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相似文献
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1.
超离心技术是分离纯化生物大分子及亚细胞成份的最有用技术之一,而密度梯度离心法则是其中较为复杂的一种方法,它可以同时使样品中几个或全部组份分离,具有很好的分辨力.文中对采用密度梯度法进行分离纯化实验时,可能影响离心效果的几个因素进行了探讨  相似文献   

2.
在前期预处理相同的情况下,试验了碳纳米管表面钯活化和无钯活化两种镀镍方法.扫描电镜观察表明,经过浓硝酸纯化,碳纳米管表面的大部分杂质被除去,长的碳管被切短;两种活化方法均得到了表面镀覆有纳米镍颗粒的碳纳米管;钯活化镀镍相对于无钯活化镀镍得到的镀层更为均匀致密.探讨了两种活化方法的机理,展望了成本较低的无钯活化镀镍方法的工业化前景.  相似文献   

3.
离心技术是现代生物学技术中常用的一种方法,用于细胞、血清、蛋白质、核酸及细胞亚显微结构的分离、提纯或浓缩等,尤其是超速冷冻离心法已经成为各大分子生物学实验室研究人员最常用的技术方法。根据离心原理的不同,常见离心法为差速离心法、密度梯度区带离心法。  相似文献   

4.
目的:在超积累植物东南景天对镉的区隔化过程中,叶肉细胞等内含大型液泡的薄壁细胞起重要作用。本文旨在建立并优化其叶肉细胞原生质体和液泡的提取和纯化技术,在技术层面上为东南景天的镉区隔化机理研究奠定基础,有助于深入探明其超积累镉的生理与分子机理。创新点:优化了东南景天叶片原生质体的提取和纯化技术,并建立了能较高效率获得膜完整性好、数量多、纯度高的液泡提取方法。方法:主要包括原生质体提取、液泡粗提和液泡纯化。原生质体提取:取东南景天叶片,切成1~2 mm的细条状后浸入经预热过的细胞裂解液中,震荡2 h后过滤,离心清洗后获得原生质体。液泡粗提:采用1-丙磺酸浓度为0.675 mmol/L的原生质体裂解液裂解原生质体,离心后获得粗提的液泡,并加入含0.8 mol/L甘露醇的液泡保护液。液泡纯化:往初提液泡的悬浮液下层加入质量体积比浓度为0.10 g/ml的Ficoll溶液,进行密度梯度离心,获取纯化的液泡。结论:细胞裂解液的预热处理可加速细胞壁降解,裂解时间设置为2 h有利于原生质体的高效提取;通过对原生质体裂解液浓度、细胞保护液浓度和梯度离心等参数的改良,可有效提取叶片细胞原生质体中的液泡。  相似文献   

5.
大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养及生物学鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:探讨成体大鼠的间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养,为其应用提供理论依据.方法:用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,传代扩增,对分离的细胞进行碱性磷酸酶的检测.结果:取得较高纯度的成体大鼠骨髓MSCs,并保持细胞的活性;成体大鼠骨髓MSCs在体外培养中为贴壁生长的单个核球形细胞,培养3~4d后开始大量增殖,并形成形态均一的细胞增殖集群,对分离后所获得的细胞进行AKP染色为强阳性.结论:采用密度梯度离心结合贴壁培养法可获得较高纯度的MSCs,是实用、便捷和可行的方法.并且在体外培养条件下能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,可以成为进一步进行细胞扩增或其他实际应用的基础.  相似文献   

6.
植物细胞的质膜在植物生理活动中占有很重要的地位,它关系到细胞与周围环境的物质交换、细胞壁的形成、质膜的分子识别、细胞融合以及细胞间的识别等多种生理现象的发生与变化。为了更好地研究和证明植物细胞质膜上各种生理反应的规律性以及质股的生物学特性,分离和纯化植物细胞质膜是非常重要的。分离植物细胞质膜的基本步骤包括:细胞匀荣,匀浆母派高心洗涤得到质膜与各种细胞膜的混合物,然后制备适宜的不同浓度的蔗糖溶液,形成浓度的梯度,对洗涤后得到的膜的混合物进行分离和纯化,离心之后在溶液的梯度中收集质膜。由于不同的植物…  相似文献   

7.
离心淘洗技术是根据样品不同的密度实现样品分离。此技术能够分离不同种类的细胞,甚至是不同时相的细胞。利用野生型(SC5314)白色念珠菌以及具有假菌丝表型的突变体(cla4Δ和grr1Δ)为样品,经过超声波预处理和离心淘洗收集不同的流速组分,经后续培养和血清诱导,证实离心淘洗技术能够分离得到G1期白色念珠菌细胞,从而实现同步化。  相似文献   

8.
目的氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)被认为是动脉粥样硬化形成的重要病理因素[1,2],而血小板活化(CD62P)则是引起心脑血管梗塞的致病因素[3],本研究对单纯性肥胖儿童OX-LDL和CD62P测定来为预防心脑血管疾病提供资料.方法OX-LDL采集抗凝静脉血(有抗氧化剂),取血浆采用ELISA法测定;CD62PEDTA抗凝血,去血浆多聚甲醛固定15min,PBS洗涤后重悬取100ml细胞悬液加20ml荧光抗体标记15min,离心洗涤后加PBS悬液,用流式细胞仪测定.结果肥胖儿童同对照组儿童相比,OX-LDL和CD62P均有显著升高,P<0.01,且与TG,TG一致,肥胖儿童中主要以TG高为主,LDL-C水平与对照组相比略有差异(P<0.05).结论单纯性肥胖儿童血浆OX-LDL水平明显高于同龄组儿童,肥胖儿童CD62P也显著升高.  相似文献   

9.
优化的蔗糖密度梯度离心法分离完整叶绿体   总被引:2,自引:0,他引:2  
建立了一种简单、低成本的分离完整叶绿体的方法.以家用食品料理机破碎植物细胞,采用两层不连续蔗糖梯度和使用较低的离心速度等措施降低了实验成本和对设备的要求;通过采取措施防止叶绿体粗提物制备过程中叶绿体外被膜的破裂,以及在梯度制备和随后离心过程中由于颗粒扩散而导致的梯度不稳定,从而使方法具有很好的重复性.用该方法分离的完整叶绿体完整性很高(>90%),可以用于叶绿体细胞生物学、生物化学与分子生物学等多方面的研究.  相似文献   

10.
以牛肉膏蛋白胨和NA培养基为分离培养基,研究从杜鹃中分离内生细菌和抗生素测定的方法.通过组织分离法从毛白杜鹃(R mucronatum)中分离培养后并用划线法分离得到内生细菌的纯培养物.通过菌落形态的观察和鉴别,革兰氏染色并镜检初步鉴定为5株不同的内生细菌.利用利福平及链霉素梯度平板法筛选得到相应的抗性突变株(3株),此突变株可作为细菌内生性鉴定中的抗生素标记菌株.组织分离时的表面消毒条件和方法直接影响内生细菌的分离纯化结果,表面消毒条件适宜则分离得到的内生细菌多样性增加.  相似文献   

11.
本文在CCS基础上设计了粘连细胞分离计数实验,实验用TMS320VC5509作为硬件平台,用CCS建立工程,在图像灰度化、二值化、滤波等预处理之后,进行腐蚀运算,从而将粘连细胞分离,并在此基础上用区域标记的方法对细胞计数,最终实现对细胞数目的统计。经过实验,计数结果和人工计数基本一致,说明本实验对粘连细胞进行分离和计数是可行的。  相似文献   

12.
一、引言液体表面活性剂膜,简称“液膜”,是由表面活性剂及其溶剂所组成的薄膜。液膜分离技术是继萃取法的第二代分离纯化技术。它被不少科学家誉为“是一种最令人感兴趣的人工膜”。液膜是由美国埃克森研究工程公司的 N.N.Li 博士于1968年发明的。自从液膜分离技术诞生以来,立即引起了世界各国广大科学工作者的极大兴趣,很快在各个不同的领域开展了液膜的应用研究。七十年代它已发展成为一项崭新的分离技术,在环境保护、石油化工、湿法冶金、医药仿生、分析分离等许多领域,作为一种经济、高效的分离纯化新方法。  相似文献   

13.
分别研究了甲醇、甘油和水三种不同的活化剂对固体碱催化剂CaO在制备生物柴油中的活化作用,考察了活化时间对CaO活性的影响以及三种活化方式在空气中的耐失活能力,同时也探讨了三种活化方式的活化机理。结果发现:甲醇的活化效果不是很好,而甘油和水则对CaO有较好的活化效果,并且用水活化时不需要预先活化就有较高的活化作用;甘油活化后的CaO在空气中放置15d活性没有明显降低。无论是用甲醇、甘油还是用水来活化,它们对CaO活性的提高除了对酯交换反应体系的加速作用外,甲醇和水还有对CaO表面的去碳酸化作用,同时甘油还有去羟基化和去碳酸化作用。  相似文献   

14.
在生命科学研究和生物制药过程中,存在着大量的蛋白质、核酸和多肽等生物大分子的分析、分离和纯化工作。高效快速的分析、分离和制备生物目标物技术是从事生命科学领域必须要掌握的基本技术。层析技术是目前生化分析中功能最为强大的分离纯化工具之一,它既可以用于少量物质的分析鉴定,又可用于物质的大量分离纯化和制备。因此,以培养学生掌握分离技术方法为主要目的的层析实验是高校生化实验必做实验之一。本研究针对传统层析实验技术存在的只能用单一波长(280nm或254nm等)对已知组分进行检测等问题进行讨论,提出实现双波长(如280nm和254nm)层析实验系统的方法。  相似文献   

15.
本文将感染性猪蛔虫卵注入小鼠腹腔,诱导并制备腹腔渗出细胞。玻璃粘附法去掉其中的巨噬细胞,然后用聚蔗糖—复方泛影葡胺进行不连续密度梯度离心,分离嗜酸性粒细胞(Eos)和中粒细胞(Neu),其平均纯度分别为Eos85.5%和Nou86.1%。台盼蓝测两种细胞的活力均在85%以上。文中介绍了一种制备密度梯度的简易装置并对纯化细胞的生物学活性进行了讨论。  相似文献   

16.
脉冲中子氧活化测井是一种测量水流速度的测井方法,高能快中子与水溶液中的氧元素发生活化反应释放出的伽马射线可穿过油管、套管甚至水泥环反映出随水流动的活化氧伽马信号,通过解析测得的伽马时间谱可计算相应的水流速度。利用相关配套施工工艺,氧活化测井能在验窜、找漏、找水等工程监测方面发挥重要作用,现场实例表明该技术应用效果良好。  相似文献   

17.
对小球藻蛋白质的提取及分离的研究   总被引:6,自引:1,他引:6  
为了研究小球藻中增强免疫力及抗肿瘤等方面具有显著效果的活性成分,本文对小球藻蛋白质的提取及分离进行了初步的研究.小球藻(Chiorella ssp)光照培养,离心收集鲜藻,超声波破碎细胞,离心除细胞碎片.取上清液加入30%饱和度硫酸铵,4℃静置盐析24h,离心后分别将沉淀和上清液透析,经Sephadex G-75柱层析,可以得到分子量不同的四种蛋白质,以PAGE分析证明了本文所采用的方法.  相似文献   

18.
科技动态     
正北大研究团队开发活细胞成像新技术北京大学生命科学院生物动态光学成像中心、工学院黄岩谊课题组与化学学院陈兴课题组合作开发了一种全新的活细胞成像技术,利用炔基标记手段并巧妙应用受激拉曼显微成像技术,成功实现了对活细胞的脂类、核酸、蛋白质和糖类等关键生物分子的特异性、低干扰的三维成像,突破了成像标记基团的尺寸极限。生物标记成像是生命科学及医学研究中的基本工具,但是现有的许多标记手段,例如荧光蛋白和小分子荧光标记等方法,往往对被标记分子的  相似文献   

19.
为有效培养学生学习日语的兴趣、提高日语课堂效率,就非常有必要活化日语课堂教学。笔者结合自己的教学时间经验和新课程理论学习的体会,将从活化课堂氛围、活化教学方法、活化教学内容三个来进行粗浅的论述。  相似文献   

20.
硅烷偶联剂处理玻璃纤维表面的形态及活化机理   总被引:5,自引:0,他引:5  
利用SEM,FT-IR研究了玻璃纤维经硅烷偶联剂处理过后的表面性能,形态及表面活化机理,结果表明:处理过的玻璃纤维表面有活性官能团产生,并且与玻璃纤维表面的结合属化学结合。  相似文献   

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