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相似文献
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1.
绿色荧光蛋白(GFP)是源于海洋生物多管水母体内的一种发光蛋白,这种蛋白结构很特殊,在蓝光或紫外光激发下可以发射绿色荧光。适合用作普通的报告标记,尤其适合于活体细胞或组织。GFP基因能在活细胞内稳定表达,被广泛应用于现代生物学的各个领域。  相似文献   

2.
《中国科技信息》2010,(12):10-14
<正>蚕豆萎蔫病毒2号VP37蛋白在BY-2细胞内的定位 Localization of Broad bean wilt virus 2 VP37 protein in BY-2 suspension cells 摘要将绿色荧光蛋白(GFP)连接于蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2,BBWV-2)VP37蛋白的N-端,构建融合基因GFP-VP37,用农杆菌法在BY-2悬浮细胞内进行表达,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的分布.结果显示:  相似文献   

3.
为了探讨以MPG1基因作为启动子能否驱动GFP基因在大丽轮枝菌中表达,采用根癌农杆菌介导的真菌遗传转化方法,将含有MPG1-eGFP表达盒的pHMG载体转化入棉花大丽轮枝菌T-9中。经抗生素筛选后转化子约80个/106孢子,荧光显微镜观察转化子菌株孢子和菌丝在荧光显微镜下均发出绿色荧光,基因组DNA-PCR检测、GFP蛋白westernblot检测表明,GFP蛋白在大丽轮枝菌转化子中成功表达。结果表明,MPG1基因作为启动子成功驱动GFP基因在大丽轮枝菌中转录表达。  相似文献   

4.
《科技新时代》2010,(9):46-46
最近，研究人员在澳大利亚的豪勋爵岛附近发现了大量荧光珊瑚，从这些珊瑚中提取的被称为EosFP的荧光蛋白有助于研究人员更好地研究癌细胞。从珊瑚虫中提取的EosFP可以融合在目的蛋白上，并且在活体癌细胞中表达，形成蛋白标记。之后，使用特定波长的激光照射细胞中的一些区域，这些蛋白标记就会发光。这使得在显微镜下研究活体癌细胞内的动态过程、观察它们的机理、研究癌细胞与健康细胞的不同之处成为可能。“这些荧光分子正在改变细胞科学和生物医学的研究方式。”参与研究的Anya Salih说。  相似文献   

5.
据美国《连线》杂志报道,凭借在绿色荧光蛋白质（GFP）研究领域取得的重要成就,3位科学家获得了今年的诺贝尔化学奖,他们分别是马丁&#183;查尔菲、钱永健和下村修。绿色荧光蛋白质可以帮助科学家了解细胞机制如何工作。利用转基因技术,所有细胞和动物都可以产生荧光蛋白质。  相似文献   

6.
针对汰头废水分离蛋白质表面活性很差的特点,为提高分离蛋白表面活性,采用Alcalase碱性蛋白酶通过pH-stat法对控制分离蛋白的水解程度进行了研究,探讨水解程度对其结构和性能的影响。结果表明:随着水解度的变化,分离蛋白结构和性能变化显著。实验测得未经酶解的汰头废水分离蛋白荧光吸收峰为364 nm,粒径为5.17 nm,Zeta电位绝对值为21 mV,可溶性蛋白含量为1.36 mg·mL~(-1),起泡性仅为5%且稳定性很差,乳化性和乳化稳定性分别为13.48%和79.48%,游离氨基含量为0.15 mmol·L~(-1)。经Alcalase碱性蛋白酶处理后的分离蛋白,当水解度为3.85%时荧光吸收峰位置红移至366 nm,当水解度为1.79%时粒径最小,为3.19 nm,水解度在2.68%时Zeta电位绝对值增大至32.9 mV,当水解度为3.85%时可溶性蛋白含量最高达到2.15 mg·mL~(-1);当水解度为3.85%起泡性能最好达到50.83%,泡沫稳定性则在水解度为5.37%达到最好值为68.5%;乳化性在水解度为3.85%时达到最大值118.70%,乳化稳定性则在水解度达到4.35%时达到最大值453.40%;当水解度在4.35%游离氨基含量最大为4.5 mmol·L~(-1)。研究结果为开发汰头废水利用提供了理论依据,为后续开发新型蛋白质基表面活性剂有研究提供参考价值。  相似文献   

7.
吕毅  商澎 《科技通报》2019,35(8):59-63
微管结合蛋白对微管蛋白的结构及功能至关重要。为能较全面地揭示拟南芥微管结合蛋白MAP70-4的结构和功能,利用生物信息学方法对该蛋白的理化性质、亲水/疏水性,信号肽,跨膜区域,磷酸化位点,卷曲螺旋结构,蛋白质二级、三级结构,亚细胞定位,表达模式,分子功能及其参与的生物学功能,以及与其它蛋白的相互作用关系进行了预测分析。结果显示,拟南芥MAP70-4蛋白是一种无信号肽,不含跨膜螺旋区域的不稳定蛋白质,属于碱性、亲水性蛋白质,翻译后会产生磷酸化修饰,该蛋白二级结构含有11个α螺旋区和5个β折叠,以及7个卷曲螺旋结构。亚细胞定位显示该蛋白主要分布在细胞质中,具有促进微管结合等功能,和其有相互作用关系的蛋白可能与叶绿体生命活动及胚胎、种子发育有关。从表达模式上看,该蛋白主要在花、果实、叶片中大量表达,根中有少量表达。通过对拟南芥微管结合蛋白MAP70-4进行系统性预测分析,可为下一步对该蛋白功能的深入研究提供理论基础和借鉴。  相似文献   

8.
目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达.  相似文献   

9.
许健  牟一平  樊拥军  许斌  吴晓莉  周云凯 《科技通报》2009,25(4):445-450,455
目的:构建真核表达IL-18-GPI融合基因的表达载体,观察融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达动力学及生物学活性,为进一步研究细胞因子作为免疫增强剂在临床肿瘤治疗中的应用奠定基础.方法:通过RT-PCR的方法从脂多糖刺激的外周血淋巴细胞中钓取IL-18基因,通过共用限制性酶切位点与GPI相连形成pcDNA-IL-18-GPI真核表达质粒.将质粒转染CHO细胞后建立稳定表达融合蛋白的细胞株用于融合蛋白的提取.对提取纯化的蛋白进行生物学特性、蛋白质转移分析和γ-IFN诱导实验.结果:获得714 bp的核酸序列并构建重组质粒pcDNA-IL-18-GPI.SDS-PAGE和West-blot显示在CHO细胞中表达的IL-18-GPI融合蛋白分子量约为27.5 kD,该蛋白具有明显的蛋白转移和诱生γ-IFN的作用.结论:IL-18-GPI融合蛋白是一种潜在的肿瘤疫苗增强剂,具有良好的应用前景.  相似文献   

10.
背景与目的：探讨人骨髓间充质干细胞（human mesenchymal stem cells.hMSCs）在体内向神经细胞分化的可能性,材料与方法：将标记绿色荧光蛋白的人骨髓间充质干细胞植入到新生3d的小鼠侧脑室中,分别于移植后0d,9d和14d处死受体鼠,取其脑组织,4％多聚甲醛固定后行冠状面冰冻切片,荧光显微镜下观察hMSCs的植入,激光共聚焦显微镜检测植入细胞神经特异性蛋白的表达,定位双重标记的植入细胞,结果：受体小鼠脑中均可检出植入的细胞,此类细胞表达神经元细胞特异的微管相关蛋β-Ⅲ-Tubulin（Tuj1）,微管相关蛋白2（MAP2）,一些细胞表达神经胶质细胞特异的胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）,结论：hMSCs植入后受到脑组织特定微环境的影响,在体内可以向神经细胞分化并参与到发育的神经系统中。  相似文献   

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