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先用DEAE-Sephadex A 50离子交换层析,然后用CM-Sephadex C 50离子交换层析,最后用12%SDS-PAGE制备电泳纯化尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ。将含出血毒素Ⅲ的聚丙烯酰胺凝胶磨细免疫小鼠,制备抗血清。ELISA检测显示制备的抗血清IgG能够与天然的出血毒素Ⅲ结合,Western blot检测结果显示制备的抗血清只与出血毒素Ⅲ特异结合,制备的抗血清可以用于免疫组织化学实验,为以后检测血毒素Ⅲ的结合位点打下了基础。 相似文献
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几种血清学技术在浙贝母花叶病毒(Thunberg fritillary mosaic virus)检测中的应用 总被引：2，自引：0，他引：2
通过12％SDS-PAGE和5％～20％梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化浙贝母花叶病毒（Thunberg fritillary mosaic virus，TFMV）的外壳蛋白，4次免疫小鼠，获高纯度的抗血清。分别用Western blot、间接ELISA、免疫扩散、火箭免疫电泳和对流免疫电泳5种免疫检测技术对TFMV样品进行了检测。结果表明，间接ELISA方法不能灵敏地检测新鲜病汁液中的病毒粒子．免疫扩散不能用于未变性病毒粒子的检测。Western blot灵敏度高，但操作复杂。火箭免疫电泳和对流免疫电泳均具有操作简单、灵敏度高、检测周期短的优点，但前者需抗血清的量大。5种免疫检测技术中，对流免疫电泳最适合浙贝母病样中TFMV的快速检测。 相似文献
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洋葱黄矮病毒和韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备 总被引：1，自引：0，他引：1
根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)和韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计特异引物,分别扩增OYDV和LYSV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得高纯度的抗CP血清。Westernblot分析表明,OYDV与LYSV血清学远缘相关。对大蒜田间样品的间接ELISA检测表明,OYDV和LYSV在田间普遍发生,且通常为复合侵染。两者间微弱的血清学交叉反应对ELISA检测结果影响极小,可用于样品检测。 相似文献
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尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)毒出血毒素I出血机制的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用125I标记尖吻蝮蛇毒出血毒素I(AaHI),用125I-AaHI为材料研究它在家兔体内的分布和药物代谢动力学,研究结果表明,有血脑屏障存在,肝脏和肾脏含量较高,125I-AaHI代谢的产物主要通过肾排出,经计机模拟,125 I-AaHI的药物代谢动力学为一室模型,其中生物半衰期T1/2 为53.1min,K值为0.0154min-1.结合动力学研究结果表明,离子强度、温度和离子种类对125I-AaHI与肾匀浆组织结合无影响,pH低于5.8或高于8.0时结合能力下降,结合有时间饱和性,并有明显的竞争抑制现象.上述结果说明125I-AaHI在动物体内均匀分布,可能有AaHI相关的结合位点或受体存在. 相似文献
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将南瓜子炒熟后去壳,以魔芋粉、绿茶粉、南瓜子壳粉为主要原料,以盐、糖、味精等为辅料,重塑南瓜子壳.借助于单因素试验结果,进一步通过响应面设计和模糊数学感官评定优化绿茶魔芋南瓜子产品配方.优化得出可食南瓜子壳最佳配方参数为:以100g南瓜子仁为总量标准,主要原料的添加量分别是绿茶粉1.75%、南瓜子壳粉0.35%、魔芋粉28%、辅料复合粉7.35%.结果表明:感官模糊综合评价法联合响应面优化法用于可食南瓜子壳配方的优化,所得产品的感官品质最佳. 相似文献
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采用含琼脂的丰固体培养基来培养松乳菇菌丝,优化了半固体培养基碳源和氮源以及培养温度,并将含同样营养成分的液体培养、固体培养和半固体培养进行了比较,试验结果表明,松乳菇菌丝采用半固体培养时,0.5％蔗糖与1.5％淀粉的组合碳源培养菌丝生长速度最快,蛋白胨是最理想的氮源物质,25℃是松乳菇菌丝的最适培养温度.3种不同培养基培养结果是半固体培养基菌丝生长速度明显超过了其他2种培养基,且菌丝颜色可以由纯白色转变为棕黄色,同时出现部分菌丝相互靠近集中生长的现象,此现象类似子实体原基的形成.松乳菇菌丝半固体培养方法为人工栽培松乳菇提供了新的思路. 相似文献
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尖吻蝮蛇（Agkistrodon acutus）毒出血毒素Ⅰ出血机制的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
用^125I标记尖吻蜊蛇毒出血毒素Ⅰ（AaHⅠ)，用^125I-AaH Ⅰ为材料研究它在家兔体内的分布和药物代谢动力学，研究结果表明，有血脑屏障存在，肝脏和肾脏含量较高，^125I-AaHⅠ代谢的产物主要通过肾排出，经计机模拟，^125I-AaHⅠ的药物代谢动力学为一室模型，其中生物半衰期T1／2为53.1min，K值为0.0154min^-1。结合动力学研究结果表明，离子强度、温度和离子种类对^125I-AaHⅠ与肾匀浆组织结合无影响，pH低于5.8或高于8.0时结合能力下降，结合有时间饱和性，并有明显的竞争抑制现象，上述结果说明^125I-AaHⅠ在动物体内均匀分布，可能有AaHⅠ相关的结合位点或受体存在。 相似文献
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