一株油微藻——小球藻的纯化鉴定与培养基的筛选     

梁颖  冯俊丽  徐方娇  陈集双 《科技通报》2013,29(3)

从南京工业大学生物与制药工程学院获得一株小球藻藻种,经划线培养数代后,得到分离纯化的小球藻,18S rDNA鉴定确定其种属为普通小球藻.小球藻的常见几种培养基筛选结果表明,BG11培养基最适合该小球藻的生长.用牛粪浸出液代替传统培养基培养小球藻的梯度对照实验中,发现牛粪浸出液培养小球藻的效果很好,且浓度越高,生长状况越好.同时还对小球藻的粗脂含量做了测定,每克小球藻干粉中粗脂的含量约为0.206 g,占小球藻干重的20％左右.本研究为新能源的开发和利用积累了信息.  相似文献   

转基因棉花中棉41多重PCR体系的建立     

徐方娇  冯俊丽  梁颖  陈集双 《科技通报》2013,29(3)

利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系.多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50 μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400 μM,BSA(10mg/mL)的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度.利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉花中棉41中的外源基因启动子CaMV 35S、终止子TNOS、报告基因NPTII和抗虫基因CrylAc.  相似文献   

蔺草基因组DNA提取条件的优化研究     

徐方娇  李礼君  顾朱益  茅瑶琼  王忠华 《科技通报》2010,26(4):523-530

以来自宁波高桥种质资源圃中的15个蔺草样品为材料,进行了基因组DNA提取条件的优化研究,结果表明：加入Proteinase K后,DNA的浓度普遍在600μg/mL以上,A260/A280值在1.8-2.0之间,浓度随加入量的增加呈递增状态,在加入量为6μL时提取效果最好。Proteinase K水浴温度与时间的条件优化试验中发现,最佳的水浴温度为65℃,水浴时间以30 min,离心条件在转速10,000 r/min,时间8 min时获得的DNA质量较好。加入RNase A后,A260/A280值在1.8-2.0之间,随加入量的增加纯度也增大,加入量以3μL为宜;RNase A水浴时间在10 min时A260/A280值普遍最接近1.8,浓度也较高。应用所获得的优化提取条件对宁波市高桥镇种植的15个蔺草样品进行提取DNA测试,电泳结果表明所有品种都出现了特异性DNA条带。由此,在进行蔺草实生苗基因组DNA提取时,建议采用如下条件：Proteinase K加入量6μL,水浴温度为65℃,时间为30 min;第一步DNA沉淀的离心转速为10,000r/min,离心时间为8 min。RNase A加入量3μL;RNase A水浴时间10 min。  相似文献