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相似文献
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1.
为研究斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura muhicapsid nucleopolyhedrovirus.SpltMNPV)侵染规律,根据SphMNPV中国株(G2)ORF135基因序列设计引物,经PCR扩增,从SpltMNPV日本株(B)基因组中克隆了pif-2基因。核苷酸序列分析表明,该基因是甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)pif-2的同源物,读码框含1278bp,编码425个氨基酸的蛋白质,推定分子量为48.6kD。与其他杆状病毒的同源物比对显示.SpltMNPV-JP-B PIF-2蛋白中14个Cys残基高度保守。联配分析表明,SphMNPV-JP-B pif-2的核苷酸序列与其他13种核型多角体病毒的同源性有较大差异。将pif-2克隆至原核表达载体pET32a(+),经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21中获得了融合表达,SDS-PAGE分析表明在约69kD处有特异性表达条带,经Western blot验证该蛋白即为融合表达的目的蛋白。  相似文献   

2.
许健  于涟  李龙  由振强  万旺军  刘岩 《科技通报》2007,23(1):52-57,101
根据鸡白细胞介素18(IL-18)cDNA基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术,从脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的我国地方品种萧山鸡原代鸡脾细胞中扩增并克隆鸡IL-18全长基因(Genbank accession,AY628648)。扩增片段全长591bp,共编码197个氨基酸的前体蛋白,其中含有表达完整功能蛋白所必需的起始密码子和终止密码子。该序列与国外报道的鸡IL-18全长基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性为98.99%。只在引导序列中出现两个氨基酸残基的缺失,分子进化分析表明萧山鸡IL-18基因与火鸡以及家鸭基因形成一个独立的分支。将萧山鸡IL-18成熟蛋白序列插入pGEX-4T-2载体并在Ecoli中得到表达,获得45kD的GST-IL-18融合蛋白。经纯化后用于制备多克隆抗体。本研究对萧山鸡白细胞介素18的全长基因进行了克隆及表达,并对其分子进化进行了分析。为深入研究其功能奠定了基础。  相似文献   

3.
在1株污染半夏组培苗的枝状枝孢真菌(Cladosporium cladosporioides DF15)中检测到5条双链RNA(double-strand RNA,ds RNA)条带。通过M-SPAT(modified single-primer amplification technique)、克隆测序获得5条ds RNA的序列信息,分别为ds RNA1(2434bp)、ds RNA2(2241bp)、ds RNA3(2008bp)、ds RNA4(1261bp)和ds RNA5(942bp)。经Blast比对,ds RNA1编码蛋白的氨基酸序列与侵染荚孢壳科、球腔菌科真菌的双分病毒属(Partitivirus)病毒,以及侵染辣椒等植物的双分病毒科(Partitiviridae)病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,Rd Rp)序列相似度最高。氨基酸序列系统进化树分析表明,ds RNA1与侵染真菌的双分病毒属病毒亲源关系更近。通过核苷酸序列5'非编码区(untranslated regions,UTR)的比对发现,5条ds RNA的5'UTR序列相似度高达50.0%~95.3%,并含有2段保守序列5'-GUAAAUAAACCUU-3'和5'-C(/G)TA(/AG)CAAGT(/C)AT-3'。根据上述分析,推测5条ds RNA序列来自同1种病毒基因组,并且为侵染C.cladosporioides的1种新双分病毒科双分病毒属病毒,命名该病毒为C.cladosporioides virus 1。  相似文献   

4.
利用同源克隆的方法,从商陆中克隆得到扩展蛋白基因的全长cDNA序列,命名为PaEXP1(GenBank 登录号为GQ851947).PaEXP1长1128bp,含有759bp的完整开放阅读框,编码252个氨基酸,分子量27.1kD,等电点8.55.PaEXP1氨基酸序列N端含有8个半胱氨酸残基,1个组氨酸(His-Phe-Asp,HFD)域,C末端存在4个保守的色氨酸残基,具有扩展蛋白的典型结构.系统进化树分析表明,PaEXP1属于扩展蛋白的α-扩展蛋白家族.Real time-PCR结果表明,PaEXP1主要在根中表达,低温、盐、重金属和渗透胁迫均强烈地抑制其基因的表达.酵母转化实验表明,转PaEXP1可以提高酵母的平均直径,说明PaEXP1参与细胞壁的松弛扩展和细胞的增大过程.  相似文献   

5.
本文通过RT—PCR的方法对家禽所的新城疫病毒LaSota疫苗株的全长进行分段克隆。通过测序获得全长序列,该病毒全长为15186bp,将全长序列提交到NCBIGenBank中获得序列登录号为JF950510,将其与之前已提交到NCBIGenBank中的LaSota株全长序列(登录号为AF077761)比较,核苷酸序列有135处变异,各个蛋白的氨基酸序列总共有61处变异。全基因克隆和序列分析为下一步研究LaSota株提供一个良好的方法.  相似文献   

6.
通过PCI%的方法对一市售的新城疫Muktesw&r疫苗株的全长进行分段克隆,通过测序获得全长序列,该病毒全长为15186bp,将全长序列提交到NCBIGenBank中获得序列登录号为JF950509.将其与之前已提交到NOBI GenBank中的Mukteswar株全长序列(登录号为EF201805)比较,核苷酸序列有59处变异,各个蛋白的氨基酸序列总共有16处变异。序列的测定为进一步对Mukteswar抹的研究提供一个良好的平台。  相似文献   

7.
萤火虫荧光素酶基因cDNA真核表达载体pGL2可在原核细胞中高效表达。该载体中含有SV40早期启动子及荧光素酶基因cDNA5'端总长共758bp的DNA碱基序列,经计算机分析发现,在SV40早期启动子中含有SV40基因组HindⅢB片断中一段长为49bp的DNA序列,且荧光素酶基因cDNA编码区的5'端含有一个原核细胞基因表达调控区相似序列。将pGL2中的荧光素酶基因cDNA(Luc)克隆入真核表达载体pED中,构建成pED-Luc。该载体经表达测定后,只在真核细胞中表达,在原核细胞不中表达。这说明荧光素酶基因cDNA编码区的5'端的原核细胞基因表达调控区相似序列不具表达有活性的荧光 素酶的功能。经DNA序列对比研究,认为pGL2含有的SV40基因组Hind ⅢB片段5123bp-5171bp长49bp的DNA序列可能就是Hind ⅢB片段的原核增强子功能的决定序列。  相似文献   

8.
施曼玲 《科技通报》2007,23(1):41-45
从浙江宁波雪菜上获得病毒分离物NBXC,病毒提纯后,电镜下可观察到大量长约740 nm的线形粒子。间接ELISA检测结果证实NBXC是芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)的分离物。利用IC-RT-PCR对病毒分离物NBXC的CP和HC-Pro基因进行PCR扩增,分别得到约0.8 kb和1.4 kb的两条条带,与预期的TuMV CP和HC-Pro基因大小吻合。扩增产物克隆后进行序列测定,CP基因序列长度为864个核苷酸,编码288个氨基酸;HC-Pro基因序列长度为1374个核苷酸,编码458个氨基酸。NBXC的CP和HC-Pro基因与已报道的TuMV其他分离物的核苷酸序列同源率分别为90.0%~98.3%和82.2%~96.9%,氨基酸同源率分别为95.8%~99.3%和95.6%~99.3%。从CP和HC-Pro基因核苷酸序列同源性来看,NBXC与TuMV芸薹属分离物有更近的亲缘关系,而与萝卜属分离物亲缘关系较远。  相似文献   

9.
为研究家蚕质型多角体病毒(BmCPV1)的遗传与变异、探讨S8片段的功能,通过RT-PCR克隆BmCPV1苏州株(BmCPV1-SZ)S8的cDNA,并对其核苷酸序列(GenBank登录号:GQ150539)和编码的氨基酸序列进行生物信息学分析.结果显示:S8由1328 bp构成,具有一个编码390个氨基酸残基的开放阅读框;在BmCPV1-SZ S8的编码氨基酸序列与BmCPV1-I和BmCPV1-H的一致性达93%,但与其他非CPV1型的相似程度较低;在推导的蛋白的氨基酸序列中间区域;具有E-丰富和P-丰富的区,域,其局部区域的氨基酸序列与某些蛋白的功能(细胞周期控制、蛋白降解和RNA降解)区域的序列具有一定的相似性;结构域家族分析显示,BmCPV1-SZ S8编码蛋白属GcrA家族,具有与DNA结合的HTH结构域.Blocks分析显示,S8编码蛋白同时具有DNA聚合酶家族、RNA聚合酶2的结构功能域;高级结构分类显示,S8编码蛋白具有与TIM桶酶、肽酶、核苷三磷酸水解酶相似的同源结构.推测该蛋白具有转录调控因子和多功能酶的功能.基于S8编码的氨基酸序列的进化分析显示,相同类型的CPV聚为一类,同一宿主不同类型的CPV相距较远,推测CPV主要根据其类型聚类,而宿主昆虫对聚类的影响相对较小.  相似文献   

10.
蝴蝶兰花发育相关基因pPI9的克隆与表达分析CloningandExpressionAnalysisofaPhalaenopsisFlowering-relatedgenepPI9郭滨陈东红戴薇魏星明凤摘要:为研究具有复杂而特异花型的蝴蝶兰花发育的分子机制,利用RT-PCR方法从蝴蝶兰花瓣总RNA中分离出834bp长的cDNA片断.序列分析表明,该cDNA片断与拟南芥的PI基因有60%的同源性,命名为pPI9.它包含一个开放阅读框,具有编码24.5ku蛋白质的能力.推导的氨基酸序列中,N端包含一个完整的MADS盒,C端有明显的PI基序.半定量PCR结果表明该基因只在植株的生殖器官中表达,而在营养器官中不表达,…  相似文献   

11.
12.
在标本观察和野外调查的基础上,对西藏的嵩草属Kobresia植物进行了分类学修订,共确认了36种和1亚种。更正了6个类群的学名,它们正确的名称是K. esenbeckii,K. fissiglumis,K. gammiei,K. littledalei,K. myosuroides ssp. bistaminata和K. vaginosa。有13个名称,即K. angusta,K. cercostachys var. capillacea,K. clarkeana,K. curticeps var. gyirongensis,K. deasyi,K. glaucifolia,K. hookeri,K. nudicarpa,K. prainii var. elliptica,K. seticulmis,K. stenocarpa,K. stenocarpa var. simplex和K. williamsii处理为异名,其中K. prainii var. elliptica,K. glaucifolia和K. stenocarpa var. simplex为新异名。发现了西藏分布的一个新记录种密穗嵩草K. handel-mazzettii。还收录了最近发表的假钩状嵩草K. pseuduncinoides和阔鳞嵩草K. woodii。此外,重新编制了西藏嵩草属分种和亚种检索表,并较为详细地登记了各类群在西藏的分布地点。  相似文献   

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16.
Ti_(50)C_(50)粉末的机械合金化研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
将纯Ti粉石墨粉按原子比1:1的比例混合配成Ti_(50)C_(50)混合粉,球料重量比为10:1,用高能球磨的方法在行星球磨机上进行机械合金化实验。对球磨不同时间(0,5,40,60,80h)的粉末样品用XRD、TEM、SEM进行了结构和形貌分析,结果表明,球磨初期,C原子向Ti晶格及晶界扩散,形成Ti的过饱和固溶体,致使衍射谱上石墨衍射峰消失;进一步球磨,此过饱和固溶体可以形成纳米晶结构,其晶粒尺寸大小约为20~50nm,球磨40h后混合粉中有TiC生成,但单纯通过机械合金化法不能使Ti_(50)C_(50)混合粉末完全转变为TiC。  相似文献   

17.
Calanthe tangmaiensis K. Y. Lang & Y. Tateishi (Orchidaceae) isdescribed as new from Xizang, China.  相似文献   

18.
Laportea medogensis C. J.  Chen,  most closely related  to  L.  decumana(Rumph.) Wedd., is described from southeastern Xizang (Tibet).  相似文献   

19.
(1)Eichler(1958)在研究马来西亚铁线莲属植物时也深入地研究了中国、越南、泰国、缅甸及喜马拉雅山区的该属标本,认为根据我国台湾标本描述的Clematis taiwaniana Hayata可能为C.javana DC.的异名。本文作者在研究了有关的南洋群岛、中国台湾及日本琉球群岛的标本之后同意Eichler的归并意见;此外,C.grata Wall.var.ryukiuensis Tamura,C.sikkimensis(Hook.F.&; Thoms.) Drumm.ex Burkill,C.connata DC.var.bipinnata M.Y.Fang,C.kilungensis W.T. Wang &; M.Y. Fang等拉丁学名也被归并为异名。(2)对大叶铁线莲组sect.Tubulosae做出了新的分类系统。特产日本的Clematis takedana Makino 自发表后一直被认为是C.apiifolia DC.和 C.stans Sieb.&; Zucc.(大叶铁线莲C.heracleifolia DC.的近缘种之一)的杂交种。此种为木质藤本植物,具三出复叶,腋生花序有多数两性花,呈圆锥状,而相似于C.apiifolia DC.(萼片水平开展,雄蕊无毛,花药狭长圆形,药隔顶端不突出),但其萼片向斜上方开展(花萼宽钟状),花丝上部有疏柔毛,花药条形,药隔顶端有短突起而不同。笔者发现,特产我国河北西部和北京山地的羽叶铁线莲C.pinnata Maxim.(叶为具5小叶的羽状复叶)具有与C.takedana Makino相同的花构造,二者在亲缘关系上极为相近,组成一个自然小群。这二种与特产北京的细花铁线莲C.tatarinowii Maxim.(花两性,萼片直立,花丝上部有疏柔毛,花药狭长圆形,背面有疏柔毛,药隔顶端不突出)组成大叶铁线莲组sect.Tubulosae的原始群——羽叶铁线莲亚组subsect.Pinnatae。而原来的大叶铁线莲C.heracleifolia DC.等种组成此组的进化群——大叶铁线莲亚组subsect.Tubulosae,其特征为花通常单性,萼片直立,雄蕊常有疏柔毛,茎直立,草质至木质。此外,还对C. siamensis Drumm.ex Burkill的4变种和C.connata DC.的5变种进行了分类。(3)描述了3新系、3新种和4新变种。(4)做出了6新组合和3新等级。  相似文献   

20.
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