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1.
制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1:32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。 相似文献
2.
以烟草花叶病毒（TMv）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法．以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸接沉淀法制备出高效价的兔和瓦抗TMV血清，并运用先进的ELISA方法测定了抗血清中抗体IgG的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的lgG纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的IgG的生物活性．同时还运用成二醛一步法制出高结合率的IgG与过氧化氢酶（HRP）标记的抗体，形成了一整套制备抗血清、纯化IgG并对IgG进行酶标的技术，为植物病毒检测提供了快速简便的方法． 相似文献
3.
免疫-聚合酶链式反应(免疫-PCR)集PCR的高敏感性与免疫学反应的特异性于一体,极大地提高了免疫检测的水平。本实验依据免疫-PCR的基本原理,结合国内实际情况,初步建立了免疫-PCR的实验方法,并对实验条件进行了摸索。 采用易得的人IgG作为抗原,生物素化羊抗人IgG(Bio-SaHIgG)作为抗体,链霉亲和素(SA)充当连接分子,生物素化线性质粒pUC18(Bio-pUC18)为标记物组建免疫-PCR模式。 实验结果如下:针对pUC18作为标记物,免疫-PCR的扩增反应程序为:94℃预变性180秒,30个三温循环(94℃变性60秒,58℃退火60秒,72℃延伸60秒),72℃末延伸300秒为宜;用优化后的条件组建的免疫-PCR的检测灵敏度为1.2×10~(-8)g/ml,最低检测限为1.2fg(相当于4500个人IgG分子);比对照BA-ELISA敏感10~6倍,特异性强、重复性较好、敏感度之高是目前其它免疫分析方法无法比拟的;分析了多种影响免疫-PCR的因素,将为微量物质的检测提供一种新的、敏感的免疫测定方法。 相似文献
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黄晓梅 《宁德师专学报(自然科学版)》2007,19(4):357-361
提出一种基于酶催化沉积底物和生物素——亲和素两步放大的超灵敏免疫检测方法.抗体通过单层蛋白A固定到金电极表面,预先处理好的生物素化抗体和辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素形成的网状复合物作为免疫反应信号的放大探针.在有H2O2存在的情况下,通过辣根过氧化物酶（HRP）催化氧化DAB（3,3’—联苯二胺）在金电极上沉积一层不溶物,引起阻抗的显著增大.该传感器用于人IgG检测,检测下限为1.0×10^-8g.采用法拉第阻抗和压电石英晶体微天平分别表征了该传感器的特性. 相似文献
5.
基于过氧化氢酶(HRP)催化和硼酸特异性识别,成功制备了一种多壁碳纳米管-HRP-聚氨基苯硼酸(MWCNTs-HRP-PABA)复合膜并用于过氧化氢生物传感器.紫外-可见和红外光谱表明MWCNTs-HRPPABA复合物具有良好的生物相容性并保持了HRP的生物活性.电化学阻抗谱(EIS)和扫描电化学显微镜(SEM)表明,在HRP酶的催化下,聚氨基苯硼酸成功聚合.在0.1 M PBS溶液中,PABA具有一对可逆的氧化还原峰,表明了HRP酶的活性中心与电极之间的直接电化学.该生物传感器性能良好,过氧化氢的浓度在1.21 m M至20 M之间具有良好的线性关系,其相关系数为0.9973,检测下限为5.0 M(S/N=3).因此,这种基于HRP催化和硼酸特异性识别的方法为设计独特的生物传感器提供了一个良好的平台. 相似文献
6.
将抗人IgG溶液直接分散于含有十八胺(ODA)的亚相上制备抗人-脂类LB生物膜.通过实验结果得到最佳实验条件.将抗体一脂类膜作为选择元件,用石英晶体微天平(QCM)作为转换器制成免疫生物传感器.此传感器对人IgG的检测响应范围是200 ng cm-3～1200 ng cm-3.由于此方法用抗体量少且操作简单,可为制备经济方便的免疫传感器提供可能. 相似文献
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冯华 《岳阳职业技术学院学报》2023,(3):76-80
目的 建立混合体系合成雷贝拉唑钠的新方法并对新方法进行优化。方法 以2-氯甲基-4-(3-甲氧基丙氧基)-3-甲基吡啶盐酸盐（简称SM1）和2-巯基苯并咪唑（简称SM2）为原料,依据Williamson醚的合成工艺,首先将SM2与氢氧化钠溶液反应得到2-巯基苯并咪唑钠,增强其化学反应活性,接着将SM1与2-巯基苯并咪唑离子在水-乙醇、乙酸乙酯的混合系统中进行化学反应,制得雷贝拉唑硫醚,然后将雷贝拉唑硫醚用二氧化氯氧化制得雷贝拉唑钠粗品,再用重结晶法制备出高纯度的雷贝拉唑钠。结果 制备得到的雷贝拉唑钠纯度大于99.7%,收率超过85%,有关物质的总量不大于0.2%,单个杂质不超过0.1%。结论 本工艺生产步骤相对较少,减少了其他溶剂的使用,明显降低了生产成本,适合工业化生产,所得产物收率更高,纯度也更高,质量稳定性更好。 相似文献
8.
本文研究的酶免疫传感器是采用再生丝素将待测抗原(兔IgG)固定在石墨电极表面,选用抗体(山羊抗兔IgG-HRP)与其识别结合.利用H2O2将抗原体结合的电位响应信号放大,采用直接电位法检测IgG的浓度.该传感器测定IgG的最低检测浓度可达1.2×10-10mol/L,标准曲线的线性范围在4.1×10-7～1.2×10-10mol/L,响应时间为15s.通过电泳的方法加速抗原抗体的识别结合,反应时间由原来的90min缩短到30min,这在国内外鲜有报道.这种以固定化抗原结合酶标抗体量的多少作为检测抗原标准的新型酶免疫传感器,不仅在临床检测、生物医学研究领域中,而且在动植物疾病检测、环境监测等领域都有着广阔的应用前景. 相似文献
9.
《实验室研究与探索》2015,(12)
农作物秸秆纤维素化学法水解-氧化一体化制备葡萄糖酸钠的技术特征为:利用80%浓硫酸水解纤维素制备葡萄糖,前一轮氧化阶段副产物Cu2O和Cu(OH)2作为碱中和纤维素水解阶段的催化剂硫酸,Na2Cu(OH)4作为氧化剂氧化葡萄糖制备葡萄糖酸钠;中和阶段获得制备氧化剂的原料Cu SO4和副产品Cu,葡萄糖酸钠、金属铜产率分别为85%、87.6%。葡萄糖酸钠联合生产法的特征为:纤维素水解与葡萄糖氧化一体化设计,利用氧化剂副产物处理硫酸实现"零成本"回收硫酸,解决了传统浓硫酸水解纤维素中硫酸回收困难、成本较大和腐蚀性强等问题;葡萄糖氧化与湿法炼铜一体化设计实现"氧化剂增值"和"氧化剂循环",解决了传统制备葡萄糖酸钠工艺中存在的反应条件高、成本高、效益低等问题,增强了该技术的抗风险能力。 相似文献
10.
本文应用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪技术与电镜相结合的方法,对猫后索核丘脑投射神经元的分市及超微结构进行了研究。结果表明,后索核丘脑投射神经元主要分布于后索核中段,尾侧段次之,嘴侧段最少。标记神经元均出现于HRP注射部位的对侧后索核内,主要为中等园形细胞。电镜下,神经元胞核较大,核膜光滑或有凹陷,常染色质较多,异染包质1较少,胞浆丰富,含有大量的游离核糖体,粗面内质网及线粒体。标记的丘脑投射神经元胞体和树突可以作为突触后成分与轴突形成轴一体突触和轴一树突触;标记神经元胞体还可以和突触前树突形成树一体突触;标记的树突做为中央成分与多个轴突形成汇聚型突触复合体。此外,还发现标记的胞体和树突与非标记的树突之间的非突触的粘着斑连接。 相似文献
11.
采用酸化-乙醚萃取法制备了Keggin结构的磷钨钒杂多酸,并分别采用浸渍法、溶胶-凝胶法制备了二氧化钛负载型杂多酸催化剂,采用紫外和红外光谱对催化剂进行表征.以H2 O2为氧化剂,以二苯并噻吩(DBT)的正辛烷溶液为模型柴油,对其氧化脱硫反应进行了研究,考察了催化剂对模拟油品中二苯并噻吩(DBT)的氧化脱硫反应性能研究,考察了不同制备方法、不同负载量对催化剂脱硫效率的影响.结果表明,溶胶凝胶法制备的负载型催化剂明显优于浸渍法制备的催化剂,在反应温度50℃,反应时间为4小时,n(H2 O2)/n(s)=4:1的优化条件下,DBT转化率达到89％.催化剂通过简单过滤法可分离回收,重复使用5次后DBT转化率为83％. 相似文献
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13.
在碱性溶液中,多硫化钠同溴酸钠的离子反应式是:S_x~(2+)+BrO_3~-+OH~-→xSO_4~(2+)+Br~-+H_2O ①已知 BrO_3~-与 OH~-的物质的量比是2:3,试配平这个离子反应式。在反应式①中,多硫负离子的组成尚未确定。配平时既要求出各反应物和产物的系数,又要确定多硫负离子的组成。用氧化数法,离子-电子法和原子- 相似文献
14.
张丹参 《河北北方学院学报(医学版)》2011,(1)
目的:建立一系列适用于药物筛选的微孔板抗氧化实验方法.方法:采用SpectraMax M5连续光谱酶标测试仪,建立抗DPPH氧化活性、清除羟自由基实验方法(邻二氮菲-Fe2+氧化法)、还原能力测定及抗脂质过氧化微孔板抗氧化实验方法.结果:这四种抗氧化微孔板实验方法具有稳定性好,所需试剂种类少、耗材量少,方法简便及可重复性强等共同特点;相对而言,抗DPPH氧化和还原实验两种实验方法在这几方面更具优势,更适合于作为抗氧化药物的大规模初筛基础试验方法.结论:这四种微孔板抗氧化实验方法,可以广泛应用于药物筛选,特别是高通量药物筛选研究. 相似文献
15.
开发了N,N-二乙基苯胺(DEA)-富勒醇(F)-异硫氰酸荧光素(FITC)磷光标记试剂(DEA-F-FITC)及建立DEA-F-FITC标记伴刀豆凝集素(Con A)亲和吸附(AA)固体基质室温燐光法(AA-SS-RTP)测定AFP-V新方法。该方法的灵敏度高(Pg/mL)为0.13(F)和0.090(FITC),用于测定人血清样品中AFP-V的含量和人体疾病预报,结果都与酶联免疫法的相吻合。 相似文献
16.
介绍三种数学方法:分数法、归一法和代数法在配平化学方程式(含离子方程式)中的运用,特别是一些难确定化合价的化合物参与的氧化还原反应方程式的配平。 相似文献
17.
本文应用了一种方便有效的方法制备了碳米管四氧化三铁复合物(CNTs/Fe3O4)修饰电极,并在修饰电极干燥过程中应用了磁场.这种在磁场作用下制备的修饰电极对多巴胺(DA)表现出很强的电催化活性.采用了X射线衍射(XRD)、透射电子显微镜(TEM)对制备出来的碳纳米管四氧化三铁复合物的组成、形貌和结构进行了表征.扫描电子显微镜(SEM)对修饰电极的表面形貌进行了表征,循环伏安法(CV)和示差脉冲伏安法(DPV)对修饰电极的电化学性能进行了表征.实验表明,该电极对多巴胺的电化学氧化具有明显的催化作用.用DPV对多巴胺进行了测定,其氧化峰电流与多巴胺的浓度在6.0×10-7-4.3×10-4 mol·L-1范围内呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9989,检出限(S/N=3)为3.2× 10-8 mol·L-1. 相似文献
18.
Qiu Hongjiu Liao Jianping 《大连大学学报》1992,(3)
应用火焰原子吸收光谱法连续测定啤酒中钾、钠、钙、锌、铜、铁、镁、锰8种人体必需元素,未见文献报道。本文采用连续法,以啤酒中的钾、钠互为电离缓冲剂,以50g/L 氯化锶为释放剂,以0.2Mol·L~(-1)硝酸为稀释剂,采用空气—乙炔火焰对上述8种元素进行测定,方法简便快速、精度高、准确可靠,结果令人满意。 相似文献
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目的:单因素试验研究大豆磷脂酶D(phospholipase D,PLD)的固定化工艺以及固定化PLD催化合成大豆磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)的最佳工艺。方法:首先通过非极性溶剂辅助St9ber法制备纳米级介孔二氧化硅作为固定化酶的载体,通过吸附-沉淀-交联方式将PLD固定,单因素试验优化固定化条件,并对固定化后的PLD进行结构表征和热稳定性及贮存稳定性研究;然后利用固定化PLD以大豆卵磷脂和L-丝氨酸为底物催化合成PS,并通过单因素试验确定最佳合成工艺;最后对固定化PLD的循环使用性能进行研究。结果:非极性溶剂辅助St9ber法制备的介孔二氧化硅BET比表面积为948 m2/g,气孔体积为1.35 cm3/g,孔径为8.20 nm,平均粒径为335.10 nm,扫描电镜确定载体的形貌为近球形结构;当加入5.00 mL乙醇、1.00 mL酶液(温度为35℃、pH为6.50)、0.40 mL戊二醛时,固定化PLD的相对酶活达到最大值(88.39%±1.00%),蛋白固定化率为80.76%±1.30%;70℃时游离... 相似文献
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为了及时准确的给临床医师提供大便隐血化验结果,联合应用联苯胺法和抗人血红蛋白单克隆抗体法(简称单抗法)对170例临床样本进行了检测。结果显示:联苯胺法阳性率高,但易受饮食的影响,如食用肉类、蔬菜、药物、铁剂等,常出现假阳性反应。单抗法敏感性高、特异性强,但对柏油便、黑便常出现假阴性反应。因此对柏油样便、黑便应以两种方法报告结果为佳。 相似文献