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1.
表达序列标记(EST)研究进展 总被引：5，自引：0，他引：5
表达序列标记（EST）是通过对cDNA库克隆进行大规模测序所获得的5′或3′端序列，长度一般为300－500bp，可代表生物体某一时间内某组织中表达的基因，本就EST技术原理，概念最新发展及其在大规模快速克隆基因，基因功能分析等方面应用进行综述。 相似文献
2.
增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),也称周期蛋白或DNA聚合酶的辅助蛋白,是真核细胞合成所必需的核蛋白,在DNA复制中起重要作用。前期实验发现日本七鳃鳗肝脏cDNA文库的表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)中存在与高等脊椎动物pcna基因同源的序列。提取日本七鳃鳗(Lampetra japonica)肝脏组织RNA,通过RT-PCR方法扩增七鳃鳗pcna基因,对其进行生物信息学分析,并将Lj-pcna基因成功构建到pGFP-N2真核表达载体上,重组质粒PGFP-N2-Lj-pcna转染人Hela细胞,荧光显微镜下观察有荧光蛋白的表达。日本七鳃鳗pcna基因的真核表达载体成功构建和转染,为探讨七鳃鳗pcna基因功能研究及其它七鳃鳗相关研究提供条件。 相似文献
3.
孙亮先 《泉州师范学院学报》2004,22(2):94-99
对GenBank中9215条来源于水稻(Oryza sativa L.ssp．Indica)胚乳cDNA库的3’EST进行了分析，获得20个淀粉合成相关基因的表达丰度信息，研究发现淀粉合成的5个关键酶的编码基因，ADPG焦磷酸化酶基因、ADP—葡萄糖淀粉合成酶、淀粉分支酶、淀粉去分支酶、蜡质基因的表达丰度极高，表明该时期水稻胚乳内淀粉合成反应非常强烈，研究发现在淀粉合成途径中存在功能相关的基因协同表达的现象，章结合所获得的基因表达信息对淀粉合成的分子机理进行了探讨。 相似文献
4.
目的：克隆蚓激酶基因并在GENEBANK中进行序列分析．方法：采用RT—PCR技术，以蚯蚓总．RNA为模板进行扩增，克隆蚓激酶基因、用Blast软件对基因进行同源性分析．结果：克隆了一个cDNA片段，与GENEBANK中蚓激酶基因序列最高同源性为99％．结论：本方法实用可行，同源性分析表明克隆的cDNA片段具备完整的蚓激酶编码区，为下一步进行蚓激酶的表达研究奠定了良好的基础． 相似文献
5.
对近年来甲壳动物卵黄蛋白原基因的分子克隆和该基因在体内表达研究等方面进行分析,显示甲壳动物卵黄蛋白原的cDNA及其推断的氨基酸序列有很高的相似性,且有类似的分裂位点.卵巢和肝胰腺是甲壳动物卵黄蛋白原基因表达的主要位点. 相似文献
6.
通过3′RACE和5′RACE获得对虾Rab基因(命名为PjRab)的cDNA全长,其ORF为636bp,编码212个氨基酸.序列分析发现,PjRab具备Rab蛋白的基本特征,但在C-端与已知的Rab蛋白不同,可能是一种新的Rab蛋白,这是首次在海洋无脊椎动物体内克隆到该基因.对该基因进行了原核表达,并得到了有活性的表达产物. 相似文献
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抑制差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)是一种高效鉴定和分离克隆差异表达基因的新技术。目前,该技术在分子生物学研究的各个领域得到了广泛的应用。本对SSH的技术原理、差减cDNA库构建的技术流程、常见问题分析及优缺点等作了较全面的介绍,可为研究们提供参考。 相似文献
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茶树β-1,3-葡聚糖酶基因cDNA片段的克隆与序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
文章首次从茶树中克隆出-β1,3-葡聚糖酶基因cDNA1369bp连续序列。根据已发表的植物中β-1,3-葡聚糖酶基因的保守序列,设计一对简并引物,采用RT-PCR技术,从茶树中扩增出366bp的cDNA片段。根据此片段序列设计特异引物,利用3'RACE获得-β1,3-葡聚糖酶cDNA 3'端1252bp的cDNA片段。序列分析表明:该基因cDNA 3'端核苷酸序列及其推测的氨基酸序列与其他植物的-β1,3-葡聚糖酶基因家族的cDNA相应序列同源性为50%-90%,经序列拼接,本研究从茶树中克隆出-β1,3-葡聚糖酶基因cDNA3'端1369bp的连续序列,GenBank登录号为AF399920。 相似文献
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以NCBI中的EST数据库为主要数据来源,以一系列生物信息学软件为工具,进行了超氧化物歧化酶（SOD）基因的电子克隆及生物信息学分析。结果表明：通过电子克隆方法获得了SOD基因的编码区全长序列,该预测的SOD蛋白质氨基酸序列与数据库中同类基因的蛋白质氨基酸序列具有极高的相似性,并且含有完整的保守结构域;电子克隆到的SOD基因编码的不是分泌蛋白,也不是膜蛋白,而是胞质蛋白。通过某个基因的一个EST序列采用电子克隆的手段进行基因全长的电子拼接是可行的。 相似文献
10.
生肌调节因子（MRF）基因家族的表达决定着肌细胞的命运,并控制其增殖和分化．Myf5是生肌调节因子MRF基因家族中的一个成员．本文提取赤眼鳟肌肉总RNA,采用RT—PCR技术获得赤眼鳟Myf5基因的部分cDNA序列,共338bp,编码112个氨基酸,含有部分bHLH结构．通过同源性分析发现赤眼鳟Myf5基因编码区与草鱼的同源性高达97．34％．半定量RT—PCR分析表明赤眼鳟Myf5基因在心脏和肾脏中表达量较高,鳃和肌肉中表达量次之,肝脏、脑和肠中表达量较弱．本结果为进一步研究该基因对肌肉生长发育的作用机理奠定了基础． 相似文献
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在临床实践中,抗菌素的大量使用导致了细菌的药物耐受性形成。细菌通过先天或获得性耐受机制实现对自身的保护。获得性耐受性来源于突变和水平基因转移。细菌获得性耐受性形成的生物化学机制(途径)包括:抗菌素失活或修饰、靶向修饰、外排泵和外膜渗透性改变及"迂回"代谢途径。本文将对目前临床重要细菌的抗菌素耐受性机理进行阐述。 相似文献
13.
就RNAi技术在玉米抗病性、品质改良、转化方法等方面的研究进展做简要综述,重点评述RNAi阻断病毒基因表达,提高玉米抗病性;沉默代谢途径中的某些特定基因,提高直链淀粉或氨基酸的含量,改良玉米品质,农杆菌和基因枪介导玉米遗传转化等研究.RNAi技术开辟了玉米遗传改良的新途径. 相似文献
14.
脱落酸在植物干旱、高盐或低温等逆境胁迫的反应中起重要作用。介绍脱落酸在干旱胁迫反应中调节气孔关闭、诱导抗逆基因表达，调节植物的生理、代谢变化，避免或减少逆境胁迫对植物细胞与组织的伤害作用及作用机制。 相似文献
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INTRODUCTIONNongreenplastidsofheterotrophictissuesarecarbohydrate importingorganellesand ,inthecaseofamyloplastsofstoragetissues,thesiteofstarchsynthesis.Investigationofwholetissuesfromavarietyofstarchsynthesizingcropplantsindicatedthathexoseunitswereimpo… 相似文献
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Plastids of nongreen tissues import carbon as a source of biosynthetic pathways and energy, and glucose 6-phosphate is the preferred hexose phosphate taken up by nongreen plastids. A cDNA clone encoding glucose 6-phosphate/phosphate translocator (GPT) was isolated from a cDNA library of immature seeds of rice and named as OsGPT. The cDNA has one uninterrupted open reading frame encoding a 42 kDa polypeptide possessing transit peptide consisting of 70 amino acid residues. The OsGPT gene maps on chromosome 8 of rice and is linked to the quantitative trait locus for 1000-grain weight. The expression of OsGPT is mainly restricted to heterotrophic tissues. These results suggest that glucose 6-phosphate imported via GPT can be used for starch biosynthesis in rice nongreen plastids. 相似文献
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生肌决定因子 MyoD 是生肌调节因子 MRFs 家族的一个重要成员,在基因转录调控中起着重要的作用.本实验通过 RT-PCR 和3’-RACE 等方法,以松江鲈肌肉总 RNA 为模板,扩增出957 bp 的 MyoD 基因部分序列,包含部分编码区长567 bp,编码翻译188个氨基酸残基,3’-UTR 区长390 bp.系统发育分析表明,松江鲈 MyoD 与奥尼罗非鱼亲缘关系最近.不同组织半定量分析显示,松江鲈 MyoD 在各种组织中均有表达,在心脏中表达量最高,预示着在不同组织中该基因的功能广泛 相似文献
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植物基因组的研究已经由以全基因组测序为目标的结构基因组学转向以基因功能鉴定为目标的功能基因组学研究.植物功能基因组学研究是利用结构基因组学积累的数据,从中得到有价值的信息,阐述DNA序列的功能,从而对所有基因如何行使其职能并控制各种生命现象的问题作出回答.近年来植物功能基因组学的研究技术主要包括表达序列标签、基因表达的系列分析、DNA微阵列和反向遗传学等.对植物功能基因组学的研究将有利于我们对基因功能的理解和对植物形状的定性改造和利用. 相似文献
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Veronica S. Flodin 《Science & Education》2017,26(1-2):141-170
The purpose of this study is to interpret and qualitatively characterise the content in some research articles and evaluate cases of possible difference in meanings of the gene concept used. Using a reformulation of Hirst’s criteria of forms of knowledge, articles from five different sub-disciplines in biology (transmission genetic, molecular biology, genomics, developmental biology and population genetics) were characterised according to knowledge project, methods used and conceptual contexts. Depending on knowledge project, the gene may be used as a location of recombination, a target of regulatory proteins, a carrier of regulatory sequences, a cause in organ formation or a basis for a genetic map. Methods used range from catching wild birds and dissecting beetle larvae to growing yeast cells in 94 small wells as well as mapping of recombinants, doing statistical calculations, immunoblotting analysis of protein levels, analysis of gene expression with PCR, immunostaining of embryos and automated constructions of multi-locus linkage maps. The succeeding conceptual contexts focused around concepts as meiosis and chromosome, DNA and regulation, cell fitness and production, development and organ formation, conservation and evolution. These contextual differences lead to certain content leaps in relation to different conceptual schemes. The analysis of the various uses of the gene concept shows how differences in methodologies and questions entail a concept that escapes single definitions and “drift around” in meanings. These findings make it important to ask how science might use concepts as tools of specific inquiries and to discuss possible consequences for biology education. 相似文献
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介绍了植物对病原茵入侵的反应和DNA微阵列(DNA microarray)的原理．综述了DNA microarray在植物与病原茵互作过程中的应用,包括潜在的防御相关基因、基因聚类及其启动子区顺式元件的鉴定,研究不同信号途径之间的相互作用．对植物防御反应机制,包括R基因表达、防御信号转导基因、防御反应及信号分子等方面进行了阐释．提出该技术存在的问题、解决策略和应用展望． 相似文献