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相似文献
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1.
采用琥珀酸酐法将氯睾酮(CLO)衍生化,再用碳二亚胺法(EDC)将氯睾酮的半抗原与BSA和OVA偶联,制备免疫原和检测抗原,紫外扫描和红外光谱鉴定表明人工抗原合成成功,CLO与BSA偶联比为16.5∶1.利用CLO-BSA免疫Balb/C小鼠制备多克隆抗血清,间接ELISA结果表明:3只小鼠抗体效价分别为1.6×104、3.2×104和1.6×104;间接竞争ELISA检测2号鼠抗血清的灵敏度为64 ng/mL.氯睾酮人工抗原的合成为开发ELISA试剂盒检测食源性动物产品中CLO残留奠定基础.  相似文献   

2.
以黄麻纤维为吸附剂,对水溶液中痕量Cd~(2+)离子的吸附性能进行了研究。采用扫描电镜对黄麻纤维的微观结构进行了观察,单根纤维的直径约50~100μm,纤维内部有很多直径约为数μm的孔道。考察了水溶液的初始p H值、吸附剂与Cd~(2+)离子溶液的接触时间对吸附效率的影响。结果表明,接触时间120 min、溶液的初始p H值为7~8,黄麻纤维对Cd~(2+)离子具有最佳的吸附效率。采用Langmuir和Freundlich等温吸附模型对黄麻纤维等温平衡吸附Cd~(2+)离子的实验数据进行了拟合,发现Langmuir模型很好地描述了黄麻纤维对Cd~(2+)离子的吸附行为(R2≥0.993),吸附属于单分子层吸附,平衡吸附量为4.62 mg/g。吸附Cd~(2+)离子前后的FTIR分析表明,羧基是黄麻纤维吸附Cd~(2+)离子的主要作用位点,在实验条件下,仍然存在没有被Cd~(2+)离子配位的自由羧基。  相似文献   

3.
通过醛化法将膝沟藻毒素(GTX2,3)分别与血蓝蛋白(KLH)、牛血清白蛋白(BSA)偶联制备完全抗原,高效液相色谱法(HPLC)检测醛化反应前后游离GTX2,3的浓度,完全抗原免疫Balb/C小鼠,间接酶免疫吸附试验检测免疫后血清中抗体效价。GTX2,3与KLH及BSA偶联反应前溶液中毒素的浓度分别为760μg·mL-1和660μg·mL-1,偶联反应后毒素的浓度分别为191μg·mL-1及256μg·mL-1,Balb/C小鼠经过5次免疫后血清的效价为1:500。结果表明,反应后游离的GTX2,3的浓度降低,制备的GTX2,3完全抗原免疫小鼠后小鼠产生抗GTX2,3抗体,说明GTX2,3与载体蛋白发生偶联反应,偶联物具有免疫原性。  相似文献   

4.
巴夫金藻耐受Cu~(2+)、Cd~(2+)毒害作用的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
[目的]研究单胞藻对重金属离子毒害的耐受性,为生物去污提供依据。[方法]分别用不同浓度(c=1~150mg/L)Cu~(2+)、Cd~(2+)处理巴夫金藻(Monochrysis lutheri),观察了重金属离子对其生长的影响;用微量减压法研究毒害抑制呼吸作用;用ICP法研究毒害抑制下重金属离子的富集。[结果]①2种离子的毒性强度的顺序为Cu~(2+)>Cd~(2+);②Cu~(2+)对生长的抑制较强,其EC_(50)(72h)为15.0mg/L;Cd~(2+)对生长的抑制较弱,其EC_(50)(72h)为75mg/L;③在EC_(50)毒害浓度下,毒害组均提前进入生长静止期,缩短了种群生长周期;呼吸作用先增强后降低;④在EC_(50)毒害浓度下,单胞藻对Cu~(2+)的富集量为6866.1mg·kg~(-1),对Cd~(2+)的富集量678.25mg·kg~(-1)。[结论]巴夫金藻具有较强的耐受重金属离子毒害能力,耐受顺序为Cd~(2+)相似文献   

5.
为了对囊尾蚴病的免疫诊断提供有价值的单克隆抗体(McAb),我们应用杂交瘤技术通过对骨髓瘤细胞SP2/0与用猪囊尾蚴尿素溶性抗原免疫的BALB/C小鼠脾细胞融合试验及反复筛选和多次克隆化,获得了两株分泌抗猪囊尾蚴抗原的McAb杂交瘤细胞株2D_6、4F_(12)。其分泌的抗体具有很强的种的特异性,与包虫囊液抗原及肥颈绦虫囊尾蚴抗原均不发生交叉反应。免疫球蛋白亚类鉴定表明所获2株均属IgG。  相似文献   

6.
《湘南学院学报》2021,(5):13-17
用蒜氨酸、蒜氨酸与卵清蛋白偶联物免疫动物实验探讨蒜氨酸免疫原性.蒜氨酸抗原、蒜氨酸与卵清蛋白偶联抗原,常规免疫小鼠;用蒜氨酸包被"O"型人红细胞进行玻片与微量稀释法间接血凝试验检测蒜氨酸抗体;用蒜氨酸抗原片和蒜氨酸组织切片进行免疫荧光试验鉴定蒜氨酸抗体.研究结果表明,蒜氨酸免疫小鼠,没有产生蒜氨酸抗体;蒜氨酸与卵清蛋白偶联抗原免疫小鼠,获得蒜氨酸抗体,间接血凝效价达到1∶32;免疫荧光结果与蒜氨酸体内分布特点相符,蒜氨酸为半抗原物质.  相似文献   

7.
为进一步提高污染场地控制与修复实验课的教学效果,从实验装置、实验条件对重金属在含水层的迁移实验进行了方案设计。实验采用自主设计的二维有机玻璃模拟槽作为实验装置,以硝酸镉为目标污染物,利用原子吸收分光光度计进行定量测定。优化后的实验结果显示:(1)Cd~(2+)在地下水中的迁移锋面随着污染泄露时间延长在垂向和纵向上不断推进;(2)切断污染源后,7号取样口Cd~(2+)浓度逐渐下降,11号取样口Cd~(2+)浓度短暂上升后,逐渐下降;(3)地下水流速较快,Cd~(2+)在纵向的迁移速度大于垂向,对流作用明显;流速较慢时,Cd~(2+)在纵向的迁移速度小于垂向的迁移速度,弥散作用显著。  相似文献   

8.
目的:制备并鉴定破伤风类毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,为破伤风的快速检测及致病机制的研究提供实验材料。方法:用破伤风类毒素做抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得分泌高滴度针对破伤风类毒素的杂交瘤细胞株,测定单抗免疫球蛋白亚类及单抗效价,用间接ELISA和Western-blot检测单克隆细胞株的特异性。结果:通过细胞融合和克隆化,筛选出3株持续分泌抗破伤风类毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E12、1E11、1G10。间接ELISA和Western-blot检测结果表明1E12、1E11、1G10可以和破伤风类毒素发生特异性反应。结论:成功制备了抗破伤风类毒素单克隆抗体,为制备免疫诊断试剂盒和抗体药物的开发奠定了基础。  相似文献   

9.
目的:原核表达并纯化大型溞胆碱酯酶(ChE),制备鼠抗大型溞ChE多克隆抗体,并对抗体的适用性进行研究。创新点:首次通过原核表达获得了大型溞重组ChE蛋白,通过免疫小鼠获得了高效价、高特异性的多克隆抗体,通过样品检测证明了抗体的适用性。方法:利用聚合酶链式反应(PCR)技术获得大型溞ChE基因编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体p ET-29a(+),构建重组表达质粒p ET-ChE,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达;对表达产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和酶活性检测,并对蛋白进行纯化(图4);使用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体(图5),用酶联免疫吸附分析法(ELISA)对处于三唑磷和低温胁迫下以及经反复冻融处理的大型溞体内的ChE含量变化进行检测(图7、表6和7),以评价抗体的可适用性。结论:获得了高纯度的ChE重组蛋白;免疫小鼠后,获得了特异性强、高效价的抗体;通过对处于三唑磷和低温胁迫下以及经过反复冻融处理的大型溞体内的ChE含量的检测,证明了抗体的适用性。  相似文献   

10.
针对受Cd、Hg重金属污染的水体,研究了添加商业介孔SiO_2(MCM-41)对Cd~(2+)、Hg~(2+)的净化效果及其影响因素。模拟实验表明:适量的MCM-41对Cd~(2+)、Hg~(2+)具有良好的净化效果,特别是对于低Cd~(2+)、Hg~(2+)污染物浓度的水体,净化效率超过90%;而过量的MCM-41颗粒间易发生团聚现象影响吸附效率;降低水体温度、提高pH有利于提高MCM-41对Cd~(2+)、Hg~(2+)污染物的净化效率;吸附过程以物理吸附为主,吸附速率较快,净化体系短时间内即可达到吸附饱和,可作为填料应用于饮用水净化装置。  相似文献   

11.
制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1:32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。  相似文献   

12.
在以H2_S系统的定性分析中,常常会遇到Cu~(2+)与Cd~(2+)离子分离的问题。 目前,已有教学和实验资料介绍,通常采用氰化钾法,甘油碱法,保险粉法或利用调节酸度生成C_uS而Cd~(2+)不沉淀的方法。 其中,虽氰化钾分离效果好,但氰化钾剧毒,使用时既污染环境,又威胁人体的健康;而甘油碱法操作简单,但往往Cd(OH)_2沉淀表面吸附的C_u~(2+)离子不易洗净,使得C_u~(2+)  相似文献   

13.
为探索新乡市冬季大气颗粒物水溶性离子的粒径分布,用Anderson八级采样器于新乡医学院进行了为期20 d的采样.用差值法分析了8个粒径段大气颗粒物的质量浓度,用离子色谱对Cl~-、F~-、SO_4~(2-)、NO_3~-、K~+、Na~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、NH_4~+9种离子进行了分析.结果表明:(1)新乡市大气颗粒物的质量浓度主要在5.8~10.0μm和0.43~2.10μm处呈双峰分布,且细颗粒物的质量浓度高于粗颗粒物;(2)颗粒物中各离子的浓度由高到低依次为NO_3~、SO_4~(2-)、NH_4~+、Ca~(2+)、Cl~-、K~+、F~-、Na~+、Mg~(2+);(3)PM9.0-10.0中Na~+、K~+和Mg~(2+)主要来自土壤扬尘,粗颗粒物中的Ca~(2+)和Mg~(2+)主要来自建筑尘,燃烧源是新乡市颗粒物水溶性离子的共同来源,NO_3~-/SO_4~(2-)指示新乡市二次生成颗粒物以汽车尾气污染为主.  相似文献   

14.
为进一步研究延长因子-1(elongationfactor-1α,E-1α)在调控心脏发育和果蝇心脏功能中发挥的作用,制备延长因子-1的抗体.利用生物信息学选择果蝇EF-1α基因抗原亲水区,并设计出特异性引物,PCR扩增出的片段克隆到原核表达pET-28a载体中,转入E.coli中后通过IPTG诱导融合蛋白表达,将His—EF-1α融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,再用WesternBlot检测抗体的效价和特异性.研究结果表明,获得了EF-1α原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗EF-1α多克隆抗体.EF-1α多克隆抗体的效价可以达到1比1500,并且有很强的特异性,为后续研究EF-1α基因在心脏发育和心脏功能中的作用奠定了基础.  相似文献   

15.
利用溶剂热法合成Er~(3+)/Yb~(3+)/Ce~(3+)共掺杂的K_2YF_5微晶.在980 nm红外激光激发下,微晶产生有效的可见上转换辐射及1.5μm近红外辐射.随着Ce~(3+)掺杂量的增加,上转换荧光逐渐减弱,而1.5μm红外光随Ce~(3+)掺杂浓度的增加先增加而后减弱,当Ce~(3+)掺杂浓度为4%时,1.5μm近红外辐射最强,约为不掺杂Ce~(3+)样品辐射强度的4倍.微晶发光性能的变化被归因于Er~(3+)、Ce~(3+)之间的能量交叉弛豫.结合掺杂离子的能级结构,对微晶的发光机理进行详细的讨论.  相似文献   

16.
本试验以偶氮法将克伦特罗连接到自身全血清和血红蛋白上制成佐剂苗分别免疫兔。免疫后用间接抑制ELISA、间接ELISA检测各组抗体特异性抗克伦特罗效价。结果表明,各组兔血清均含有抗克伦特罗的特异性抗体,显示自身全血清和血红蛋白能作载体,提示自身全血清因组分复杂作载体具有一定优越性。  相似文献   

17.
从野生型成体果蝇体内提取总RNA,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox-A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体,通过Western-Blot检测效价和特异性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.  相似文献   

18.
研究了溴化十六烷基吡啶存在下硫酸铵—碘化钾—结晶紫体系浮选分离铋的行为及其与常见离子分离的条件.结果表明,在O.5mL溴化十六烷基吡啶(10g/L)存在下,当固体(NH_4)_2SO_4、碘化钾溶液(0.1mol/L)和结晶紫溶液(0.001mol/L)的用量分别为1.0g、1.0mL、1. 0mL时,控制pH值为7.0,Bi~(3+)可被该体系浮选,而常见离子Zn~(2+)、Fe~(2+)、Co~(2+)、Ni~(2+)、Al~(3+)不被浮选,据此实现了Bi~(3+)与这些离子的定量分离,对合成水样进行了定量浮选分离测定,结果满意。  相似文献   

19.
目的:为蜂王浆主蛋白1(MRJP1)的快速检测和鉴别提供科学依据,为蜂王浆的质量控制提供技术支持。创新点:首次比较了MRJP1特异性多克隆抗体与MRJP1重组表达蛋白多克隆抗体对王浆主蛋白家族的免疫反应差异,验证了蜂王浆中MRJP1蛋白降解与保温时间的相关性,建立了以MRJP1作为蜂王浆新鲜度生物标志物的快速检测方法。方法:通过蜂王浆主蛋白家族蛋白的氨基酸序列同源性分析,筛选出MRJP1的特异性多肽区域,进行人工合成,免疫兔子后取血清制备成特异性多克隆抗体。用蛋白质印迹法(Western blot)检测了MRJP1特异性多克隆抗体与MRJP1重组表达蛋白多克隆抗体对王浆主蛋白家族的免疫反应。以新鲜蜂王浆为对照品,用MRJP1特异性抗体酶联接免疫吸附剂测定(ELISA)法和变性电泳胶灰度扫描法分别测定保温(40°C)7~49天的蜂王浆中MRJP1含量的变化,并进行了相关性分析。结论:MRJP1的特异性抗体对MRJP1蛋白具有专一的免疫识别特性,可特异性地检测代表蜂王浆新鲜度的MRJP1含量变化,并鉴别蜂王浆的真伪。  相似文献   

20.
通过化学修饰合成了噻虫嗪(thiamethoxam,TMX)人工半抗原,采用碳二亚胺法(EDC)将该抗原与牛血清蛋白和卵清蛋白偶联成功制备了分子结合比合理的免疫抗原(TMX-BSA)和包被抗原(TMX-OVA).对经TMX-BSA免疫的6周龄Balb/c实验鼠的免疫抗血清进行了间接ELISA和阻断ELISA,初步明确了抗噻虫嗪多克隆抗体(TMX-pAb)的免疫学特性,为噻虫嗪残留免疫学快速检测技术开发和检测产品研制奠定了坚实基础.  相似文献   

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