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1.
通过醛化法将膝沟藻毒素(GTX2,3)分别与血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)偶联制备完全抗原,高效液相色谱法(HPLC)检测醛化反应前后游离GTX2,3的浓度,完全抗原免疫Balb/C小鼠,间接酶免疫吸附试验检测免疫后血清中抗体效价。GTX2,3与KLH及BSA偶联反应前溶液中毒素的浓度分别为760μg·mL-1和660μg·mL-1,偶联反应后毒素的浓度分别为191μg·mL-1及256μg·mL-1,Balb/C小鼠经过5次免疫后血清的效价为1：500。结果表明,反应后游离的GTX2,3的浓度降低,制备的GTX2,3完全抗原免疫小鼠后小鼠产生抗GTX2,3抗体,说明GTX2,3与载体蛋白发生偶联反应,偶联物具有免疫原性。 相似文献
2.
目的：制备并鉴定破伤风类毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,为破伤风的快速检测及致病机制的研究提供实验材料。方法：用破伤风类毒素做抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得分泌高滴度针对破伤风类毒素的杂交瘤细胞株,测定单抗免疫球蛋白亚类及单抗效价,用间接ELISA和Western-blot检测单克隆细胞株的特异性。结果：通过细胞融合和克隆化,筛选出3株持续分泌抗破伤风类毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E12、1E11、1G10。间接ELISA和Western-blot检测结果表明1E12、1E11、1G10可以和破伤风类毒素发生特异性反应。结论：成功制备了抗破伤风类毒素单克隆抗体,为制备免疫诊断试剂盒和抗体药物的开发奠定了基础。 相似文献
3.
制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1:32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。 相似文献
4.
笔者用制各卵黄抗体的方法制备新城疫（ND）卵白抗体，与印黄抗体比较，HI效价高1个清度。保护试验保护事为100％，对发生ND的85640只病鸡进行治疗试验，其保护率达93.6％． 相似文献
5.
为进一步研究延长因子-1（elongationfactor-1α,E-1α）在调控心脏发育和果蝇心脏功能中发挥的作用,制备延长因子-1的抗体．利用生物信息学选择果蝇EF-1α基因抗原亲水区,并设计出特异性引物,PCR扩增出的片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E．coli中后通过IPTG诱导融合蛋白表达,将His—EF-1α融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,再用WesternBlot检测抗体的效价和特异性．研究结果表明,获得了EF-1α原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗EF-1α多克隆抗体．EF-1α多克隆抗体的效价可以达到1比1500,并且有很强的特异性,为后续研究EF-1α基因在心脏发育和心脏功能中的作用奠定了基础． 相似文献
6.
观察不同浓度的党参粗提物对青脚麻鸡血清中新城疫(ND)及传染性法氏囊炎(IBD)抗体效价的影响。400只1日龄青脚麻鸡随机均分4组,Ⅰ～Ⅳ组分别在饮水中添加0 g/L、0.5 g/L、1 g/L和2g/L的党参粗提物,14日龄开始给药,连续饮用6周,正常鸡新城疫和传染性法氏囊免疫。每周末各组随机抽样8只,心脏采血,分离血清,用微量血凝抑制实验(HI)测定ND抗体效价,琼脂扩散实验测定IBD抗体效价。结果表明,血清ND-HI抗体效价自28日龄起,IBD琼扩效价自35日龄起,党参各组较对照组均高出1～2个滴度以上,说明添加党参粗提物能够提高青脚麻鸡血清中ND-HI和IBD的抗体效价,其中中剂量药效为佳。 相似文献
7.
抗原与免疫血清的制备 总被引：2，自引：0，他引：2
免疫血清的制备是一项常用的免疫学技术,高效价,高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。文章主要介绍免疫血清的制备方法;免疫血清的质量评价;不能获得满意的免疫血清的可能原因及解决办法等。 相似文献
8.
陈永富 《浙江农村技术师范专科学校学报》2008,21(2):78-80
试验研究以猪胸腺淋巴细胞为完全抗原,采用一定的免疫程序致敏兔,刺激兔产生抗猪胸腺淋巴细胞的特异性抗体,在30天后分离血清,免疫效价达到1：640,证明兔血清含有该特异抗体,免疫程序合理,抗体效价确实． 相似文献
9.
按常规方法制备抗鸡传染性法氏囊炎卵黄抗体（ｙｏｌｋａｎｔｉｂｏｄｙ，ＹＡ），经冻融、温度、机械振荡、光照和防后剂（０．０１％流柳汞、０．０１％叠氮钠和０．５％苯酚）等处理后测定其琼脂扩散试验（Ａｇａｒｇｅｌｎｒｅｄｒｉｔａｔｉｏｎ，ＡＧＰ）效价的变化．实验结果表明，冻融毛次后卵黄抗体的ＡＧＰ效价自１：６４降至１：３２，冻融６次降至１：１６，０．５％苯酚的存在使ＹＡ的ＡＧＰ效价自１：６４降至１：１６；其它物理因素对ＹＡ的ＡＧＰ效价影响不明显． 相似文献
10.
《安徽科技学院学报》1990,(2)
本文研究了衣阿华大学白来航鸡S_1品系的免疫活性。该品系已根据红血球抗原B(Ea—B)等位基因(B~1B~1或B~(19)B~(19))、对谷—丙—酪氨酸(GAT)的抗体应答(强、或弱)以及对罗斯肉瘤病毒诱发肿瘤的反应(促进或抑制)分成了8个亚系。对巴氏多杀杆菌(PM)、鸡败血枝原体(MG)和传染性法氏囊病病毒疫苗的抗体应答通过酶标记法评价,对吞噬细胞活性和T细胞调节反应分别通过碳清除法和植物凝集素(PHA)注射法测量。 在三种测量中均观察到显著的单倍型(亚系)差异和种公鸡家系差异。在吞噬细胞活性和T细胞调节反应中观察到显著的性别差异。对GAT有强抗体应答的单倍型,其PM和MG疫苗的抗体效价显著高于对GAT抗体应答弱的亚系。在两种染苗的抗体水平之间观察到显著的正相关。在母鸡中观察到吞噬细胞活性和T细胞调节反应之间显著的负相关。资料表明,要选择最佳的免疫应答,必须全面地考虑个体免疫活性的各个方面。 相似文献
11.
以烟草花叶病毒（TMv）为例研究了制备植物病毒抗血清的一般方法．以家兔和小白鼠为免疫动物，运用饱和硫酸接沉淀法制备出高效价的兔和瓦抗TMV血清，并运用先进的ELISA方法测定了抗血清中抗体IgG的效价；用醋酸纤维凝胶电泳技术分析了抗血清中抗体的lgG纯度，应用免疫双扩散法检测了提纯的IgG的生物活性．同时还运用成二醛一步法制出高结合率的IgG与过氧化氢酶（HRP）标记的抗体，形成了一整套制备抗血清、纯化IgG并对IgG进行酶标的技术，为植物病毒检测提供了快速简便的方法． 相似文献
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高原和低氧训练被认为对于运动员机能状况和运动能力的提高有一定的效果,已有研究表明[1],低氧暴露和高原训练可对免疫功能产生抑制作用.实验以雄性SD大鼠为实验对象,以符合跑台训练方式建立低氧训练模型.实验结果表明:服用贞芪扶正胶囊的大鼠体重及脾重含量明显高于其对照组(P0.05),说明服用贞芪扶正胶囊可以使血液中淋巴蛋白增高,阻止了机体防止免疫球蛋白分解,从而使防御性抗体形成. 相似文献
14.
采用人工感染兔瘟 (兔出血热 )病毒致死兔的肝组织 ,制成 1 0 %的兔瘟组织灭活苗和1 0 %的兔瘟蜂胶组织灭活苗 ,研究蜂胶对兔瘟组织灭活苗免疫效果的影响。用常规血凝抑制试验检测比较了注射兔瘟组织灭活苗和兔瘟蜂胶组织灭活苗后 ,兔体内抗体水平的消长情况 ;结果表明组织灭活苗免疫后第 1 0d效价为 2 .75log2 ,2 0d抗体水平达到 6.2 5log2 ,30d又降为5 .2 5log2。而兔瘟蜂胶组织灭活疫苗第 1 0d效价为 4.0 0log2 ,2 0d抗体水平已达 8.2 5log2 ,30d抗体水平高达 1 1 .0 0log2。说明兔瘟蜂胶组织灭活苗能明显提高抗体效价 ,增强免疫效果。 相似文献
15.
《河南职业技术师范学院学报(职业教育版)》2021,(1)
制备并鉴定针对重金属镉离子的小鼠多克隆抗体.选取异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)做金属螯合剂,偶联Cd~(2+)及载体蛋白BSA、OVA,制备人工抗原并鉴定,配合佐剂乳化后以高、中、低剂量分别免疫Balb/C小鼠,以获得较好的抗重金属镉离子小鼠多克隆抗体血清.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定所获抗体的效价、敏感度、特异性.结果显示:小鼠抗血清效价均在10~(-3)～10~(-4),中剂量抗原免疫组小鼠抗体血清更加稳定、特异性强,利用该组多抗建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线,M-3号小鼠敏感性最强,回归方程为y=0.1123x-0.1638,IC_(50)质量浓度为368.70μg/L,检测限质量浓度为25.53μg/L,该抗体除与汞离子螯合物的交叉反应率为72.58%之外,与Cu~(2+)、Zn~(2+)、Pb~(2+)、Cr~(3+)、Mo~(6+)、Fe~(3+)、Co~(2+)均无交叉反应.获得了能用于镉离子免疫检测的高效价Cd~(2+)多抗,为检测产品的开发打下基础. 相似文献
16.
采用琥珀酸酐法将氯睾酮(CLO)衍生化,再用碳二亚胺法(EDC)将氯睾酮的半抗原与BSA和OVA偶联,制备免疫原和检测抗原,紫外扫描和红外光谱鉴定表明人工抗原合成成功,CLO与BSA偶联比为16.5∶1.利用CLO-BSA免疫Balb/C小鼠制备多克隆抗血清,间接ELISA结果表明:3只小鼠抗体效价分别为1.6×104、3.2×104和1.6×104;间接竞争ELISA检测2号鼠抗血清的灵敏度为64 ng/mL.氯睾酮人工抗原的合成为开发ELISA试剂盒检测食源性动物产品中CLO残留奠定基础. 相似文献
17.
建立了一种新的纳米金增强伏安免疫分析方法.以人免疫球蛋白G（HIgG）为模型,羊抗人免疫球蛋白G（GAH IgG）固定于电极表面构成免疫传感器界面.固定化抗体与分析目标物HIgG发生免疫反应而将HIgG捕获,再通过夹心法将纳米金标记的GAH IgG结合于电极界面.通过金增强过程可在纳米金上进一步沉积金形成直径较大的纳米金颗粒,使电极表观面积大大增加,进而显著改善电极表面的电极表面吸附电化学行为,故用循环伏安法或差示脉冲法测定的金增强前后吸附伏安电流变化值可实现界面结合的金纳米探针的含量,从而间接实现分析目标物HIgG的测定.其线性范围为50 ng/mL~1μg/mL,检测限为20 ng/mL.实验表明该法灵敏度高,选择性好,实现简便,可望成为一种新型有潜力的高灵敏免疫传感技术. 相似文献
18.
将抗人IgG溶液直接分散于含有十八胺(ODA)的亚相上制备抗人-脂类LB生物膜.通过实验结果得到最佳实验条件.将抗体一脂类膜作为选择元件,用石英晶体微天平(QCM)作为转换器制成免疫生物传感器.此传感器对人IgG的检测响应范围是200 ng cm-3～1200 ng cm-3.由于此方法用抗体量少且操作简单,可为制备经济方便的免疫传感器提供可能. 相似文献
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目的:探讨啤酒酵母菌对白色念珠菌感染的影响作用及机制.方法:用啤酒酵母免疫家兔后,经家兔耳的皮下注射白色念珠菌,建立播散性念珠菌病动物感染模型,观察啤酒酵母菌免疫组和对照组家兔的感染状况;通过测定抗体效价和巨噬细胞吞噬功能,了解啤酒酵母的免疫效果.结果:观察显示:①免疫组兔耳皮下注射区红肿面积明显小于对照组;②肾脏充血及肿胀程度免疫组小于对照组,同时,对照组肾脏出现肉眼可见的脓肿灶;③病理诊断显示,免疫组炎性细胞浸润范围小;④免疫组抗体效价明显高于对照组,吞噬百分率与吞噬指数,免疫组与对照组有明显差异(P<0.01).结论:啤酒酵母能够提高机体免疫功能,减轻白色念珠菌的局部感染及全身感染. 相似文献