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莱茵衣藻素有"光合酵母"之称,是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物.但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因,莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段.通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体,即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A RBCS2序列为启动子的pH105,分别将增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)插入两个表达载体中,得到p105G124和pH105G124转化载体.然后通过"珠磨法"转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻cc-849,并得到两种类别的转基因藻Tran-Ⅰ和Tran-Ⅱ.在光诱导和热激诱导条件下,两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白.通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平,结果显示pH105可使egfp基因的转化效率提高8倍;HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍,40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍.以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的莱茵衣藻外源基因表达载体,这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础. 相似文献
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莱茵衣藻素有“光合酵母”之称，是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物。但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因，莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段。通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体，即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A-RBCS2序列为启动子的pHl05，分别将增强型绿色荧光蛋白基因（egfp）插入两个表达载体中，得到p105G124和pH105G124转化载体。然后通过“珠磨法”转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849，并得到两种类别的转基因藻TranⅠ和TranⅡ。在光诱导和热激诱导条件下，两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白。通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平，结果显示pH105可使eg和基因的转化效率提高8倍；HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍，40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍。以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的菜茵衣藻外源基因表达载体，这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础。 相似文献
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聚-β-羟基丁酸(polyhydroxybutyric acid,PHB)是发现最早且研究最透彻的一种生物可降解塑料.莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)素有"光合酵母"之称,是理想的转基因受体生物.通过转基因技术将PHB生物合成的关键酶基因导入莱茵衣藻,利用光合作用合成PHB,降低PHB的生产成本.从真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)分离出phbB和phbC基因,然后构建phbB和phbC基因的衣藻表达载体p105B124和pH105C124.通过"珠磨法"遗传转化技术共转化p105B124和pH105C124,获得了二价转基因衣藻.分子检测结果表明phbB和phbC基因均已整合到莱茵衣藻基因组中.随后进行结晶紫染色和显微镜观察转基因藻,发现二价转化子的核区和细胞膜附近分布有白色空泡;进一步的电子显微镜观察结果表明白色空泡是由细胞中合成的PHB聚集而成,电镜下观察到由PHB形成的明亮的圆形颗粒.光照(90μE/m2/s)条件下培养转基因藻,出现生长受抑制现象,这可能是由于PHB颗粒在藻细胞内随机分布,干扰了细胞正常的生命活动. 相似文献
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聚-β-羟基丁酸（polyhydroxybutyric acid，PHB）是发现最早且研究最透彻的一种生物可降解塑料。莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）素有“光合酵母”之称，是理想的转基因受体生物。通过转基因技术将PHB生物合成的关键酶基因导入莱茵衣藻，利用光合作用合成PHB，降低PHB的生产成本。从真养产碱杆菌（Alcaligenes eutmphus）分离出phbB和phbC基因，然后构建phbB和phbC基因的衣藻表达载体p1058124和pH105C124。通过“珠磨法”遗传转化技术共转化p1058124和pH105C124，获得了二价转基因衣藻。分子检测结果表明phbB和phbC基因均已整合到莱茵衣藻基因组中。随后进行结晶紫染色和显微镜观察转基因藻，发现二价转化子的核区和细胞膜附近分布有白色空泡；进一步的电子显微镜观察结果表明白色空泡是由细胞中合成的PHB聚集而成，电镜下观察到由PHB形成的明亮的圆形颗粒。光照（90μE／m^2／s）条件下培养转基因藻，出现生长受抑制现象，这可能是由于PHB颗粒在藻细胞内随机分布，干扰了细胞正常的生命活动。 相似文献
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莱茵衣藻是生物工程中的模式生物,被称为"绿色酵母"。本文综述了莱茵衣藻转化体系的特点,提高表达量的方法,以及莱茵衣藻生产疫苗的研究进展。 相似文献
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《内蒙古科技与经济》2017,(7)
以小叶锦鸡儿为研究对象,连续3年对其刈割并观测再生情况,最终确定了小叶锦鸡儿生长季刈割的关键技术。研究结果表明:适宜的刈割频率和留茬高度下,小叶锦鸡儿在生长季刈割并不影响其生长情况;小叶锦鸡儿生长季刈割的最适留茬高度为5cm~10cm;小叶锦鸡儿生长季的最适刈割频率为每隔3年刈割一次;刈割时期为8月下旬到9月下旬之间,刈割方式为每隔2~3行平茬1行。 相似文献
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目的:研究大蒜素对人肝癌HepG2细胞生长的抑制作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞,形态学观察大蒜素作用下HepG2细胞的生长变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测实验各组HepG2细胞的生长增殖情况。结果:形态学观察显示,在大蒜素作用下,HepG2细胞失去原有"铺路石"样排列,细胞间连接减少或消失,细胞黏附性下降,出现细胞凋亡特征;MTT比色法检测发现,不同浓度的大蒜素均能抑制肝癌细胞的生长(P<0.05),且呈剂量依赖性。结论:大蒜素对人肝癌HepG2细胞的生长起一定的抑制作用。 相似文献
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转光膜是一种可以吸收太阳光中部分紫外光,并将其转化为植物光合作用可利用的蓝紫光和红橙光的功能性农膜。文章自主研发了稀土双反红/蓝转光农膜与普通农膜做对比应用于试验基地棚膜上,研究考察其对蔬菜牛心菜生长性状、生长周期、产量产值、所含营养物质的影响。研究表明双反稀土转光农膜与普通膜相比,双反转光膜可使棚内平均气温和低温比普通农膜提高2℃～5℃,改善植物生态因素,增强光合作用和水、肥的有效利用,提高牛心菜产量产值、早熟、增加果实中蛋白质、维生素C、粗纤维素、可溶性固形物和总糖等营养物质的含量,从而起到提质增效的作用。 相似文献
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对树木生长过程和形态结构进行描述与抽象,用动态生长的生长树进行模拟,提出一种新的仿生算法:生长树算法。树木在生长过程中,趋光性促使枝叶寻求占据相对更有利的空间位置,朝向能获取更多光照的位置生长,此过程体现寻优原则。借用遗传算法和蚁群算法的种群、个体评估等概念,借鉴信息素浓度机制,提出"光素浓度"衡量光照对生长树的叶枝节点的作用,叶枝节点个体不断探寻周围环境的光素浓度与外部环境进行信息交流,同时个体之间存在生长竞争关系,算法不断对个体进行评价、选择、生长,逐步个体的编码从而求得问题目标解。将算法应用于几个典型函数寻优,实验结果经与标准遗传算法进行对比,生长树算法具有迭代层数少、寻优速度快的优势。 相似文献
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[目的]观察抗生素联合应用海特光治疗系统治疗老年性肺炎的临床疗效。[方法]选取住院病例60例,随机分成两组,每组30例,治疗组采取抗生素联合应用海特光治疗老年性肺炎,对照组单独使用抗生素治疗,观察时间为2周,在治疗过程中主要观察记录体温、咳嗽情况、痰液量及性质,听诊情况及X线表现。[结果]根据记录体温、咳嗽情况、痰液量及性质,听诊情况及X线表现得出海特光治疗系统联合应用抗生素治疗老年性肺炎的疗效优于单独使用抗生素治疗。[结论]采取抗生素联合应用海特光治疗系统治疗老年性肺炎,可以有效的治愈肺炎,缩短疗程,减少抗生素的用药量,减少并发症的发生。 相似文献
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《科技通报》2015,(10)
目的:探讨在体外建立方便可靠的肝胰岛素抵抗细胞模型、脂肪细胞胰岛素抵抗模型和肌细胞胰岛素抵抗模型的方法。方法:3T3-L1小鼠前脂肪细胞、C2C12小鼠成肌细胞分别诱导分化为成熟的脂肪细胞和肌细胞。采用地塞米松(EDX)诱导人肝细胞Hep G2以及分化成熟的Hep G2、C2C12细胞,以葡萄糖氧化酶法检测细胞对葡萄糖的消耗情况。结果:1μmol/L DEX作用24 h和48 h均能抑制细胞葡萄糖消耗,撤掉DEX,胰岛素抵抗细胞模型在48 h内维持稳定。对于Hep G2和C2C12细胞,DEX造模48 h优于24 h;但对于3T3-L1细胞,DEX造模24 h和48 h对细胞葡萄糖消耗影响无显著性差异。结论:DEX可诱导3T3-L1、Hep G2、C2C12细胞产生胰岛素抵抗,这种细胞模型简便稳定。 相似文献
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青海共和盆地草地生产力模拟及其影响因素分析 总被引：14，自引：0，他引：14
基于DEM构建了青海共和盆地草地生产力的模型,并且进一步构建了基于作物水分耗散和放牧因子校正的青海共和盆地草地生产力模型,研究结果表明:①共和盆地草地的光温生产潜力15.3 t/hm2,光温生产潜力约为光合生产潜力的53%,而且在山区约为44%,滩地约为54%,河谷约为58%,所以在共和盆地温度应当是限制牧草生产能力的一个非常重要的因子,并且在山区温度对牧草的生产能力的影响较大;②共和盆地牧草的气候生产潜力约6.6t/hm2,气候生产潜力是光温生产潜力的43%,是光合生产潜力的23%;而且河谷、滩地牧草的气候生产潜力分别约为光温生产潜力的34%和41%,山地约为69%,水分对牧草的气候生产潜力影响在河谷和滩地要大于山地,尤其是草原化荒漠和荒漠化草原气候生产力相对较低;共和盆地的实际草地生产力是气候生产力的1/5～1/12;经过作物水分需求和放牧的校正,草地生产力平均2.2t/hm2,与实际生产力很接近.所以牧草水分需求和放牧强度对草地生产力影响很大,尤其反映出草地放牧已成为草地生产力降低,草地退化的重要原因之一. 相似文献
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目的:建立法莫替丁注射液的无菌检查方法。方法:按照《中国药典》2010年版二部附录ⅪH无菌检查法进行方法学验证试验。结果:与对照组比较,含供试品的各滤筒中试验菌均生长良好,并与各对照组中相应的菌落生长情况相似,供试品对照组、阴性对照组和空白对照组均无菌生长。由此说明,在此检验条件和检验量下,供试品不存在抑制微生物生长的因素。因此,可照此检查法和检查条件进行法莫替丁注射液的无菌检查。三批供试品无菌检查符合规定。结论:经方法学验证,表明采用薄膜过滤法,冲洗量为500ml,依法检测,可有效检测样品无菌情况,为控制产品质量提供检测依据。 相似文献