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相似文献
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1.
目的:对根霉cw-1液体发酵生产的纤溶酶进行酶学性质初探,为天然溶栓药物的开发奠定理论基础。方法和结果:由SDS-PAGE测定该根霉纤溶酶为单一组分,相对分子量为32.5k Da;IEF电泳测定其等电点为8.3;该纤溶酶是一种糖蛋白,总含糖量为2.2%(w/v)。该纤溶酶可依次降解人血纤维蛋白的α、β和γ链。最适作用温度和p H分别为40oC和7.5;在p H5.8~10范围内,37℃保温24h,残余纤溶酶酶活在80%以上。结论:本实验研究的根霉纤溶酶可有效降解人血纤维蛋白,并且在人的正常体温下具有良好稳定性,显示了良好的溶栓药物特性。  相似文献   

2.
溶血栓药物近年来的研究进展   总被引:3,自引:0,他引:3  
血栓病是人类的常见多发病,心脑血管疾病中有很大比例本质为血栓病。溶栓疗法是治疗血栓性疾病的重要方法之一。本文概述了血栓形成和溶栓的机理,介绍了目前常用的溶栓药物。近年来溶血栓药物的研究进展主要集中在两大方面,一方面为通过基因工程技术和单克隆抗体技术改造的新型纤溶酶原激活剂药物,另一方面为新型来源的溶栓药,主要来自生物体天然产生的抗凝血和溶栓成分。本文对这些方法作了较为全面的综述。  相似文献   

3.
唐良华  夏黎明  苏敏 《科技通报》2006,22(5):622-627
利用均匀设计法对Bacillus sp.ZJU318产酶的最佳培养基进行了快速优化研究。结果表明,其最适产酶培养基为:3.28%黄豆粉,0.023%蔗糖,0.075%K2HPO4,配制时的pH为12(灭菌后pH为8~9);此外,其发酵的最佳条件为:发酵温度28℃,接种量20%,摇瓶装量20mL(250mL三角瓶)。在最适的发酵条件下,脂肪酶的发酵水平可达24.7U/mL。Bacillus sp.ZJU318脂肪酶作用的最适温度为45℃,40℃保温1h,活力几乎没有损失;但是,在50℃和60℃的条件下保温1h后,酶活降低得比较明显;酶作用的最适pH为9.0。在pH7~10,该脂肪酶较稳定,但是在酸性的环境中,酶的稳定性较低。  相似文献   

4.
碱性纤维素酶产生菌的筛选及其产酶条件   总被引:4,自引:0,他引:4  
宁静 《科技通报》2000,16(3):216-218
从土壤样品中筛选到一株产碱性纤维素酶的菌株SYH-1,产酶的最适碳源为麸皮,最适氮源为豆饼粉,摇瓶发酵最高酶活25u/mL,酶反应的最适温度为50℃,pH为9.6,主要作用底物为CMC,对滤纸,纤维素粉和结晶纤维素几乎作用。  相似文献   

5.
利用PCR技术从Zunongwangia profunda克隆出了酯酶基因est A,对其表达蛋白Est A的酶学性质进行分析,发现Est A的最适温度是48℃,在60℃仍具有较好的热稳定性;最适pH是8.0,在p H7.5-8.5具有较好的p H值稳定性。Zn~(2+)对酶的活性具有促进作用,而Mn~(2+)、Na~+等其他金属离子,有机溶剂PMSF对酶的活性具有强烈的抑制作用。上述性质中碱性酯酶、Zn~(2+)强烈激活作用及SDS耐受力等特点,表明该酶具有重要的应用价值,后续研究工作还需依赖于基因工程技术进行改造与提高。  相似文献   

6.
心脑血管疾病严重威胁人类健康,溶栓剂的研究与开发具有重大的经济效益和社会效益。溶栓剂来源广泛,其中微生物来源的溶栓剂展现出诱人的前景。本实验通过对20种大型真菌进行筛查,研究发现蛹虫草深层培养发酵液中具有纤溶活性物质,目前发现蛹虫草纤溶酶中有两个活性组分,本实验对蛹虫草纤溶酶第三活性组分相关酶学性质进行研究。由SDS-PAGE测定蛹虫草纤溶酶由单个亚基组成相对分子量约为28000Da;蛹虫草纤溶酶具有直接纤溶活性,对纤溶酶原的激活作用不明显。  相似文献   

7.
用动物蛋白酶和中性蛋白酶联合对鲐鲅鱼进行酶解.采用正交实验法优化制备鲐鲅鱼蛋白酶解物的最适工艺条件,探讨了影响鲐鲅鱼蛋白酶水解的主要因素.实验表明,最适的酶解条件为:动物蛋白水解酶与中性蛋白酶(酶活13万u/g)之比为2:1;加酶量为4.0%;酶解时间为4.5 h;酶解温度为50℃;酶解pH为7.0~7.5,在此条件下,鲐鲅鱼酶解液中氨基态氮浓度为1169.32g/100mL.  相似文献   

8.
一株嗜热梭菌β-葡聚糖酶基因的克隆和表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
提取嗜热梭菌(Clostridium.sp)基因组DNA,首次通过PCR克隆了该菌的β-葡聚糖酶基因全长,结果表明:该基因全长1040bp,ORF为1003bp,编码334个氨基酸,计算分子量为37.8kD,等电点为7.67。经Blast分析,该序列与热纤梭菌同源性最高(99%),而与基因库中嗜热梭菌的同源性为94%,该基因已被GenBank接受(AY225318)。用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切目的片段和表达载体pET鄄30a( )后相连接,构建重组表达载体pET鄄clo,并导入BL21细菌中表达.酶学特性表明:SDS鄄PAGE电泳在37kD左右有表达蛋白带,该工程菌最适酶活29.4U/mL,是出发菌的15倍,最适温度在80℃左右,最适pH在9左右。该工程菌可构建耐热性好、酶活高的杂合基因工程菌。  相似文献   

9.
羽毛的生物降解及其酶学性质的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
羽毛角蛋白是一种环境污染有机废弃物,通过微生物对角蛋的进行降解为合理利用,可以使它成为丰富的饲料蛋白来源。适当的降解方法对于羽毛资源的转化有着重要作用。采用正交设计优化地衣芽孢杆菌细胞转化羽毛的条件,得出角蛋白酶的合成和羽毛的分解指标,三因子最合适配比为:液料比20:1,反应pH 7.5,BC细胞加量0.5克,40℃下120 r/min处理72 h,其中细胞加量对羽毛分解有关键影响。粗酶液最适温度在37℃,在35℃~40℃有很好的热稳定性。不同pH下酶活变化明显,在pH 5-8范围内比较稳定。  相似文献   

10.
纤溶酶原(plasminogen,Pig)是溶解纤维蛋白和溶解血栓过程中关键的酶原前体之一,通过纤溶酶原激活剂激活而形成纤溶酶,进而发挥纤溶和栓溶作用。纤溶酶作为一种广谱的蛋白水解酶还能水解多种蛋白质,尤其是细胞外基质蛋白,并激活其它酶原,因而在组织重建,细胞转移,抑制肿瘤新生血管形成等过程中发挥重要作用。对纤溶酶原结构和功能的深入研究,无疑会为抗血栓、抗肿瘤的临床冶疗提供新的方法。  相似文献   

11.
本实验对黑曲霉JLSP-15淀粉酶的酶学性质进行了研究.该淀粉酶的最适温度为60℃,其热稳定性较差;最适pH为pH 6.0,在pH4.0-8.0范围内稳定性较好.Ca2+对淀粉酶活性具有显著促进作用,而Fe3+和Cu2+对其活性具有强烈的抑制作用.  相似文献   

12.
对黑曲霉HYA4菌株所产果胶酶的酶学性质进行了研究。结果表明:该酶反应最适温度为48℃,果胶酶最适pH值为4.8,果胶酶活力稳定的pH范围为3.0-6.0;Km值为4.33mg/mL;金属离子Ca2+、Mg2+对果胶酶有较强的激活作用,Ba2+对果胶酶也有一定的激活作用,Ag+、Mn2+、Zn2+、Fe3+、K+对果胶酶有抑制作用。由SDS-PAGE测定果胶酶的相对分子量为46000±3000Da;IEF电泳测定其等电点为4.7±0.2。  相似文献   

13.
以马铃薯淀粉为原料,通过单因素实验方法研究湿法工艺、喷雾工艺制备酶解马铃薯辛烯基琥珀酸淀粉酯,并对性能进行研究。确定制备参数:淀粉乳浓度40%、p H值8.9、温度35℃、时间4h、酸酐3%。酶添加量为0.2(U/ml),在此条件下,乳液乳化能力达到保油4.5倍,乳液稳定性48h,0.1,干粉溶解不托尾,溶解时间30min以内,干粉流动性测定值2.5。  相似文献   

14.
吕斯思  陈有亮  金鸟君 《科技通报》2012,(1):122-128,132
为了探求软质干酪的最佳酶凝乳工艺,采用L9(34)和L16(45)正交试验,研究了皱胃酶、木瓜酶、米黑毛霉酶三种单酶的最佳工艺以及复配酶最佳工艺,确定了皱胃酶添加量0.0125%,凝乳温度32℃,时间45 min;木瓜酶添加量0.01%,凝乳温度33℃,时间35min;米黑毛霉酶添加量0.0035%,凝乳温度32℃,时间40 min;复配酶最佳工艺参数为皱胃酶用量0.004%,木瓜酶用量0.006%,米黑毛霉酶用量0.0023%,温度32℃,凝乳时间30 min。结果表明,单酶复配具有协同作用,能够有效优化干酪酶凝乳工艺。  相似文献   

15.
一株产纤维素酶的诺卡氏属菌株筛选及产酶条件研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过对秸秆和牛粪干的增殖培养,从中分离、纯化获得42株菌株。经滤纸条崩解实验、溶菌圈大小测定及CMCase(羧甲基纤维素酶活)测定,筛选得到1株代号为GNA120对纤维素降解具有优势的放线菌,初步鉴定为诺卡氏菌属(Nocardia spp.)。实验确定该菌株的最佳产酶条件为:温度28℃;pH值5.6;硫酸铵作氮源时产酶能力最强。  相似文献   

16.
以蚕蛹为原料,经脱脂后,采用碱法提取蚕蛹蛋白,以双酶水解的方法制取可溶性蚕蛹多肽,最佳制取条件为固液比1:10,水解温度45℃,酶用量3%(木瓜蛋白酶:胰蛋白酶=1:1),水解时间6h,在此条件下制备的蚕蛹多肽得率为62.5%。使用胃蛋白酶和胰蛋白酶分别水解时,多肽得率为58.7%。  相似文献   

17.
黄孢原毛平革菌胞外过氧化物酶系的固定化及性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过共价结合法将木素过氧化物酶(Lip)与锰过氧化物酶(Mnp)固定于聚氨酯泡沫上.固定化酶的Lip与Mnp活力分别为1.45 U/g(泡沫干重)和0.49 U/g(泡沫干重),酶活回收率分别达到34.79%和27.78%.固定化酶Lip和Mnp热稳定性提高,在温度达到50℃时酶活损失均少于20%.与游离酶相比,固定化酶稳定的pH范围前后都扩大了0.5个单位.固定化酶重复利用性好,连续使用6次,酶活力损失少于3%.  相似文献   

18.
几丁质酶研究进展   总被引:18,自引:0,他引:18  
陈少波  吴根福 《科技通报》2004,20(3):258-262
几丁质是自然界中仅次于纤维素的第二大可再生自然资源。广泛存在于海洋中,其降解产物具有多种用途,几丁质酶除在降解几丁质方面有重要功能外,还在植病防治方面有重要作用。本文对几丁质酶产生生物、几丁质酶产生菌筛选方法、酶活的测定方法、酶的种类、酶的性质、酶的用途、几丁质酶基因及基因调节的最新进展作一综述,以期为几丁质酶的进一步利用提供参考。  相似文献   

19.
厌氧真菌能够产生高比活力的纤维素酶,但由于对厌氧环境的生产条件要求严格,生长速度缓慢,并不适合规模生产。本研究将厌氧真菌内切型-β-葡聚糖酶基因af1与大肠杆菌表达载体pET-28a(+)连接,得到重组质粒pET-28a(+)-af1。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,重组质粒转化后获得重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-af1。采用SDS-PAGE蛋白电泳对重组大肠杆菌的表达产物进行分析,在40 kDa附近得到与目的基因af1表达蛋白理论值相当的明显条带。AF1酶蛋白的最适pH为6.0,最适温度为45°C。重组大肠杆菌的摇瓶产酶试验结果显示:诱导培养18 h时,内切型-β-葡聚糖酶(CMC酶)活力可达410 U/mL。该项研究工作为进一步构建内切型-β-葡聚糖酶高产菌株奠定了良好的基础。  相似文献   

20.
将编码南极假丝酵母脂肪酶A的基因进行克隆,与pPIC9K连接构建成重组载体.并将其电转化入毕赤酵母GS115中.通过MD和MM平板及PCR扩增,筛选和鉴定重组子.重组细胞经过120 h培养后.发酵液上清酶活达到13 U/mL.聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,重组脂肪酶分子量约为50 kD.比原始脂肪酶略大.粗酶液经中空纤维素膜超滤浓缩、硫酸铵分级沉淀和离子柱交换层析后.得到在SDS-PAGE上显示为单一条带的重组脂肪酶.该酶最适反应温度为75 ℃,在70℃保持30 min后,仍具90%以上的活性,最适反应pH值为7.0,在pH6.0~8.0的范围内,具有一定的稳定性.  相似文献   

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