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相似文献
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1.
通过对RNA提取方法的改进,从宜宾油樟中分离纯化出高质量的总RNA.琼脂糖凝胶电泳呈现出清楚的28S rRNA和18S rRNA两条带及一条5S rRNA带;OD260/OD280为1.95,OD260/OD230为3.91.用所得RNA,通过RT-PCR技术,克隆到单一的油樟SAD基因保守区.表明:所得RNA完整性好,无污染和降解,可进一步用于油樟的分子生物学研究.  相似文献   

2.
骆驼刺具有抗寒、抗旱、耐盐和抗风沙的特性,是一种非常好的生物性抗逆研究材料.通过比较CTAB法、热硼酸法和Trizol法来提取骆驼刺叶片总RNA的效果,结果表明,Trizol试剂盒法提取的RNA纯度较高,电泳条带清晰完整,OD360/OD280比值为1.91,并将其确定为骆驼刺叶片总RNA提取的方法,反转录合成cDNA第一链,利用设计的NHX1引物,PCR扩增得到一条600~800bp的DNA条带,与报道的NHX1基因的核心序列大小基本相符,验证了提取的RNA可用于RT-PCR,为骆驼刺的抗逆性研究奠定基础.  相似文献   

3.
核糖体是细胞生长所需的蛋白质合成的动力工厂,每一个核糖体的大小为4兆而顿,有18S、5.8S、28S和5S四种RNA及80S等蛋白质组成,细胞中约有50%的RNA是核糖体RNA,这些RNA直接或间接地参与形成数百万的核糖体,因此,核糖体RNA基因的转录调控机制一直是细胞生长和细胞周期调控研究的热点,细胞通过进化已经形成一套完整的配合RNA聚合酶共同完成的核糖体RNA转录调控机制。本文从核糖体RNA基因结构出发,就染色质重塑、组蛋白乙酰化及细胞周期三个方面探讨核糖体RNA转录调控机制。  相似文献   

4.
核糖体是细胞生长所需的蛋白质合成的动力工厂,每一个核糖体的大小为4兆而顿,有18S、5.8S、28S和5S四种RNA及80S等蛋白质组成,细胞中约有50%的RNA是核糖体RNA,这些RNA直接或间接地参与形成数百万的核糖体,因此,核糖体RNA基因的转录调控机制一直是细胞生长和细胞周期调控研究的热点,细胞通过进化已经形成一套完整的配合RNA聚合酶共同完成的核糖体RNA转录调控机制。本文从核糖体RNA基因结构出发,就染色质重塑、组蛋白乙酰化及细胞周期三个方面探讨核糖体RNA转录调控机制。  相似文献   

5.
从野生型成体果蝇体内提取总RNA,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox-A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体,通过Western-Blot检测效价和特异性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.  相似文献   

6.
采用液氮研磨法、反复冻融法、反复冻融-溶菌酶法、溶菌酶法、超声波法、超声波-溶菌酶法对节旋藻TJCU-7的藻细胞进行破碎,用改进的CTAB法提取基因组DNA,通过凝胶电泳检测,核酸浓度、纯度测定及PCR扩增效果来评价各破壁方法的优劣。结果发现,6种方法对节旋藻均有较好的破壁效果:经反复冻融法、溶菌酶法及反复冻融-溶菌酶法破壁后所获得的DNA浓度(2 000 ng/μL)显著高于其他方法,其中液氮研磨法所得的DNA浓度最低(40 ng/μL)。除超声波法所得DNA的OD260/OD280值大于2.00,说明有部分RNA污染外,其余方法所得DNA的OD260/OD280的值均在1.90~2.05,纯度较高。经PCR扩增后均得到了2 kb的目的片段,可以满足基本的生物学实验要求。综合考虑,反复冻融法,溶菌酶法简单、快速,破壁效果好,是节旋藻DNA提取时的优先考虑方法。  相似文献   

7.
拟南芥总RNA的简便提取与效果分析   总被引:4,自引:0,他引:4  
以COL-0型野生型拟南芥菜为材料,使用枪头在1.5ml的Eppendorf管中直接捣碎的方式,用Trizol试剂提取总RNA。通过总RNA的纯度、浓度测定及琼脂糖凝胶电泳分析提取效果。测定结果表明样品纯度分别达到1.9843和1.9741,浓度分别为1.2061μg/μl和1.1187μg/μl,电泳结果显示总RNA的28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA三条带清晰、无拖尾。与研钵研磨材料比较,此方法简便、需要材料少、降低了提取过程中RNA的降解几率。  相似文献   

8.
本文研究了DEAE-Cellulose阴离子交换树脂纯化pCR-HBc-X6-βhCG CTP37质粒DNA的方法。经研究发现纯化的质粒不含RNA和蛋白质污染;其OD260/OD280高于1.8;每2500ml发酵液可得到4.95mg的质粒DNA。  相似文献   

9.
文章采用改良的异硫氰酸胍法提取南方红豆杉枝叶总RNA,通过甲醛变性凝胶电泳,可见3条比较明显的rRNA条带,其中28SRNA条带的亮度大约为18SRNA的2倍,说明总RNA样品的完整性良好。紫外吸收值测定,A260/A280比值介于1.7到2.0之间,A260/A230比值大于2.0,得到较为典型的RNA吸收值,说明酚类、蛋白质和无机盐等杂质已排除。此方法简便易行,能得到纯度高、质量好的RNA。  相似文献   

10.
为了创建一种高效提取人体骨组织总RNA技术,分别采用Trizol、RNeasy lipid kit及改良CTAB提取人体松质骨总RNA,并分别用核酸蛋白检测仪、1%琼脂糖凝胶电泳和荧光Real-time PCR检测3种不同方法提取的总RNA质量。结果显示,3种方法中,Trizol方法提取的总RNA纯度最差,RNeasy试剂盒提取的总RNA纯度得到提高,但完整性差,改良的CTAB方法提取的总RNA纯度和完整性符合分子生物学实验要求。改良的CTAB法是从骨组织中提取总RNA高效便捷的方法,适于临床骨组织基因表达的研究。  相似文献   

11.
选择Trizol法、热酚法、酵母RNA提取试剂盒法3种方法提取热带假丝酵母总RNA,通过对总RNA进行质量浓度和纯度分析,比较不同方法对热带假丝酵母总RNA提取的影响.结果表明:使用酵母RNA提取试剂盒法提取热带假丝酵母总RNA是较为有效且简便的方法.  相似文献   

12.
该实验通过SDS高盐法(常规法)、SDS高盐法(改良法)和Soil gDNA Kit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNA Nanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法(常规法)、SDS高盐法(改良法)和Soil gDNA Kit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45 ng/μl、96.48 ng/μl和58.40 ng/μl,纯度(OD260/OD280)分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而Soil gDNA Kit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法(改良法)是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度.  相似文献   

13.
比较研究了分别以Trizol、改良CTAB法和热硼酸盐法制备的杜仲叶片RNA为模板进行肉桂醇脱氢酶基因5'末端扩增的不同效果.实验发现以改良CTAB法提取的RNA做模板时,得到的5'RACE产物特异性强,条带亮而清晰,效果最好.  相似文献   

14.
1前言在生物学教科书中,编者已设计了DNA提取的操作方法,让学生了解到最基本的且最简单、粗略的提取过程,但是中学生物教学中没有一本教材做过RNA提取实验,因为RNA在真核生物中的含量相对较少,且难以提取,其提取需要非常精密的仪器(如超  相似文献   

15.
本文阐述了传统形态学分类方法和分子生物学方法在藻类分类鉴定中的应用,以核糖体RNA基因中的18S、26S rDNA及转录间隔区(ITS)为主,举例说明了rDNA在藻类分子分类鉴定中的应用及其原理.指出只有将形态学观察和分子分类学方法有机的结合起来才能快速而准确的对藻类进行分类鉴定.  相似文献   

16.
苹果RNA提取方法的探索   总被引:2,自引:0,他引:2  
文章采用TRIZOL试剂快速提取法、CTAB法、改良CTAB法、RNAisoTM试剂盒法等四种方法以苹果枝条形成层区组织为材料提取总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度仪检测来分析RNA质量。结果表明改良CTAB法是最适的苹果形成层组织的RNA提取方法,并得到高质量的总RNA,经反转录、PCR途径克隆到苹果生长素结合蛋白基因,为在基因水平上探索苹果生长发育机理奠定了基础。  相似文献   

17.
以芸芥自交亲和系的柱头组织为试材,在常规异硫氰酸胍法的基础上,通过改变离心速度、离心时间、有些试剂的组分以及增加一些关键的提取步骤,探讨并提出了一种适合于芸芥柱头总RNA的提取方法.结果表明,用该方法提取的芸芥柱头总RNA完整性好、纯度高,可用于cDNA合成、mRNA差异显示和Northern杂交等分子生物学研究,而且操作技术简单,药品经济划算,实验结果稳定,重复性好.  相似文献   

18.
下面来看四边形一个性质: 如图1,在四边形ABCD中,对角线AC、BD交于点O,设S△AOD=S1,S△BOC=S2,S△AOB=S3,S△OOD=S4,则有如下结论: S1S2=S3S4. 证明:因为S1/S3=OD/OB=S4/S2,  相似文献   

19.
提取天然有机物的微型化学实验   总被引:1,自引:0,他引:1  
提取天然有机物的微型实验(提取大蒜辣素、八角茴香脑、芦丁和咖啡因的微型实验)具有操作简单、灵活、安全等优点,特别适合选做天然有机物的提取化学实验,值得进一步推广与普及.  相似文献   

20.
以元宝枫种壳为原料,采用亚临界水萃取技术探索单宁提取的最佳工艺条件。以单因素实验为基础,通过正交实验确定了元宝枫种壳中单宁提取的最佳工艺条件为:粉碎粒度为40-60日,萃取时间为60min.去离子水用量为18mL/g,萃取温度为106%。在此工艺条件下单宁的提取率为94.65%。经正交实验方差分析,粉碎粒度和萃取温度是影响单宁提取的关键因素。  相似文献   

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