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绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)最初是从维多利亚多管水母(Aequoria victoria)中发现的发光蛋白[1].天然GFP的生色团由65-67位SerTyr-Gly的氨基酸残基组成,并经环化和脱氢形成一个咪唑环[2].其最大激发峰为395 nm,在475 nm处有一副激发峰,最大发射峰位于510 nm.gfp作为一种新型的报告基因具有许多优越性:首先它分子量较小,只编码238个氨基酸的多肽,对细胞没有毒性,不干扰标记蛋白的功能和定位.其分子结构及光谱特性稳定,能在多种条件下研究.在多数情况下,GFP的异源表达并不影响细胞的正常活动,另外,GFP是目前唯一能在异源细胞内表达并自发产生荧光的蛋白,由于不需要辅助因子的参与,故可直接用于活体测定.可以说,GFP是当前研究活体细胞中基因表达和蛋白质分布的最好手段之一,具有广阔的应用前景.自从1994年Chalfie等首次在大肠杆菌和线虫中表达gfp[3]以来,迄今为止,GFP已在多种生物,如细菌、蓝细菌、粘菌、酵母、植物和哺乳动物中表达和应用.GFP的这一种属不依赖的特性使其成为广泛运用的荧光标记分子,尤其适用于监测基因表达和活体内蛋白质定位等研究. 相似文献
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目的：构建、筛选并鉴定出重组GFP唾液乳杆菌CCFM6105。方法：利用GFP作为报告基因,从携带gWiz-GFP质粒的大肠杆菌中提取质粒,将gWiz-GFP质粒电转化至唾液乳杆菌CCFM6105中,构建GFP唾液乳杆菌。结果：PCR产物电泳结果显示约在750bp处出现明亮条带,PCR反应成功;在1800V电压下的菌落荧光暗沉;在2400V电压下的菌落荧光致密明亮;在2200V、2600V电压下菌落荧光偏暗;各代重组菌的GFP表达良好且无明显减弱。结论：本实验成功构建GFP唾液乳杆菌CCFM6105且GFP在唾液乳杆菌在稳定遗传中得到了稳定的表达。 相似文献
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分子生物传感器是由生物大分子通过基因重组或DNA合成所构成的传感器,能够实时、可视化探测活细胞及活体内关键分子事件。目前研究热度高、应用广的分子生物传感器包括分子信标(MB)、共振能量转移系统(荧光共振能量转移和生物发光共振能量转移)和分子荧光互补系统(如双分子荧光互补、三分子荧光互补等)。文章介绍了这几类分子生物传感器的原理和特点,重点强调了它们在活细胞分子影像学中的运用,如:研究细胞内蛋白之间的相互作用,探索生物大分子在细胞中的定位、运动和动力学等。此外,还讨论了分子生物传感器的局限性和面临的挑战,并展望了未来发展方向。"眼见为实",分子生物传感器在这方面发挥独特的作用,它使我们前所未有地深入到细胞内部去观察生物分子事件乃至生物学过程,从而解答更多的生物学难题。 相似文献
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10月8日,钱学森堂侄、美籍华裔科学家钱永健作为3位获奖者之一夺得2008年度诺贝尔化学奖。帮助他们获奖的便是能发出鲜艳绿光的绿色荧光蛋白。 相似文献
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媒体和公众,一直关注“转基因”和“人兽胚胎”。我想加入讨论。
我非“利益攸关方”．这使我能尽量做到客观公平、学术端正。
“转基因”不见得不安全
转基因是一项生物技术,原理不复杂（做起来很麻烦）,就是把想要的基因,从别的生物基因组切下,设法插入另一生物的基因组中。例如,从一种水母基因组中,用酶切下绿色荧光蛋白基因,设法将它们插入其他动植物基因组中,这样繁殖出来的转基因后代,在紫外线下会发出绿色荧光。 相似文献
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目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础.方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平.结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达. 相似文献
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为满足VOCs残留控制的需要,提升产品质量和安全,无荧光纸张在国内正逐步推广应用。包装材料的绿色环保、包装印刷工艺的绿色环境,以及生产的节能降耗是追求的目标。在需要烫金的产品生产过程中,或多或少因纸张改变带来一些问题。 相似文献
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美国分子生物学家道格拉斯?普瑞舍在绿色荧光蛋白的中前期研究中做出了巨大贡献,然而却由于种种原因最后不得不退出了学术界。文章结合对这段历史的实证分析,进而全面剖析了其中折射出的科学基金评审、科学家在科研过程中的机遇和性格彰显等问题,由此提出解决以上问题的关键在于每个学术从业者的责任感,以及整个学术界对于真理、竞争、荣誉等科学活动规范结构的深入省察。 相似文献
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