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目的:研究gga-miR-29b-3p对马立克氏病(MD)肿瘤转化细胞侵袭和原癌基因Meq表达的影响.方法:选取SPF白来航鸡在感染马立克氏病病毒(MDV)后引发的内脏淋巴瘤为样本,通过实时荧光定量PCR检测gga-miR-29b-3p的表达情况;利用在线生物软件对gga-miR-29b-3p潜在的靶基因进行功能分析.以该miRNA为研究对象,MDV转化细胞系MDCC-MSB1为试验材料,分别转染miRNA激动剂或阴性对照,检测细胞侵袭相关基因MM P2和MM P9以及MDV原癌基因Meq的表达情况.结果:Gga-miR-29b-3p在感染MDV白来航鸡的肿瘤化脾脏和肝脏淋巴瘤中均显著低表达.信号通路方面miRNA的预测靶基因分别参与FoxO信号通路、mTOR信号通路、Jak-STAT信号通路、Toll样受体信号通路、ErbB信号通路、VEGF信号通路和细胞凋亡等,这些信号通路可参与肿瘤发生进程.转染miRNA激动剂后,MMP2和MMP9基因的表达量在48 h显著下调(P<0.05);Meq基因在48 h表达显著下调(P<0.05).结论:Gga-miR-29b-3p抑制细胞侵袭和病毒原癌基因的表达,其潜在靶基因能够介导肿瘤发生,提示该miRN A可能参与M D肿瘤转化过程. 相似文献
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项目的主要目标是实现猪的诱导多能干细胞(i PSCs)向神经干细胞(NSCs)体外诱导。在整个实验探索的过程中,我们使用了传统的诱导分化形成神经干细胞(NSCs)的方法,即通过拟胚体(EB)的形成并添加维甲酸(RA)进行诱导。猪的诱导多能干细胞(i PSCs)经历了传代培养、拟胚体(EB)时期、诱导分化时期三个重要阶段,生成一类新的细胞。最后我们使用免疫荧光法检测到新的细胞中存在神经干细胞的特异性标志物Nestin、神经元标志物β-tubulin III以及神经胶质细胞标志物GFAP表达,从而确定这类新的细胞为神经干细胞。可见,猪的诱导多能干细胞(i PSCs)经过这种传统诱导分化方法培养可分化为具备基础特征的神经干细胞(NSCs),能够表达出神经干细胞(NSCs)特异的标志分子nestin。 相似文献
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胚胎干细胞是来源于胚胎囊胚阶段的内细胞团细胞,是能分化成个体所有组织和细胞类型的全能细胞.胚胎干细胞经过诱导后,可以分化成神经细胞前体,置换中枢神经系统疾病病损和功能障碍的细胞,发挥其治疗作用.同时,胚胎干细胞也可以作为基因治疗的载体,使外源基因能在植入的胚胎干细胞表达,达到治疗的目的.胚胎干细胞在治疗中枢神经系统疾病中显示出巨大的应用前景. 相似文献
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目的:研究姜黄素对经典Wnt信号通路活性的调控作用,探讨姜黄素在体外对人胰腺癌细胞SW1990增殖凋亡、β-catenin蛋白表达以及下游相关靶基因表达的影响.方法:应用MTT法检测不同浓度姜黄素(20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L、100μmol/L)对人胰腺癌细胞SW1990增殖的抑制作用,用流式细胞仪分析细胞的凋亡率,用Western Blot方法检测姜黄素对β-catenin蛋白表达的影响,用半定量PCR法检测靶基因c-myc、VEGF和cyclinD1在不同浓度姜黄素作用后表达情况的变化.结果:姜黄素作用于人胰腺癌细胞SW1990后,细胞增殖的水平明显下降,凋亡率升高,且呈剂量依赖性.Western Blot结果显示姜黄素能降低胞质蛋白β-catenin的水平.姜黄素抑制SW1990细胞内Wnt信号通路下游靶基因c-myc、VEGF以及cyclinD1的表达水平.结论:姜黄素能抑制胰腺癌细胞的增殖并促进凋亡(apoptosis),其机制与姜黄素下调经典Wnt信号通路中核心蛋白β-catenin的水平有关. 相似文献
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《赤峰学院学报(自然科学版)》2017,(2)
目的:探讨索拉菲尼与ELK-3以及上皮-间质转化的关系及其作用机制.方法:将Hu H7细胞分为对照组和索拉菲尼处理组.显微镜观察细胞的形态变化,Western blot检测ELK-3、ELK-3靶基因EGR-1、EMT相关分子钙黏附素E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达和MAPK信号通路蛋白p38的表达.结果:与对照组比较,索拉菲尼处理肝癌细胞后其ELK-3和ELK-3的靶基因EGR-1的蛋白表达均显著降低(P0.01),E-cadherin表达水平升高(P0.01),vimentin的表达及p38磷酸化水平均降低(P0.01).结论:索拉菲尼通过调控ELK-3/p38抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化. 相似文献
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目的:探明猪圆环病毒3型衣壳(Cap)蛋白如何诱导细胞自噬。创新点:首次证明猪圆环病毒3型Cap蛋白诱导细胞自噬,泛素-蛋白酶体途径也参与其中。方法:构建过表达猪圆环病毒3型Cap蛋白的真核表达载体,转染HEK293T细胞,采用免疫印迹检测LC3、p62和m TOR等自噬通路的关键分子。利用激光扫描共聚焦显微镜和透射电镜,观察表达Cap蛋白的细胞是否有EGFP-LC3B点状聚集和自噬泡生成。利用氯喹抑制溶酶体酸化,探究衣壳蛋白是否诱导完整的自噬流。利用MG132抑制蛋白酶体途径,探究泛素-蛋白酶体途径是否参与自噬过程。结论:猪圆环病毒3型Cap蛋白通过抑制雷帕霉素靶蛋白的磷酸化诱导HEK293T细胞自噬,泛素-蛋白酶体途径也参与这一过程。 相似文献
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细胞编辑技术可以将已高度分化的体细胞去分化,并且重新逆转为一种被称为诱导多能干细胞的细胞,这是生命科学领域的一个重大进展。与胚胎干细胞相比,诱导多能干细胞不但具有自我更新与分化为三胚层细胞的能力,而且可以避免干细胞研究中遇到的伦理道德和免疫排斥等问题,在医学研究及临床应用中有着广阔的前景。本文概述了诱导多能干细胞技术的实施步骤和应用研究,为生物学相关内容的教学提供基本资料。 相似文献
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《安徽教育学院学报》2012,(3)
诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells,iPSCs）是被重新编程的、具有多能性的成体细胞。最近的研究证实,iPSCs能够达到与胚胎干细胞同样的全能性。源于成体的iPSCs对药物或毒性筛选、医疗研究以及疾病专一性治疗提供了极其有价值的细胞来源,然而,在应用于临床之前,必须克服潜在的风险,包括iPSCs诱导中病毒的整合、基因的改变。iPSCs潜在的风险涉及外源因子的转入、目标细胞的改变及诱导因子的表达和重新激活等。本文回顾iPSCs的应用前景和面临的挑战,同时对诱导安全性iPSCs的方法进行了讨论。 相似文献
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MicroRNAs (miRNAs or miRs) are endogenous non-coding RNAs that negatively regulate gene expression by binding to the 3′ non-coding regions of target mRNAs, resulting in their cleavage or blocking their translation. miRNAs may have an impact on cell differentiation, proliferation, and survival, and their deregulation can be inclined to diseases and cancers, including thyroid tumors. The purpose of this review is to summarize the existing findings of deregulated miRNAs in different types of thyroid tumors and to exhibit their potential target genes, especially to demonstrate those involved in tumor invasion and metastasis. In addition, new findings of circulating miRNA expression profiles, single nucleotide polymorphism (SNP) in thyroid tumors, and the correlation of somatic mutations with deregulated miRNA expression in thyroid tumors were all included in this review. 相似文献
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吴建桥 《孝感职业技术学院学报》2007,10(3):105-109
miRNA是一类高度保守的非编码RNA,为21-25nt的单链型RNA(ssRNAs),由70-90nt的可形成发夹状的内源性转录前体pri-miRNA加工而成,miRNA与靶mRNA的3'-UTR碱基配对,通过抑制mRNA的翻译或直接使mRNA降解,在转录后水平使基因产生沉默,研究发现人类全部基因的三分之一都受到miRNA的调控,这表明miRNA分子实际上是基因调控网络中的核心成分。近来研究发现miRNA与人类的某些疾病密切相关。文章综述了miRNA的基因调控原理和临床研究进展。 相似文献
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Xingchi KAN Yingsheng CHEN Bingxu HUANG Shoupeng FU Wenjin GUO Xin RAN Yu CAO Dianwen XU Ji CHENG Zhanqing YANG Yanling XU 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2021,22(11):929
Inflammation plays an important role in the development of acute lung injury (ALI). Severe pulmonary inflammation can cause acute respiratory distress syndrome (ARDS) or even death. Expression of proinflammatory interleukin-1β (IL-1β) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in the process of pulmonary inflammation will further exacerbate the severity of ALI. The purpose of this study was to explore the effect of Palrnatine (Pa) on lipopolysaccharide (LPS)-induced mouse ALI and its underlying mechanism. Pa, a natural product, has a wide range of pharmacological activities with the potential to protect against lung injury. Western blotting and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) assays were performed to detect the expression and translation of inflammatory genes and proteins in vitro and in vivo. Immunoprecipitation was used to detect the degree of P65 translocation into the nucleus. We also used molecular modeling to further clarify the mechanism of action. The results showed that Pa pretreatment could significantly inhibit the expression and secretion of the inflammatory cytokine IL-1β, and significantly reduce the protein level of the proinflammatory protease iNOS, in both in vivo and in vitro models induced by LPS. Further mechanism studies showed that Pa could significantly inhibit the activation of the protein kinase B (Akt)/nuclear factor-κB (NF-κB) signaling pathway in the LPS-induced ALI mode and in LPS-induced RAW264.7 cells. Through molecular dynamics simulation, we observed that Pa was bound to the catalytic pocket of Akt and effectively inhibited the biological activity of Akt. These results indicated that Pa significantly relieves LPS-induced ALI by activating the Akt/NF-κB signaling pathway. 相似文献
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Computational prediction of microRNA genes in silkworm genome 总被引：3，自引：0，他引：3
MicroRNAs （miRNAs） constitute a novel, extensive class of small RNAs （-21 nucleotides）, and play important gene-regulation roles during growth and development in various organisms. Here we conducted a homology search to identify homologs of previously validated miRNAs from silkworm genome. We identified 24 potential miRNA genes, and gave each of them a name according to the common criteria. Interestingly, we found that a great number of newly identified miRNAs were conserved in silkworm and Drosophila, and family alignment revealed that miRNA families might possess single nucleotide polymorphisms, miRNA gene clusters and possible functions of complement miRNA pairs are discussed. 相似文献
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INTRODUCTION b-1,4-galactosyltransferase (b4Gal-T) (EC 2.4.1.38), as one of the most researched glycosyl-transferases in recent years, produces a b-1,4-linked galactosylated glycan by the transferation of ga-lactose (Gal) from an uridine diphosphate-galactose (UDP-Gal) to a monosaccharide N-acetylglucosa- mine (GlcNAc) or a GlcNAc residue located in the non-reducing terminal of glycans of glycoproteins or glycolipids. In addition to GlcNAc, the enzyme can also use other reducing su… 相似文献
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绿僵菌是一类广泛应用于生物防治的昆虫病原真菌.研究表明小RNA能够调控基因的表达,其中Argonaute基因在整个小RNA通路中发挥重要的作用.本研究通过RT-PCR的方法从绿僵菌中获得了Argonaute基因的部分功能片段,构建了其重组原核表达载体,将重组载体转化至大肠杆菌进行诱导表达;采用镍柱亲和纯化重组的目的蛋白并通过Western blot技术鉴定.结果发现：通过RT-PCR的方法获得长度约为950bp的基因片段;重组原核表达载体经诱导表达后,SDS-PAGE检测发现分子量约为34kDa的目的蛋白条带;诱导5h后蛋白的表达量最高,采用镍柱亲和层析纯化重组蛋白,经Western blot技术检测,重组蛋白可与His-tag抗体发生特异性反应.该纯化重组蛋白的获得为将来绿僵菌Argonaute蛋白抗体的制备,并进一步通过该抗体获得绿僵菌体内的小RNA及其靶基因提供了基础. 相似文献