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mRNA在细胞质内的稳定性是调控基因表达的重要方式。细胞以mRNA降解的方式对过时的、突变有害的mRNA进行及时清除以保证基因的正确表达和细胞正常的生命活动。其中脱帽酶Dcp1/Dcp2在mRNA降解中起到主要作用，但对其降解mRNA的详细作用机制了解甚少。到目前为止，尚没有该基因市售的抗体出现，阻碍了对该基因机理的研究。本文目的是利用PCR方法，从人的胎肝文库中克隆到Dcp2基因，制备其多克隆抗体血清。实验结果显示，通过溴化氰偶联柱子对该多克隆抗体血清经纯化得到的多克隆抗体，用于Western Blotting 试验，可以检测到该蛋白内源性的表达；用于激光共聚焦定位实验显示该内源性蛋白定位在细胞核内；此抗体同时可用于免疫沉淀实验。因此Dcp2基因和多克隆抗体的获得，为进一步研究该基因的功能创造了条件。 相似文献
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为探不同离心力(转速)对抗体效价检测结果的影响,文章中以检测鸡新城疫抗体效价为验证试验,用100份鸡血液经不同离心力分离血清开展检测,结果表明抗体效价检测结果和离心力(转速)相关性不大,不同离心力分离动物血清对抗体效价检测结果影响不显著。 相似文献
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对近年伤寒免疫学诊断方法结合作者的研究工作进行了评价。伤寒免疫学诊断可分检测早期病人体液中抗原及测定患者血清中抗体两个方面。检测抗原以SPA-CoA与ELISA(包括Dot-ELISA)较为敏感和特异,而DRLAT则有简便的优点。测定抗体以PHA最为简便与快速。使用LPS-PHA可作伤寒的早期快速诊断,而Vi-PHA可作伤寒病后带菌者的初筛。ELISA有较PHA更高的敏感性,其中LPS-IgM-ELISA亦可作伤寒病人的早期诊断,而LPS-IgG-ELISA可用于该病的追溯诊断和血清流行病学调查。Vi-ELISA还可作伤寒病后带菌者初筛。不同条件实验室可根据取得试剂情况选择使用。 相似文献
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l、动物被动免疫这里既是利用生物药品厂生产的抗原物质疫苗、菌苗免疫动物注射等到一定时间动物机体产生特异性抗体，这种抗体往往可以从血液中分离提取即血清或血浆，在体外一定的pH值，温度，电解质，振荡，杂质等因素的作用下与相应的毒素，病毒受体结合而使病毒毒素失去毒性和感染力，其中中和试验(MNT)中活性抗体主要是1gG、1gM等，在将抗原抗体结合物注射到动物体内不能致死动物，证明该疫苗、菌苗能使机体产生对抗特异性细菌、病毒的抗体物质，而说明生物药品有效。2、应用该试验对校菌苗进行效力试验尤其是多联菌苗更显节约成本缩短检验时间，可改用小动物检验，较为准确简便、科学易行，易于了解菌苗、疫苗质量高低及其变化等诸多优点。 相似文献
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目的对SARS流行与非流行期间深圳东门市场从业人员SARS冠状病毒血清流行病学研究。方法于2003年5月和2005年1月对东门市场从业人员，用ELISA法或免疫荧光法检测SARS冠状病毒IgG和IgM抗体。结果2003年东门市场从业人员SARS冠状病毒IgG阳性率为6．16％（88／1429），2005年IgG阳性率为1．5％（7／466），SARS流行期抗体的阳性率显著高于非流行期；2003年和2005年野生动物档、三鸟档和屠宰档三类人员的SARS-CoV IgG抗体水平显著高于其他五类人员，但2003年这三类高危人群SARS-CoV IgG抗体的阳性率显著高于2005年；且SARS-CoV IgG抗体可以维持1年零8个月的时间；2003年东门市场从业人员中SARS冠状病毒IgM抗体阳性率为0．69％，其中一例SARS确诊病例SARS冠状病毒IgM和IgG抗体均为阳性，2005年SARS-CoVIgM抗体均为阴性，结论2005年东门市场从业人员未出现新近SARS病毒感染者。2003年SARS流行期间，东门市场存在SARS病毒感染者和隐性感染者，且与野生动物密切接触人员为SARS冠状病毒感染的高危人群，支持SARS病毒来源于动物的推测。 相似文献
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目的对SARS流行与非流行期间深圳东门市场从业人员SARS冠状病毒血清流行病学研究.方法于2003年5月和2005年1月对东门市场从业人员,用ELISA法或免疫荧光法检测SARS冠状病毒IgG和IgM抗体.结果2003年东门市场从业人员SARS冠状病毒IgG阳性率为6.16%(88/1429),2005年IgG阳性率为1.5%(7/466),SARS流行期抗体的阳性率显著高于非流行期;2003年和2005年野生动物档、三乌档和屠宰档三类人员的SARS-CoV IgG抗体水平显著高于其他五类人员,但2003年这三类高危人群SARS-CoV IgG抗体的阳性率显著高于2005年;且SARS-CoV IgG抗体可以维持1年零8个月的时间;2003年东门市场从业人员中SARS冠状病毒IgM抗体阳性率为0.69%,其中一例SARS确诊病例SARS冠状病毒IgM和IgG抗体均为阳性,2005年SARS-CoVIgM抗体均为阴性,结论2005年东门市场从业人员未出现新近SARS病毒感染者.2003年SARS流行期间,东门市场存在SARS病毒感染者和隐性感染者,且与野生动物密切接触人员为SARS冠状病毒感染的高危人群,支持SARS病毒来源于动物的推测. 相似文献
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近年来,香港对大陆出口的活猪检疫越来越严格,被检出疫病的活猪数量逐年呈上升趋势。为了掌握我市供港活猪的主要疫病情况,为相应检疫计划的部署提供依据,我们对供港活猪主要疫病抗体水平作了一次长久的监测并对免疫效果进行了分析。在试验过程中,随机抽取了270头供港猪血清,采用正向间接血凝试验对猪瘟抗体水平进行检测,用ELISA的方法对猪蓝耳病、伪狂犬病、园环病抗体水平进行检测。结果显示,猪瘟抗体水平检测试验270份血清中达到1：64的有202份。免疫保护率为74．81％,免疫效果不理想。蓝耳病阳性率为13．33％,圆环病阳性率为13．70％,伪狂犬病阳性率达26．66％。总体效果较差。文章根据实际情况分析了免疫失败的原因,并对检疫部门如何加强监管提出了建议,为今后开展供港猪检疫业务提供了部分可行资料。 相似文献
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在成功建立稳定分泌鼠抗人B7-2杂交瘤细胞株基础上,扩增并克隆出该单克隆抗体的重链(VH)和轻链(VL)可变区基因。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法,在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗人B7-2单链抗体(B7-2 ScFv)基因。为便于表达产物的纯化,在抗人B7-2 ScFv的C端增加了6×His tag序列。将其克隆至表达载体pET32a并在大肠杆菌中进行原核表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果表明,抗人B7-2 ScFv在大肠杆菌BL21(DE3)菌中获得表达,重组融合蛋白的相对分子量约为43 kD,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经溶解包涵体,体外复性和Ni-NTA亲和柱纯化,获得了高纯度的抗人B7-2 ScFv,纯化蛋白得率约16.2%。成果为抗人B7-2单链抗体的生物学活性研究和抗肿瘤药物开发奠定了基础。 相似文献
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李彩凤 《内蒙古科技与经济》1997,(1)
鼠单克隆抗体3H11（McAb3H11）能特异地结合于胃癌细胞，并已成功地应用于临床肿瘤显象，但由于McAb3H11对人体的异源性及作为大分子不易进入肿瘤组织内部等缺点，限制了其临床应用，近年来发展起来的基因工程抗体，以其分子小、免疫源性低等优点成为国内外抗体领域研究的热点。本文应用分子生物学方法，构建3H11的单链抗体（SCFV3H11并在大肠杆菌合成表达，为SCFV在临床的广泛应用奠定了基础。 相似文献
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为了进一步了解不同种类的狂犬病疫苗对农村散养犬免疫效果,对百色市的6个县所辖的12个自然屯的散养犬分别使用国产兽用狂犬病活疫苗(Flury株)和进口兽用狂犬病灭活疫苗(G52株)以不同方式免疫。在免疫前和免疫后7～10d、20～30d、150～180d、340～360d分别采集犬只血清,采用间接酶联免疫法(ELISA)检测抗体水平。结果,未免疫前、使用活疫苗免疫一次、灭活苗免疫一次、活疫苗二次免疫、活疫苗一免后用免疫灭活疫苗再加强免疫一次,其抗体平均阳性率分别为0、70.3%、89.8%、95%、98.8%。结果表明犬只免疫两次以上狂犬病疫苗取得良好的免疫效果,同时进口狂犬病灭活疫苗免疫效果优于国产狂犬病活疫苗。 相似文献
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本文通过对147例EHF患者病后不同时间IFA、RPHI、HI3种特异性抗体的分析研究,发现病后10年内的EHF患者上述3种抗体的阳性检出率分别为82.31％、85.03％、84.35％,IFA和RPHI抗体的GMT分别为1:47.10和1:50.38。野鼠型患者和家鼠型患者HI抗体GMT分别为1:327.01和1:191.41。野鼠型患者IFA抗体、RPHI抗体及HI抗体滴度显著高于家鼠型;HI抗体滴度显著高于IFA、RPHI抗体滴度。IFA抗体和RPHI抗体滴度随着病后时间的延长有下降趋势。 相似文献
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动物细胞培养基是细胞赖以体外生长、繁殖、分化的重要因素。随着哺乳动物细胞培养规模的扩大和生物药物需求的增长,基于细胞及产品特性的无血清培养基的研制已成为细胞工程领域的重要课题。本文主要对无血清细胞培养基及其常用添加成分、无血清细胞培养基在生物科学领域的应用、近年来的研究进展等进行论述。 相似文献
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文章提出了一种基于人工免疫增量的聚类算法。该算法在人工免疫可更新聚类算法的基础上,结合蚁群增量聚类算法的思想,将原聚类得到的记忆抗体矩阵作为初始矩阵,调用人工免疫聚类算法处理增量数据,然后采用类解体机制处理类内误差超过规定阈值的聚类。 相似文献