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家蚕丝胶蛋白基因1(ser-1)启动子的克隆及其活性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
家蚕ser-1基因是中部丝腺中特异表达组织特异性基因。为研究家蚕ser-1基因在时空上的调控机制,用PCR的方法克隆了家蚕ser-1基因启动子并进行序列分析,进一步构建了由ser-1基因启动子驱动报告基因DsRed的新型表达质粒pSK-ser-DsRed-PolyA,并通过蚕体和家蚕BmN细胞进行了瞬时表达。结果显示,家蚕ser-1基因启动子的TATA框的保守序列为TATAAAA,位于-24～-30处,CAAT框位于-112～-115处;ser-1基因启动子可以驱动红色荧光基因DsRed在家蚕幼虫的中部丝腺组织和培养的BmN细胞中瞬时表达。 相似文献
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绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)最初是从维多利亚多管水母(Aequoria victoria)中发现的发光蛋白[1].天然GFP的生色团由65-67位SerTyr-Gly的氨基酸残基组成,并经环化和脱氢形成一个咪唑环[2].其最大激发峰为395 nm,在475 nm处有一副激发峰,最大发射峰位于510 nm.gfp作为一种新型的报告基因具有许多优越性:首先它分子量较小,只编码238个氨基酸的多肽,对细胞没有毒性,不干扰标记蛋白的功能和定位.其分子结构及光谱特性稳定,能在多种条件下研究.在多数情况下,GFP的异源表达并不影响细胞的正常活动,另外,GFP是目前唯一能在异源细胞内表达并自发产生荧光的蛋白,由于不需要辅助因子的参与,故可直接用于活体测定.可以说,GFP是当前研究活体细胞中基因表达和蛋白质分布的最好手段之一,具有广阔的应用前景.自从1994年Chalfie等首次在大肠杆菌和线虫中表达gfp[3]以来,迄今为止,GFP已在多种生物,如细菌、蓝细菌、粘菌、酵母、植物和哺乳动物中表达和应用.GFP的这一种属不依赖的特性使其成为广泛运用的荧光标记分子,尤其适用于监测基因表达和活体内蛋白质定位等研究. 相似文献
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莱茵衣藻素有"光合酵母"之称,是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物.但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因,莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段.通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体,即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A RBCS2序列为启动子的pH105,分别将增强型绿色荧光蛋白基因(egfp)插入两个表达载体中,得到p105G124和pH105G124转化载体.然后通过"珠磨法"转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻cc-849,并得到两种类别的转基因藻Tran-Ⅰ和Tran-Ⅱ.在光诱导和热激诱导条件下,两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白.通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平,结果显示pH105可使egfp基因的转化效率提高8倍;HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍,40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍.以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的莱茵衣藻外源基因表达载体,这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础. 相似文献
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目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达. 相似文献
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莱茵衣藻素有“光合酵母”之称，是目前少数三套基因组均能进行遗传转化的生物。但由于莱茵衣藻细胞中存在复杂的表达调控体系、密码子偏爱等原因，莱茵衣藻的外源基因表达体系目前还处于探索阶段。通过构建两个莱茵衣藻外源基因表达载体，即以RBCS2序列为启动子的p105和以HSP70A-RBCS2序列为启动子的pHl05，分别将增强型绿色荧光蛋白基因（egfp）插入两个表达载体中，得到p105G124和pH105G124转化载体。然后通过“珠磨法”转化细胞壁缺陷的莱茵衣藻CC-849，并得到两种类别的转基因藻TranⅠ和TranⅡ。在光诱导和热激诱导条件下，两种类型的转基因藻均能稳定表达绿色荧光蛋白。通过实验比较二者的转化效率和蛋白表达水平，结果显示pH105可使eg和基因的转化效率提高8倍；HSP70A-RBCS2启动子至少使绿色荧光蛋白的表达水平提高了2倍，40℃热激后绿色荧光蛋白的表达量再提高约3倍。以上结果表明获得的pH105是一个高效、可诱导的菜茵衣藻外源基因表达载体，这为利用莱茵衣藻高效表达外源基因和开发生物反应器奠定基础。 相似文献
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绿色荧光蛋白(GFP)是源于海洋生物多管水母体内的一种发光蛋白,这种蛋白结构很特殊,在蓝光或紫外光激发下可以发射绿色荧光。适合用作普通的报告标记,尤其适合于活体细胞或组织。GFP基因能在活细胞内稳定表达,被广泛应用于现代生物学的各个领域。 相似文献
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本试验用VP1基因C末端与表达载体连接,转化到大肠杆菌中,经IPTG诱导表达,收集不同时间段的菌液进行SDS-PAGE,结果表明重组的VP1基因C末端蛋白在大肠杆菌中能高效表达,表达的目的蛋白分子量约为16kd,而且重组菌诱导裂解物可在16kd处看到一条特异的蛋白条带,与预期大小一致,阴性对照未出现表达条带,而且重组菌在IPTG终浓度为1mmoL/L诱导6 h时表达量最大。表达产物主要以包涵体的形式存在,提取和裂解包涵体后,进一步纯化表达的目的蛋白,可获得纯度达70%以上的目的蛋白。 相似文献
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《中国科学院院刊(英文版)》2006,20(3)
ACAS-Max Planck Junior Research Group headed by WANG Wen, vice director of the CAS Kunming Institute of Zoology (KIZ), recently identified a young gene specific to man clorf37-dup. Their work was published on the June 1 issue of Human Molecu- lar Genetics… 相似文献
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本文提出一种基于DNA存储、RNA转录模型下的密钥识别管理方法,传输机制采用量子通信机制,模型构想为采用密钥胞、密钥核构造结构机理存储密钥。密钥识别基于分子识别原理,利用分子接触时会产生分子间力的作用模型抽象成信息传递、信号接触后产生识别作用力来验证信源身份,进而产生密钥胞内部反应机制,将存储在密钥核的密钥序转录成密钥传送到密钥胞发送口,再传递给通过身份验证的信源。 相似文献
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《中国科学院院刊(英文版)》2003,17(2):69-70
A group of Chinese plant ge-neticists recently succeededin ferreting out a functionalgene responsible for rice tillering,demystifying a long-standing puzzlein crop growth.Tillering is a special branchingprocess in a cereal crops earlygrowth in which numerous shootsput forth almost at the same timefrom the main stem. The crop yield,when harvested afterwards, is al-ways hinged on the number of thesprouting shoots. So the process be-comes an agronomic trait of vital im-portance in the production … 相似文献
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The human chimpanzee genomes vary by just . percent yet there is a substantial difference in the mental linguistic capabilities between the two species.…… 《中国科学院院刊(英文版)》2007,21(3):139
The human and chimpanzee genomes vary by just 1.2 percent, yet there is a substantial difference in the mental and linguistic capabilities between the two species. 相似文献
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基因的专利问题主要是可专利性及专利性问题。在我国,基因可作为化学物质申请专利,只是在审查上应该对实用性有更高的要求。基因专利的基础就是基因资源,结合我国新修订的专利法及人类遗传资源管理暂行办法探讨基因资源的利益共享和法律保护问题。 相似文献
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Naoki Mantani Hiroshi Oka Takashi Watanabe Kyohei Miyakawa Yoko Kimura 《Indian journal of clinical biochemistry : IJCB》2021,36(3):375
HLA association with drug-induced liver injury has recently been pointed out about multiple medicines. The aim of this study was to evaluate relationship between HLA gene and liver injury related to Baikal skullcap-containing Kampo medicines (BSCK). We previously examined HLA genes in 3 cases of BSCK-induced liver injury. Recently we could encounter 2 cases diagnosed as “definitely-related case” of BSCK-induced liver injury. HLA genes of the 2 cases were analyzed by Sequencing Based Typing method with Next Generation Sequencer at HLA Laboratory in Kyoto. HLA-DPA1*02:02:02 and DPB1*05:01:01 were observed in the 2 cases: concordance was not observed in HLA-A, B, C, DRB1, DRB4, DQA1, or DQB1. The previous 3 cases of BSCK-induced liver injury had the same allele type to the 2 cases only in HLA-DPA1. Putting all these together, HLA-DPA1*02:02:02 was observed in common among 5 cases of BSCK-induced liver injury. HLA-DPA1*02:02:02 is possibly associated with BSCK-induced liver injury. 相似文献
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基因书写欠规范一直是生物医学科技期刊存在的一个问题.本文从生物信息学技术在编辑工作中的应用角度,介绍美国国立医学图书馆的Entrez Gene数据库,并将其应用于科技期刊基因书写的规范中. 相似文献