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De-qing HUANG Rui CHEN Ya-qin WANG Jian HONG Xue-ping ZHOU Jian-xiang WU 《Journal of Zhejiang University. Science. B》2019,(4):343-354
目的:制备一种检测水稻植物和传毒介体灰飞虱中水稻条纹病毒(RSV)的胶体金免疫层析试纸条,为水稻条纹叶枯病的田间调查和检测以及预测预警提供快速、实用的检测试剂。创新点:利用制备的RSV单克隆抗体,首次制备了能在5～10 min内快速、准确、灵敏、特异地检测水稻植物和灰飞虱体内RSV的胶体金免疫层析试纸条。方法:以差速离心方法提纯的RSV病毒粒子作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得了高度特异和灵敏的RSV单克隆抗体。采用柠檬酸钠还原氯金酸的方法制备胶体金并标记一个RSV单克隆抗体,另一个RSV单克隆抗体和羊抗鼠抗体分别包被到硝酸纤维素膜的检测线和质控线,将吸水滤纸制成的样品垫、RSV免疫胶体金垫、结合有RSV单抗和羊抗鼠抗体的硝酸纤维素膜和吸水纸依次粘贴到聚氯乙烯(PVC)胶板上研制检测水稻植物和传毒介体灰飞虱中RSV的胶体金免疫层析试纸条。对田间样品进行RSV检测,分析试纸条检测RSV的有效性。结论:利用杂交瘤技术获得了2株RSV单克隆抗体(16E6和11C1),胶体金标记16E6单克隆抗体包被在聚酯膜制成的结合垫上,以11C1单克隆抗体和羊抗鼠抗体分别包被到硝酸纤维素膜的检测线和质控线,制成能在5～10 min内快速、特异、灵敏、准确地检测田间水稻及单头灰飞虱样品中RSV的胶体金免疫层析试纸条。试纸条检测感染RSV的水稻植株和灰飞虱呈阳性反应,而检测健康水稻和感染其它5种常见水稻病毒的植株及其传毒介体呈阴性反应,且试纸条检测RSV感染水稻植物组织的灵敏度达到1:20 480倍稀释(w/v, g/mL),检测携带RSV单头灰飞虱的灵敏度达到1:2560倍稀释(单头灰飞虱/μL)。田间样品检测结果发现,试纸条检测结果与反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测结果一致,表明制备的试纸条可有效地用于田间RSV的检测,从而为水稻条纹叶枯病的诊断、监测预警、抗病育种、流行病学研究及科学防治提供技术和物质支撑。 相似文献
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胶体金标记免疫层析法测定尿绒毛膜促性腺激素(ＨＣＧ)已广泛应用于检查早孕及其它引起ＨＣＧ增高的疾病 ,具有简便、快速、准确性高、试剂稳定等优点 ,但在某些情况下 ,如葡萄胎、恶性葡萄胎等 ,尿中ＨＣＧ含量过高 ,则有时会产生假阴性结果。本文用博赛牌胶体金免疫层析试条测试一例葡萄胎患者尿液ＨＣＧ ,结果呈假阴性 ,报告如下。1 材料与方法1.1 尿标本来源于张家口医学院一附院一位葡萄胎患者 ,第一次尿标本为晨尿 ,ＨＣＧ用胶体金免疫层析法试纸条半定量为 2 5 0 ,0 0 0～ 5 0 0 ,0 0 0ＩＵ/Ｌ ,第二次尿标本为饮水后的随机尿 ,Ｈ… 相似文献
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为了建立一种适合基层现场的鸡白痢沙门氏菌(Salmonella pullorum)抗体检测方法,以S.pullorum的基因组为模板,利用PCR方法扩增inv A基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化inv A融合蛋白,Western-blot和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡Ig Y,并对金标抗体的质量浓度和p H值进行优化;在NC膜上分别包被inv A融合蛋白和鸡Ig Y作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性.用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性.结果表明:构建的inv A重组蛋白质粒在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western-blot和ELISA方法证实具有良好的反应原性.该试纸条最佳胶体金标记的p H值为7.6,抗体质量浓度为1.3 mg/m L,方法的灵敏性与平板凝集试验的灵敏性一致,与其他病原菌无交叉反应.对195份临床样本进行检测,其结果与平板凝集试验的符合率为96.43%.研究建立的S.pullorum胶体金免疫层析检测试纸条具有方便、快捷、安全和灵敏度高等优势,可用于S.pullorum抗体的早期检测和流行病学筛查. 相似文献
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目的:优化建立二联胶体金免疫层析试纸条,实现对玉米、面粉和饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同时快速定量检测。创新点:采用纳米金颗粒标记真菌毒素单克隆抗体,基于竞争反应模式,通过对金颗粒尺寸、免疫层析相关组成材料及缓冲液配方的系列优化,同时借助手持式信号读取装备,实现对谷物和饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的同时定量检测。该方法简单、快速且成本低,与液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)一致性良好,便于基层单位的推广使用。方法:采用柠檬酸钠还原法制备纳米金颗粒并标记获得金标抗体。通过在基于竞争反应的免疫层析检测体系中,同时设置两条检测线(T1、T2)以实现两种毒素的同时检测,最终采用金标信号读数仪实现定量检测。结论:制备的二联定量胶体金试纸条对赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的检测限分别为0.32和0.58 ng/ml(图5),在玉米、小麦和饲料样本中的加标回收率为77.3%～106.3%,且变异系数均小于15%(表2)。制备的二联定量胶体金免疫层析试纸条和LC-MS/MS对玉米、小麦和饲料等天然样本中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的定量检测结果相关性较好(表3和图7),具有较好的应用价值。 相似文献
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食品安全目前已经成为我国主要的社会热点问题之一,迫切需要准确和快速的食品内毒性成分的检测技术.检测试纸具有价格低廉、操作简便、灵敏快速等特点,适用于现场和基层化验室对食品内毒性成分的快速检测.本论文简介和评述了近些年国内报道的食品内毒性成分快速检测试纸的研究和应用进展. 相似文献
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林文生 《赤峰学院学报(自然科学版)》2015,(1):19
目的:为了发现项目间试剂污染造成检验结果的影响.方法:通过血糖和血清磷同时检测为一组,血清磷单独测定为一组,连续测定20次,结果进行比较.结论:两组结果具有显著性差异,既上一检测项目的试剂对下一检测项目的测定有影响. 相似文献
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目的:介绍一种快速简便地优化多重PCR检测DMD基因外显子缺失的方法及详细步骤.方法:采2ml外周血,用0.2%氯化钠处理收集白细胞,再用基因组DNA提取试剂盒抽提基因组DNA,用优化的多重PCR法直接检测DMD基因外显子的缺失.结果:用该方法检测DMD基因外显子缺失结果准确清晰.结论:用优化的多重PCR技术可以直接检测DMD基因外显子缺失,跟通常使用的9对引物一步法相比,具有经济、快速、简便等特点. 相似文献
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目的:同时用评价试剂和参比试剂检测436例血清样本,探讨评价试剂与参比试剂检测结果的符合率.方法:评价试剂采用化学发光法,参比试剂采用双抗原夹心酶联免疫吸附试验;并通过卡方检验来判断两试剂盒间有无显著差异.结果:评价试剂和参比试剂阳性符合率为98.25%,阴性符合率为99.47%.两种试剂通过卡方检验比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:评价试剂与参比试剂的检测结果具有很好的一致性,评价试剂可以用于梅毒感染的辅助诊断. 相似文献
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1990年高考化学试卷第38题:有两瓶 pH=2的酸溶液,一瓶是强酸,一瓶是弱酸。现只有石蕊试液、酚酞试液、pH 试纸和蒸馏水,而没有其它试剂。简述如何用最简便的实验方法来判别哪瓶是强酸:本题意在考查考生对强、弱酸在水中电离程度不同和弱酸的电离度随浓度变化改变的理解,以及运用指示剂去检测溶液酸、碱性强弱的能力。 相似文献
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目的:探讨磁微粒化学发光法(CLIA)与胶体金法检测新型冠状病毒抗体IgM、IgG的差异。方法:分别用CLIA与胶体金法对新型冠状病毒IgM、IgG抗体进行测定,分析两种检测方法检测新型冠状病毒抗体的敏感性以及最低检测限值。结果:CLIA检测新型冠状病毒IgM、IgG的S/CO值小于1时,胶体金法检测均为阴性;S/CO值大于10时,胶体金法检测IgM的阳性率为100%、检测IgG的阳性率为99.14%;S/CO值大于1小于10时,胶体金法检测新型冠状病毒IgM与IgG的阳性率分别为0.87%与1.56%。结论:CLIA法检测新型冠状病毒IgM、IgG的检出率高于胶体金法;CLIA检测新型冠状病毒IgM与IgG最低检测的S/CO值≥1判定为阳性,而S/CO值大于10时,胶体金法显示阳性,CLIA的阳性阈值更低。 相似文献
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<正> 作者使用 GI—234C 型全自动生化超微量分析仪,郑州博赛生物试剂研究所的 AFP—ELISA 定量试剂盒,按说明书操作。检测血清甲胎蛋白(AFP)。男性27例,非妊娠妇女39例,正常妊娠妇女58例,异常妊娠妇女4例(神经管缺损1例,无脑儿1例,死胎2例)。血清 AFP 均值分别为12.4;12.7;305.9;2086ng/ml,男性与非妊娠妇女 AFP 含量无显 相似文献
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正一、背景本节内容是九年级科学(上)第一章探索物质的变化中碱与盐的性质学生实验的内容。初步学习了第一章中碱的化学特性,并结合已学习的用实验现象确定物质性质的检测方法(如用试剂、试纸检测颜色变化,化学反应中产生的气体等),在实验室中进行碱的 相似文献
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本文使用一种简单、快速且具有选择性的测试方法,检测水样中的pb2+.该方法基于“17DS-17E”脱氧核酶、条形码DNA的纳米金结合物和捕获DNA-BSA轭合物,将其分别涂在控制区和测试区显色并进行定性分析和检测.结果表明,由于17E脱氧核酶对Pb2+具有高效的特异性,pb2+的存在促使17E酶链分裂底链17DS,pb2+的测试结果可以在10min内获得,检出限为10 nmol/L.该传感系统具有良好的选择性,其他二价金属离子对传感没有明显的干扰,且试纸条能长期使用,该测试条是一种潜在的现场快速检测Pb2+的筛查工具. 相似文献
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《邢台职业技术学院学报》2015,(3):92-95
针对免疫层析检测试纸C/T线在生产制作上存在的不足,设计了一套对恒线速度运动的NC膜进行划液的专业设备,主要用于在试纸的NC膜表面划上定量均匀的蛋白质液。为了满足划液要求,划液仪以单片机为主要控制核心,设计了自主调节的划液平台和精确稳定的传动装置,通过键盘和液晶显示使操作更加简单直观,检测装置增加了划液仪的精度和稳定性。另外加入RS-485通讯接口,PC机可通过Modbus协议实现对划液仪的控制,便于设备组网后的集中监控。实验证明:该仪器经济简便、性能稳定、操作精准,适用于各种免疫层析试纸条的科研以及中小型企业的研发。 相似文献
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在教学中,我采用“pH试纸颜色变化对比”的方法来检验硅酸的酸性: 在盛有硅酸的试管中,滴入适量事前用pH试纸测出显蓝色程度的NaOH溶液.待反应后,再用另一张pH试纸测出生成物溶液所显示的颜色.然后,将两张pH试纸所显示的颜色进行比较,其结果,后者颜色浅于 相似文献
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结合量子点与胶体金颗粒优良的光学性能,利用抗体识别技术,基于人IgG修饰的量子点与羊抗人IgG修饰的胶体金之间的荧光共振能量转移效应,建立了一种新型免疫分析方法用于人IgG的检测.这种方法操作简便,实验条件温和,特异性好,安全可靠. 相似文献
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禽流感的快速检测技术研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类感染征或疾病综合症,快速诊断和及时监测是控制禽流感的首要步骤.介绍了几种禽流感快速检测技术,包括免疫荧光技术、酶联免疫吸附试验、免疫胶体金技术、分子生物学诊断技术和RT-LAMP检测技术等.并对禽流感快速诊断技术的发展趋势进行了评述. 相似文献
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2017年人教版高中生物学选择性必修1教材中“模拟生物体维持pH的稳定”实验使用0.1 mol/L盐酸溶液与0.1 mol/L氢氧化钠溶液检测生物体维持pH稳定的机制,并利用pH试纸进行酸碱度检测。盐酸溶液和氢氧化钠溶液均具有强烈的刺激性与腐蚀性,对pH试纸精确读数要求也较高。为此,利用天然试剂代替教材中的实验试剂,并对实验设计进行创新。实验结果表明,利用柠檬汁代替0.1 mol/L盐酸溶液、苏打溶液代替0.1 mol/L氢氧化钠溶液、天然紫草溶液代替pH试纸具有可行性,实验操作简单且显色更为明显。 相似文献
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周竹 《中小学实验与装备》2011,21(1):19
化学试纸是化学分析和简易测试中不可缺少的量度工具试剂,广泛应用于冶金、化工、纺织、食品、轻工、农业、医学、机械、地质、环境保护等众多领域,在中学化学中也是常见的一种检测工具。随着科技的发展,多媒体在教学中的优势逐渐显现。但是在日常化学教学中,有些仪器、试剂在应用到多媒体教学中时就像"水牛掉进井里"有劲使不出。譬如化学课程常用的酚酞试纸、石蕊试纸、醋酸铅试纸等,因为他们较厚,且有色,光透性不强,如果用多媒体设备如投影器等给学生呈现时,就会漆黑一片,学生不容易看出颜色的变化。如果我们把试剂的载体由不透明的纸质试纸,转化成透明的胶质试纸,这个问题就会迎刃而解。 相似文献