方法无法获得较高质量的DNA，文章研究对蜜蜂基因组DNA的提取方法作了重要改进，可以从不同发育时期的蜜蜂中快速、大量提取高质量的蜜蜂基因组DNA，此外，对蜜蜂总RNA的提取方法也进行了探索。 相似文献
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沙棘体内酚类物质和蛋白质含量较高,影响了基因组DNA提取的产量。采用改良CTAB法对观光木基因组DNA进行提取,经过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳、双酶切和AFLP标记检测,结果表明:改良CTAB法提取的基因组DNA吸光值OD260/OD280为1.7～1.9,DNA无降解现象和杂质污染;基因组DNA双酶切彻底,并且APLP扩增的条带较多而且清晰。从而建立了适合沙棘AFLP分子标记的反应体系,为利用AFLP标记对沙棘进行分子生物学研究及分子育种奠定了基础。 相似文献
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珙桐干种子总DNA提取方法的比较 总被引：2，自引：0，他引：2
以珙桐干种子为材料,采用简易CTAB法、SDS法、高盐沉淀法与高盐低pH值法分别对珙桐干种子进行了总DNA提取效果的比较分析。结果表明,四种方法均能有效地提取较高质量的珙桐种子DNA,其中SDS法效果最好,获得的DNA纯度最高,产量最大,CTAB法次之,高盐沉淀与高盐低pH值法获得DNA质量相对较低,低于其它两种方法。获得最佳的DNA提取方法,可为PCR扩增,引物设计,筛选珙桐种子中的相关基因奠定基础。 相似文献
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四种药用蕨类DNA提取的比较研究 总被引：3，自引：0，他引：3
以四种药用蕨类的叶片为材料,采用改进的CTAB法、SDS法分别对四种蕨类进行了总DNA提取效果的比较分析,结果表明,通过实验获得最佳的DNA提取方法,为PCR扩增,引物设计,为筛选四种药用蕨类中的活性成份的相关基因奠定理论和实践基础。两种方法均能有效的提取较高质量的DNA,其中CTAB法效果最好,获得的DNA纯度较高、产量较大;SDS法提取的量次之且多糖等杂质含量更多。 相似文献
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针禾属植物羽毛针禾基因组DNA提取方法的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
传统的CTAB DNA提取法步骤多.较烦琐,DNA产率低,而且由于酚、单宁、色素、多糖很难完全去除,容易影响随机扩增多态、微卫星等标记工作的效率.采用SDS裂解法提取了针禾属植物幼嫩叶片的基因组DNA,所获得的DNA可用于PCR反应.并且在针禾属植物的研究中得到了较好的结果. 相似文献
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芪合酶是白藜芦醇合成的关键酶。本文分别以传统CTAB法、传统SDS法和改良SDS法对虎杖基因组DNA进行提取,获得符合分子生物学试验要求的高质量DNA。利用芪合酶基因保守区段的特异引物进行PCR扩增,将获得的片段进行测序分析,长度为809bp,成功克隆出虎杖芪合酶基因的保守区段,为芪合酶基因工程奠定基础。 相似文献
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采集20例南阳牛的血液,采用酚/氯仿法分离白细胞提取基因组DNA,并且对ANGPTL4基因部分序列(677～998 bp)PCR扩增条件进行了优化。结果表明,获得的牛基因组DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,主条带清晰,表明获得的南阳牛基因组DNA可以用于后续实验;以所提取的基因组DNA为模板,优化ANGPTL4基因片段扩增的条件,结果表明,最理想的PCR扩增条件是模板量为2μL(50 mg/L),Taq聚合酶(5 u/μL)的量为0.8μL,退火温度为56℃,循环次数为35次。 相似文献
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RAPD在蔬菜种子纯度鉴定中应用的反应条件优化 总被引：2，自引：0，他引：2
随着分子生物学的发展,ＲＡＰＤ（随扩增多态性ＤＮＡ）在越来越多的领域得到应用,但在蔬菜纯度鉴定方面,国内外报道较少,为了更好地将ＲＡＰＤ方法应用于蔬菜种子纯度鉴定,就反应条件进行了探索,以几种蔬菜种子为材料,使用进口ＰＣＲ仪在,对几种蔬菜种子进行ＲＡＰＤ分子过程中,从ＤＮＡ提取方法,模板ＤＮＡ量,Ｍｇ＾２＋浓度,Ｔａｑ－ＤＮＡ聚合酶的量,ｄＮＴＰｓ浓度,随机引物浓度及反应缓冲液的量等几个方面进行研 相似文献
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几种海洋贝类基因组DNA的提取 总被引：3，自引：0，他引：3
海洋贝类中多糖和蛋白含量很高，不易获得高纯度、完整的基因组DNA，且海洋贝类很易死亡腐败，将引起DNA的降解。而获得高纯度的完整DNA是进行DNA指纹图谱、RAPD分析和DNA测序等技术操作的前提。SDS方法可有效地去除多糖、蛋白、RNA、酚等杂质。且可从无水乙醇固定的标本中提取高质量DNA。 相似文献
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由于生物化学实验课程中实验项目设置相对独立,缺乏关联性、且实验项目相对老旧、没有紧跟生化技术发展前沿,针对性地开展了基因组步移的综合性实验教学模块,将基因组DNA的提取、酶切连接、引物设计、PCR反应等实验单元串联成一个有机整体。教学实践证明,以基因组步移为主线的模块化实验教学激发了学生的学习兴趣,提高了学生发现问题、分析问题和解决问题的能力,拓宽了学生的科研视野,进而为学生将来走上工作岗位奠定了良好的科研基础。 相似文献
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Qi WANG Xiaoxia SHEN Tian QIU Wei WU Lin LI Zhi'an WANG Huixia SHOU 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2021,22(2):99
Nucleic acids in plant tissue lysates can be captured quickly by a cellulose filter paper and prepared for amplification after a quick purification.In this study,a published filter paper strip method was modified by sticking the filter paper on a polyvinyl chloride resin(PVC)sheet.This modified method is named EZ-D,for EASY DNA extraction.Compared with the original cetyl trimethylammonium bromide(CTAB)method,DNA extracted by EZ-D is more efficient in polymerase chain reaction(PCR)amplification due to the more stable performance of the EZ-D stick.The EZ-D method is also faster,easier,and cheaper.PCR analyses showed that DNA extracted from several types of plant tissues by EZ-D was appropriate for specific identification of biological samples.A regular PCR reaction can detect the EZ-D-extracted DNA template at concentration as low as 0.1 ng/μL.Evaluation of the EZ-D showed that DNA extracts could be successfully amplified by PCR reaction for DNA fragments up to 3000 bp in length and up to 80%in GC content.EZ-D was successfully used for DNA extraction from a variety of plant species and plant tissues.Moreover,when EZ-D was combined with the loop-mediated isothermal amplification(LAMP)method,DNA identification of biological samples could be achieved without the need for specialized equipment.As an optimized DNA purification method,EZ-D shows great advantages in application and can be used widely in laboratories where equipment is limited and rapid results are required. 相似文献