共查询到20条相似文献，搜索用时 46 毫秒
1.
目的研究高原环境骨髓间充质干细胞体外培养及生长特性。方法无菌条件下分离提取乳兔骨髓间充质干细胞,然后使用血清体积分数为0.15的L-DMEM培养基接种于33mm培养皿中并置于37℃,5%CO2培养箱中进行培养。台盼兰染色检测细胞的成活率（死亡细胞被染成蓝色,活细胞拒染呈无色透明状）,并观察骨髓间充质干细胞的形态学变化,应用CCK8法绘制细胞生长曲线,血球计数法进行细胞计数。结果细胞接种0d时镜下肉眼见细胞形态为圆形;1d后细胞开始贴壁;3d天后镜下可见细胞形态为梭形有伪足伸出;5d天后镜子下可见细胞簇的形成,8d天后细胞融合成片。不同时间点分别计数1000个细胞,初接种时蓝染细胞53个,成活率为94.70%;细胞接种24小时后蓝染细胞69个,成活率为93.10%。生长曲线显示细胞生长过程分为潜伏期、对数生长期和平台期三个阶段。结论高原环境能够进行体外动物骨髓间充质干细胞培养。 相似文献
2.
3.
神经干细胞（NSCs）是具有高度自我更新能力并能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的神经前体细胞,具有广阔的临床应用前景。神经营养素家族对神经干细胞的分化有一定影响。其包括：神经生长因子（NGF）、脑源性神经生长因子（BDNF）、神经营养素-3（NT-3）、神经营养素-4/5（NT-4/5）以及神经营养素-6（NT-6）。本文就目前神经营养素家族对NSCs分化的影响的研究现状进行综述。 相似文献
4.
5.
目的：探讨神经标志物蛋白基因产物9．5（protein gene product9.5,PGP9.5）和S－100蛋白在先天性巨结肠（Hirschsprung's disease,HD）诊断中的作用。方法：直肠粘膜活检标本5例、手术切除标本13例正常对照2例，行一抗为抗PGP9．5及抗S－100蛋白的免疫组织化学检查（PAP法）。结果：所有活检及手术切除标本PGP9．5标记粘膜下和／或肌间神经丛内未见神经元，S－100标记神经丛内无细胞状的“空白”区，但均可见神经纤维增粗且排列紊乱。对照组GPG9．5标记粘膜下和／或肌间神经丛内见黄褐色的神经节细胞，而S－100标记神经丛内见细胞状的“空白”区。结论：PGP9．5和S－100蛋白免疫组织化学检查方法可用于诊断HD。 相似文献
6.
7.
应用免疫细胞化学技术对体内、外组小鼠植入前胚胎组蛋白乙酰基转移酶GCN5(generalcontrolofnucleotidesynthesis,GCN5)和去乙酰化酶HDAC1(histonedeacetylase1)的表达情况进行测定研究。结果显示(1)体内组:GCN5在2细胞、4细胞、8细胞卵裂胚胎和桑椹胚的胞浆内为强荧光信号;而囊胚细胞的胞浆无明显荧光信号。HDAC1在2细胞的胞浆胞核内均有荧光信号,但以胞浆内为著;4细胞、8细胞、桑椹胚和囊胚的胞核内可见HDAC1强荧光信号。(2)体外组:2细胞、4细胞、8细胞、桑椹胚和囊胚的胞浆胞核均无明显的GCN5荧光信号。HDAC1在各细胞期胚胎的染色情况与体内组基本相似,只是荧光强度有所下降,尤其是2细胞胚胎。结果表明:早期卵裂环境影响小鼠植入前胚胎GCN5和HDAC1表达。 相似文献
8.
绿色荧光蛋白(GFP)是源于海洋生物多管水母体内的一种发光蛋白,这种蛋白结构很特殊,在蓝光或紫外光激发下可以发射绿色荧光。适合用作普通的报告标记,尤其适合于活体细胞或组织。GFP基因能在活细胞内稳定表达,被广泛应用于现代生物学的各个领域。 相似文献
9.
干细胞的可塑性——一个新的研究领域 总被引：4，自引：0，他引：4
综述了骨髓相关细胞向骨、软骨、肺、脑大小胶质细胞、骨骼肌、肝
及血管内皮细胞等转化,神经干细胞和肌肉间叶细胞向造血细胞转化的研究进展。列举了干
细胞可塑性研究的重要价值。 相似文献
10.
应用月龄新西兰大白兔的骨髓和髓核进行B MMS C s及NPC s的分离培养与鉴定,探讨兔骨髓间充质干细胞（B MMS C s）与髓核细胞（NPCs）共培养时B MMS Cs的营养效应和类髓核分化效应及其动态变化规律,以其更好的探讨B MMS Cs移植技术。 相似文献
11.
12.
目的探讨阿托伐他汀钙对大鼠脑缺血再灌后脑组织中NF-kBp56及蛋白表达的影响。方法采用大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,参考onga的5分制法在大鼠麻醉清醒后进行评分。应用原位杂交和免疫化法检测NF-kBp56mRNA及蛋白表达。结果大鼠及缺血再灌注后缺血组织中NF-kBp56mRNA和蛋白表达增加（P＜0.01）.24h达高峰。给予阿托伐他汀钙干预后能减少缺血脑组织中NF-kBp56mRNA和蛋白表达（P＜0.05）,降低神经功能缺损评分（P＜0.05）。结论 阿托伐他汀钙能抑制大鼠及缺血再灌注后脑组织中NF-kBp56mRNA及蛋白表达。减轻缺血再灌损伤。 相似文献
13.
目的 探讨细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂roscovitine对C型尼曼-皮克病（NPC）小鼠（npc-／-）球状神经轴突形成的影响．方法 采用不同浓度的roscovitine（72．144．300 and 600 nmoles／day）对5．5周龄的npc-／-小鼠进行两周侧脑室灌注．以DMSO灌注的同龄npc-／-小鼠为对照．抗非磷酸化神经细丝蛋白抗体SMI32和抗有丝分裂期磷酸化表位抗体MPM-2免疫染色检测小鼠脑内球状神经轴突的数量． 相似文献
14.
微管结合蛋白对微管蛋白的结构及功能至关重要。为能较全面地揭示拟南芥微管结合蛋白MAP70-4的结构和功能,利用生物信息学方法对该蛋白的理化性质、亲水/疏水性,信号肽,跨膜区域,磷酸化位点,卷曲螺旋结构,蛋白质二级、三级结构,亚细胞定位,表达模式,分子功能及其参与的生物学功能,以及与其它蛋白的相互作用关系进行了预测分析。结果显示,拟南芥MAP70-4蛋白是一种无信号肽,不含跨膜螺旋区域的不稳定蛋白质,属于碱性、亲水性蛋白质,翻译后会产生磷酸化修饰,该蛋白二级结构含有11个α螺旋区和5个β折叠,以及7个卷曲螺旋结构。亚细胞定位显示该蛋白主要分布在细胞质中,具有促进微管结合等功能,和其有相互作用关系的蛋白可能与叶绿体生命活动及胚胎、种子发育有关。从表达模式上看,该蛋白主要在花、果实、叶片中大量表达,根中有少量表达。通过对拟南芥微管结合蛋白MAP70-4进行系统性预测分析,可为下一步对该蛋白功能的深入研究提供理论基础和借鉴。 相似文献
15.
绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)最初是从维多利亚多管水母(Aequoria victoria)中发现的发光蛋白[1].天然GFP的生色团由65-67位SerTyr-Gly的氨基酸残基组成,并经环化和脱氢形成一个咪唑环[2].其最大激发峰为395 nm,在475 nm处有一副激发峰,最大发射峰位于510 nm.gfp作为一种新型的报告基因具有许多优越性:首先它分子量较小,只编码238个氨基酸的多肽,对细胞没有毒性,不干扰标记蛋白的功能和定位.其分子结构及光谱特性稳定,能在多种条件下研究.在多数情况下,GFP的异源表达并不影响细胞的正常活动,另外,GFP是目前唯一能在异源细胞内表达并自发产生荧光的蛋白,由于不需要辅助因子的参与,故可直接用于活体测定.可以说,GFP是当前研究活体细胞中基因表达和蛋白质分布的最好手段之一,具有广阔的应用前景.自从1994年Chalfie等首次在大肠杆菌和线虫中表达gfp[3]以来,迄今为止,GFP已在多种生物,如细菌、蓝细菌、粘菌、酵母、植物和哺乳动物中表达和应用.GFP的这一种属不依赖的特性使其成为广泛运用的荧光标记分子,尤其适用于监测基因表达和活体内蛋白质定位等研究. 相似文献
16.
目的:观察大鼠急性脊髓损伤后GFAP在受损脊髓的不同时间点的表达变化,分析GFAP在脊髓内源性神经干细胞的增殖和分化过程中的作用机制,明确川芎嗪治疗脊髓损伤的分子机制。方法:将SD大鼠随机分组后利用改良Allen's法建立大鼠急性脊髓损伤模型。于造模后第8h、1d、3d、7d、14d、28d每组分别处死6只大鼠取材,免疫组化检测Brdu+、Nestin+细胞的表达及GFAP表达变化情况,并对结果进行统计分析和相关性分析。结果:脊髓损伤后,Brdu+细胞被激活,在脊髓中的表达明显增多,在脊髓白质、灰质及中央管室管膜区均有表达。Brdu+、Nestin+、GFAP+细胞表达均在第7天达到峰值,随后逐渐减少,且在损伤后第7天、14天、28天,川芎嗪组与C组比较均有显著差异(P0.01)。经对GFAP、Nestin+和Brdu+细胞在脊髓中的表达数进行相关性分析,GFAP表达与Nestin+细胞表达呈正相关趋势。结论:(1)川芎嗪能够促进脊髓损伤后GFAP的表达;(2)川芎嗪能够对脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖分化有促进作用;(3)脊髓损伤早期GFAP的表达与脊髓内源性干细胞的增殖分化呈正相关趋势。 相似文献
17.
18.
目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达. 相似文献
19.
目的：研究乳腺癌中HDC4基因蛋白的表达及其临床病理学意义。方法：实验共选取91例乳腺组织的存档蜡块标本,其中包括46例乳腺癌、26例导管内原位癌（DCIS）以及19例正常宫颈上皮组织。应用免疫组织化学（SP法）检测HDC4蛋白在上述组织中的表达,并分析其蛋白检测的临床病理学意义。结果：与正常乳腺组织（15.8%,3/19）相比,HDC4蛋白在DCIS和乳腺癌组织中表达率明显增高,分别达46.2%(12/26)和71.7%(33/46),强阳性表达率在DCIS和乳腺癌组织中分别达19.2%（5/26）和45.6%（21/46）,也明显高于正常乳腺组织,差异显著（p<0.01）。结论：HDC4蛋白表达可作为女性乳腺癌及原位癌DCIS的病理辅助诊断指标之一,可能有助于乳腺癌的诊断及预后评估。 相似文献