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1.
本文从纯化Den2 NS1,Mab入手,自制了Mab亲和层析系统,从感染Den2的细胞膜中,分离提取了天然的Den 2 NS1双体,比较其NGC株与我国地方株(H-87)NS1的理化性质及组成,并对某些重要的生物学性质进行了综合性研究。同时,利用上述研究结果建立了检测DF病人血清特异NS1抗体的新方法,探索其协助临床诊断及研究的可能性。  相似文献   
2.
应用Con-A亲和层析方法从两株Den2病毒(New Guinea C株和从中国海南省分离的H-87株)感染的C6/36细胞膜中分离的糖蛋白,发现了一种感染细胞中特有的蛋白质。经SDS-PAGE证明该蛋白分子量约46000D,分析其为Den 2病毒的非结构蛋白NS1。并利用Western blot筛选出针对该蛋白4种单克隆抗体。  相似文献   
3.
hCLP46(human CAP10-like protein46)是从MDS-AML患者的CD34+干细胞cDNA文库中筛选出的基因.我们利用串联亲和纯化技术来筛选与hCLP46有相互作用的蛋白.通过体内交联-甘氨酸洗脱策略,检测到7条有差异的蛋白带,经液相色谱-质谱联用鉴定,得到了CNX和PDI等一系列内质网伴侣蛋白.所以hCLP46可能是一个糖蛋白,其成熟过程利用了BiP/Grp94 和CNX/CRT 2套伴侣蛋白系统.  相似文献   
4.
hCLP46(human CAP10-like protein46)是从MDS-AML患者的CD34+干细胞cDNA文库中筛选出的基因.我们利用串联亲和纯化技术来筛选与hCLP46有相互作用的蛋白.通过体内交联-甘氨酸洗脱策略,检测到7条有差异的蛋白带,经液相色谱-质谱联用鉴定,得到了CNX和PDI等一系列内质网伴侣蛋白.所以hCLP46可能是一个糖蛋白,其成熟过程利用了BiP/Grp94和CNX/CRT 2套伴侣蛋白系统.  相似文献   
5.
设计"KTAprime plus蛋白质层析系统纯化绿色荧光蛋白(GFP)"的综合实验,以GFP蛋白为研究对象,在大肠杆菌中大量表达重组GFP蛋白,经镍柱亲和层析、离子交换层析以及凝胶过滤层析3种常用层析技术逐步纯化,各步纯化样品经SDS-PAGE鉴定分析,最终获得高纯度的GFP蛋白。通过该实验使学生深入、全面、系统地掌握生命科学研究中最新的蛋白质分离纯化技术,提高学生的科研水平和综合能力。  相似文献   
6.
LC-MS/MS测定植物油脂中黄曲霉毒素B1   总被引:1,自引:0,他引:1  
建立LC-MS/MS检测植物油脂中黄曲霉毒素B1的含量。黄曲霉毒素B1的检测通常情况下都是用液相色谱检测法带荧光检测器,柱前衍生,或是柱后衍生,操作比较繁琐,灵敏度低。本法采用LC-MS/MS检测,甲醇水提取后,经黄曲霉毒素B1免疫亲和柱,甲醇定容,LC-MS/MS检测。此法操作简便、快速、灵敏、准确。  相似文献   
7.
色层分离是样品混合液中各组分在固定相和流动相之间的一类差别分离。其机理尽管多种多样,但总是与样品混合液在流经层析剂时溶质相对于溶剂前缘的阻滞现象有关。大多数生物大分子都有能与专一性很强的配基相结合的生物功能。这种利用生物大分子与各种配基的生物识别能力进行色层分离的技术便是近年来迅速发展的一门新的有效的色层分离法——亲和色层分离法[1]。介绍了有关亲和层析的种类和发展方向,为读者展现了一个崭新的亲和层析的世界。  相似文献   
8.
本文介绍了亲和层析的作用机理,并根据配体的类型,对不同类型的亲和层析进行描述,有凝集素亲和层析、硼酸盐亲和层析、免疫亲和色层析、金属螯合层析和染料配体亲和层析。  相似文献   
9.
谷胱甘肽转硫酶酶促动力学实验设计   总被引:3,自引:0,他引:3  
酶学研究是生物化学的重要组成部分,本文介绍了一组酶促动力学实验:亲和层析法对谷胱甘肽转硫酶进行分离纯化,并测定该酶活性,米氏常数Km值及最大反应速度Vm值,测定酶蛋白含量计算酶的比活性。该实验适用于生物学专业本科生的酶学实验训练,获得了良好的教学效果。  相似文献   
10.
在已有的pET30a/hs表达载体的基础上,构建了原核表达载体pET30a/hsBLYS(His6)、经双酶切分析和DNA测序后,转化入表达宿主大肠杆菌M15,IPTG诱导后得到高效表达(目的蛋白约占总菌蛋白的35%);表达产物大部分以包含体形式存在。采用本室自行研制的Ni^2 亲和层析胶(Ni^2 —IDA)纯化可溶部分的重组融合蛋白,经SDS—PAGE鉴定为单一条带。  相似文献   
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