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南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A在毕赤酵母中的表达、纯化及性质 总被引:1,自引:0,他引:1
将编码南极假丝酵母脂肪酶A的基因进行克隆,与pPIC9K连接构建成重组载体,并将其电转化入毕赤酵母GS115中。通过MD和MM平板及PCR扩增,筛选和鉴定重组子。重组细胞经过120 h培养后,发酵液上清酶活达到13 U/mL。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD,比原始脂肪酶略大。粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀和离子柱交换层析后,得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶。该酶最适反应温度为75℃,在70℃保持30 min后,仍具90%以上的活性,最适反应pH值为7.0,在pH6.0~8.0的范围内,具有一定的稳定性。 相似文献
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利用均匀设计法对Bacillus sp.ZJU318产酶的最佳培养基进行了快速优化研究。结果表明,其最适产酶培养基为:3.28%黄豆粉,0.023%蔗糖,0.075%K2HPO4,配制时的pH为12(灭菌后pH为8~9);此外,其发酵的最佳条件为:发酵温度28℃,接种量20%,摇瓶装量20mL(250mL三角瓶)。在最适的发酵条件下,脂肪酶的发酵水平可达24.7U/mL。Bacillus sp.ZJU318脂肪酶作用的最适温度为45℃,40℃保温1h,活力几乎没有损失;但是,在50℃和60℃的条件下保温1h后,酶活降低得比较明显;酶作用的最适pH为9.0。在pH7~10,该脂肪酶较稳定,但是在酸性的环境中,酶的稳定性较低。 相似文献
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以硫磺矿硫化叶茼基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到其淀粉酶基因。将该片段与载体pSBPYF连接后转化枯草茅孢杆菌DB1342,得到重组菌株DB1342(pSBA),对该菌株进行培养,经蔗糖诱导表达,在其上清中可检测到α-淀粉酶活力,比空载体的淀粉酶活力高了5倍多。该酶作用的最适pH值为4.5,最适作用温度为80℃,在酶液中添加不同的金属离子均降低酶活。 相似文献
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《科技风》2017,(17)
对一株产纤维素酶的黄曲霉进行发酵条件优化和酶学性质初步探究,利用DNS法测定CMC酶活、滤纸酶活,结果显示此菌株纤维素酶最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为7.0。在金属离子中,发现Zn~(2+)具有抑制作用,最大抑制浓度为0.4 mg/m L,Mg~(2+)、Mn~(2+)、Ca~(2+)、Fe~(3+)、Fe~(2+)具有促进作用,最适浓度分别为0.4、1、1、0.8、1.4 mg/mL。蛋白胨和酵母粉具有促进作用,最适浓度分别为1.0%、0.6%,最适pH为6.0。综合优化后,测得滤纸酶活和CMC酶活分别为7.73 U/mL、11.28 U/mL,相比优化前提高了38.8%和43.7%。 相似文献
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响应面法优化解酯假丝酵母Candida lipolytica产脂肪酶发酵条件 总被引:4,自引:0,他引:4
用响应面法对Candida lipolytica液体发酵产脂肪酶的发酵条件进行了快速优化。首先运用逐因子试验确定Candida lipolytica产脂肪酶的最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和蛋白胨。在此基础上,通过Plackett-Burman设计对影响其产酶相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的三个因素:蛋白胨,KH2PO4,初始pH。在用最陡爬坡试验逼近以上三个因子的最大响应区域后,采用响应面分析法,确定其最优发酵条件:葡萄糖0.250%,蛋白胨0.600%,KH2PO40.603%,KH2PO40.100%,MgSO4·7H2O0.050%,橄榄油0.500%,吐温-800.500%,初始pH值为7.85,转速为180r/min,28℃培养48h。最终优化后的酶活达到208.9U/ml,比初始酶活91.3U/ml提高了129%。 相似文献
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目的:探讨重组生物酵母乙肝疫苗不同免疫程式的免疫效果.对1620名人群进行酵母乙肝疫苗免疫接种,通过不同免疫时间、性别与年龄来反应其检测抗-HBs阳性情况.结果:1620名观察对象经过检测后,抗-HBs阳性人数为790名,检出率为48.8%,其中首次接种后第1个月、3个月和6个月的抗-HBs阳转率分别为20.0%、45.5%和94.7%,三个时间段前后差异都有统计学意义(P<0.05).不同免疫后时间段的女性抗-HBs阳性率都明显高于男性(P<0.05).不同年龄之间的抗-HBs阳转率比较无显著性差异(P>0.05).结论:酵母重组乙肝疫苗对青年人群具有良好的近期免疫效果,值得推广使用. 相似文献
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一株嗜热梭菌β-葡聚糖酶基因的克隆和表达 总被引:1,自引:0,他引:1
提取嗜热梭菌(Clostridium.sp)基因组DNA,首次通过PCR克隆了该菌的β-葡聚糖酶基因全长,结果表明:该基因全长1040bp,ORF为1003bp,编码334个氨基酸,计算分子量为37.8kD,等电点为7.67。经Blast分析,该序列与热纤梭菌同源性最高(99%),而与基因库中嗜热梭菌的同源性为94%,该基因已被GenBank接受(AY225318)。用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切目的片段和表达载体pET鄄30a( )后相连接,构建重组表达载体pET鄄clo,并导入BL21细菌中表达.酶学特性表明:SDS鄄PAGE电泳在37kD左右有表达蛋白带,该工程菌最适酶活29.4U/mL,是出发菌的15倍,最适温度在80℃左右,最适pH在9左右。该工程菌可构建耐热性好、酶活高的杂合基因工程菌。 相似文献
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马红霞 《科学.经济.社会》2004,22(4):82-84
科学与技术是两个不同的概念。“知识经济”的实质是,现代高新技术和人的智力是经济发展的决定因素。而现代技术的基础是科学,科学的基础是哲学,因此我们要想真正把科学和技术搞上去,就必须学习和移植代表理论思维结晶的各种哲学思想,而不能仅仅学习和移植科学和技术。此外,哲学思想也是孕育创造性思维的土壤。 相似文献
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对比中外期刊 找差距 谈对策 总被引:6,自引:2,他引:4
以国外有代表性的材料科学期刊各9种为研究对象,进行了比较与分析,找出差距,结合国外科技期刊的最新发展动向,提出了发展我国科技期刊的对策。 相似文献
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在分析图书情报机构与ISP各自竞争优势和劣势的基础上,初步探讨了图书情报机构与ISP相互融合的总体趋势以及在实现融合的过程中,图书情报机构所需要做出的努力。 相似文献
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郭杰荣 《内蒙古科技与经济》2004,(15):2-3
科学技术是第一生产力,但是,它的作用能否得到充分发挥,却有赖于管理。其管理的范围就是对人财物的管理。管理的好,可能起到较好的作用,管理的不好,则可能造成极大的损失。 相似文献
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《西藏科技》2005,(4)
我国科技奖励评审工作在6个方面进一步改善修改奖励细则、改进评价指标体系、加强评委队伍建设……ZIX月年,国家科技奖励评审工作坚持公开、会平、公正的原则,充分发挥国家科技奖励制度的政策导向作用,从6个方面进一步改善科技奖励评审工作。 一一刁乡仃《国家科学技术奖励条例实施细则》。2(X)3年底,国务院时《国家科学技术奖励条例》进行了修仃,在国家自然科学奖、国家技术发明奖和国家科技进步奖中增设了特等奖。根据条例精,科技部完成了《国家科学技术奖励条例实施细则》的修订工作,并以此规范和指导进行2(X妈年度的评审工作。 —改进评价指标体系。国家自然科学奖的评审逐渐淡化论文数童,更加注重项目所发表论文的质童和国际影响;国家技术发明奖的评审更加强调是否拥有国家发明专利或国际发明专利;国家科技进步奖的评审,更加强调项目在市场上的竞争力、经济效益、社会效益或者对国防国家安全的重要意义等相关指标。 —加强评委队伍建设。根据项目的专业技术领域情况,在随机、回避原则的墓础上,从管理部门、研究院所、大专院校和大型企业等不同领域、不同部门遴选评委,并注重吸收企业、经济部门的专家和科研一线中青年专家参加国家科技奖的评审。在初评评委中,院士约占30%,其中自然科学奖评 相似文献
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信用的起源、发展、形成与应用型态 总被引:1,自引:0,他引:1
从经济学的角度探讨了信任、信誉、信用三者之间的关系及信用在经济活动中的应用。信任起源于人与人之间的交往,信誉是正向信任的累积效应,信用则是信誉的长期积累并具有商品特性,尤其是具有货币的流通、贮藏、支付等功能。 相似文献